Кількісний аналіз бактерій в воді
В 1 мл| досліджуваної води визначають вміст|вміст| мезофільних аеробів і факультативних анаеробів, здатних|здібних| при 37°С||із| протягом доби на МПА утворювати колонії, видимі неозброєним оком або при збільшенні в 2-5 разів. З|із| кожної проби роблять|чинять| посів не менше двох різних об'ємів|обсягів|, вибраних з|із| таким розрахунком, щоб|аби| число колоній, що виросли, на чашці коливалося|вагалося| від 30 до 300.
Методика визначення мікробного числа:
1. При дослідженні мікробного числа водопровідної води розведення можна не робити. При посіві води відкритих водоймищ необхідно зробити попереднє розведення (Л/р 8, с. 39). До пробірок наливають по 10 см3 води і стерилізують в автоклаві (після стерилізації у кожній пробірці залишається 9 см3 води). Стерильною піпеткою беруть 1 см3 підготовленої вихідної суспензії та вносять до пробірки з 9 см3 стерильної води. Таким чином отримують перше розведення суспензії 1:10. Далі новою стерильною піпеткою беруть із першого розведення 1 см3 і вносять таким же чином в наступну пробірку з 9 см3 стерильної води, тобто готують друге розведення 1:100. Аналогічним чином готують третє, четверте і наступні розведення (номер розведення співпадає з кількістю нулів у знаменнику).
2. Підписують чашки Петрі (обов'язково зазначають розведення та інші необхідні дані) і висівають в них стерильною піпеткою по 1 см3 відповідного розведення матеріалу, починаючи з найбільшого, тобто з того, де є найменша кількість мікроорганізмів. Зазвичай одне розведення вносять у дві чашки Петрі (2-кратна повторність).
|
|
|
3. Посіви заливають стерильним розплавленим і охолодженим до температури 48-50°С поживним середовищем (МПА або СА) та перемішують круговими рухами, не відриваючи чашку від столу.
4. Після посіву чашки залишають для культивації у термостаті при температурі 37°С на 24 год.
5. Після інкубації чашки виймають і підраховують кількість колоній прямим або непрямим методами за допомогою пластин Лафара і камер Вольфюгеля (с. 45). У разі великої кількості колоній і рівномірному їх розподілі, дно чашки Петрі ділять на чотири або більше число секторів, підраховують кількість колоній в секторі (не менше чим на 1/3 поверхні чашки), знаходять середнє арифметичне число колоній і умножають на число секторів. Загальну кількість бактерій в 1 см3 (X) підраховують по формулі:
Х= n·10m,
де n - кількість колоній, підрахованих в чашці Петрі;
m - число десятикратних розведень.
За остаточний результат аналізу приймають середнє арифметичне, отримане|одержувати| по всіх чашках.
Санітарно-мікробіологічне дослідження питної води бродильним методом
|
|
|
Санітарно-мікробіологічне дослідження питної води бродильним методом полягає у визначенні загальних коліформ.
Загальні коліформи – це представники бактерій групи кишкових паличок, які ферментують лактозу з утворенням кислоти і газу.
Методика визначення загальних коліформ:
1. У колбу на 150 мл| з|із| 10 мл| концентрованого стерильного середовища|середи| ЛПС (лактозо-пептонне середовище) додають 100 мл| водопровідної води.
2. Ємкості з посівами маркірують, вказавши дату посіву, прізвище, курс і групу виконавця.|виконувача|;;;;
3. Посіви інкубують в термостаті при температурі 37°С| протягом 24-48 годин;
4. після інкубації посіви розглядають| і, якщо має місце зміна середовища |середи|(помутніння, утворення газу і кислоти, зміна кольору|цвіту|, бульбашки), проводять|виробляють| посів вмісту флаконів, що заграли, на середовище|середу| Ендо (штрихом за допомогою бактеріологічної петлі). Посіви інкубують в термостаті 16-18 годин при температурі 37ºС.|
5. При виявленні росту|зросту| на середовищі|середі| Ендо після закінчення терміну інкубації колонії мікроскопують|; за відсутності росту|зросту| або зростання|зріст||зрості| у вигляді шорстких, плівчастих, грубих, з|із| нерівними краями і інших нехарактерних для кишкових паличок колоній формулюють негативну|заперечну| відповідь; при виявленні темно-червоних колоній з|із| блиском і без нього, характерних|вдача| для кишкової палички – препарати, забарвлені|пофарбовані| по Граму, мікроскопують|.
|
|
|
Результати аналізу виражають|виказують| у вигляді: загальні колі форми відсутні, або присутні у 100 мл водопровідної води.
Завдання:
1. Визначити кількість мікроорганізмів (мікробне число) в водопровідній воді і в забруднених водах.
2. Провести посів води на середовище ЛПС і залишити для інкубації.
3. Провести посів на середовище Ендо проб, що забродили. Мікроскопувати колонії, що виросли (з фарбуванням). Замалювати виявлені мікроорганізми.
4. визначити загальні коліформи.
Питання для самоконтролю:
- Чому мікрофлора води не є постійною?
- про що говорить наявність у воді бактерій групи кишкової палички?
- Що таке сапробність? Назвіть зони сапробності.
- Дайте визначення поняттям «мікробне число», «загальні коліформи».
- Яким бактеріологічним показникам повинна відповідати вода, що подається у водопровідну мережу?
- Як повинен проводитися відбір проб води для бактеріологічних досліджень?
ЛАБОРАТОРНА РОБОТА № 11
Дата добавления: 2018-04-05; просмотров: 488; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!