Хламидийная инфекция (С. trachomatis).
Показания для исследования: признаки внутриутробной инфекции (пневмония, конъюнктивит, уретрит, вульвовагинит), заболевания мочеполовой системы, конъюнктивиты, артриты, кардиты.
Методы диагностики: основным методом диагностики хламидиоза, вызванного С. trachomatis, является РИФ.Исследуются соскобы из уретры, цервикального канала, конъюнктивы, а при врожденном хламидиозе также с задней стенки глотки.
Определение АТ к C. trachomatis методом ИФА является вспомогательным исследованием, т.к. из-за низкой иммуногенности возбудителя АТ образуются у 50% больных хламидийной инфекцией.
Приобретенный хламидиоз. Для установления диагноза необходимо одновременно определять АТ IgA и IgG. При сомнительном результате АТ IgA рекомендуется дополнительно исследовать АТ IgM.
Определение АТ класса IgA является очень ценным. Их выявляют через 10-14 дней от начала заболевания. После успешного лечения титр АТ IgA кC. trachomatis снижается через 2-4 месяца. При реинфекции титр АТ вновь возрастает. Титр IgA к C. trachomatis 1:50 трактуется как сомнительный, рекомендуется повторить исследование через 10-14 дней.
АТIgM к С. trachomatis появляются в крови к концу первой недели заболевания. Диагностический титр – 1:200 и выше. Максимальные концентрации определяются через 1-2 недели болезни. АТ IgM к С. trachomatis исчезают через 2-3 мес.
АТ IgGкC. trachomatis появляются через 15-20 дней от начала заболевания (диагностический титр 1:10-1:50), сохраняются длительно (годы), снижаются при излечении или затухании воспалительного процесса. Содержание их увеличивается при реинфекции.
|
|
|
Врожденный хламидиоз. При подозрении на внутриутробную хламидийную инфекцию сроки обследования новорожденного: 1-3 сутки жизни, повторно – 5-7 и 10-14 сутки. Отсутствие у новорожденных антихламидийных АТ не исключает врожденную инфекцию.
Хламидийная инфекция (С. pneumoniae)
Показания для исследования: затяжной кашель на фоне умеренной интоксикации в сочетании с внелегочными проявлениями (конъюнктивит, лимфаденопатия, артрит, уретрит, нарушения со стороны ЖКТ).
Методы диагностики: основную роль в диагностике респираторного хламидиоза играет серологическая диагностика исследования антител с помощью ИФА. Недостаточно информативными для диагностики респираторного хламидиоза являются метод РИФ (мазки из ротоглотки), определение АГ с помощью ИФА и ПЦР (кровь).
АТ IgM к C. pneumoniae подтверждают острое инфицирование даже при однократном определении. При реинфекции титр АТ IgM к C. pneumoniae увеличивается незначительно. АТ классов IgG и IgA появляются позже. Их совместное обнаружение указывает на острую или манифестную хроническую инфекцию.
|
|
|
АТIgAкС. pneumoniae– надежный маркер реинфицирования, поскольку присутствует в крови короткое время.
Факт наличия АТ класса IgGк C. pneumoniae в крови носит ретроспективное, а не диагностическое значение. Диагностическую ценность имеет исследование IgG к C. pneumoniae в динамике. Нарастание титра АТ наблюдается при острой или хронической инфекции.
Для диагностики респираторного хламидиоза используется также выявление АГ C. pneumoniae в смывах из ротоглотки или бронхиальном смыве методами РИФ, ПЦР, ИФА.
Лабораторными критериями респираторного хламидиоза являются наличие хламидийного АГ/ДНК (ИФА/ПЦР) в материале из ротоглотки; выявление хламидийных IgM (или IgA) антител в диагностически значимых титрах (ИФА), нарастание титров IgG в 2-4 раза в парных сыворотках (ИФА).
Диагностика хламидиоза может осуществляться тест-системами для определения антител IgG и IgM с общим родовым антигеном (C. trachomatis, C. pneumonia, С. psittaci ).
Токсоплазмоз ( Toxo )
Показания для исследования: подозрение на острый токсоплазмоз (лимфадениты и кардиопатии неуточненной этиологии, субфебрилитет, подострый и хронический энцефалит), подозрение на врожденный токсоплазмоз (затянувшаяся желтуха, судороги, гидроцефалия, микрофтальм, хориоретинит, увеит).
|
|
|
Методы диагностики: методом выбора диагностики токсоплазмоза является ИФА. Методы РСК, РНИФ имеют в большей степени историческое значение.
Табл. 8. Диагностические значения титров АТ против антигенов токсоплазмы (Протоколы диагностики, лечения и профилактики ВУИ у новорожденных детей, 2002)
| Реакция | Низкий уровень (ед. оптич. плот.) | Средний уровень (ед. оптич. плот.) | Высокий уровень (ед. оптич. плот.) |
| РСК | 1:5-1:20 | 1:40-1:80 | 1:160-1:640 |
| РНИФ | 1:20-1:80 | 1:160-1:640 | 1:1280 и> |
| ИФА* | 0,5-1 | 1,0-1,5 | 1,5 |
* О положительных результатах реакции могут свидетельствовать показатели, выраженные в единицах оптической плотности (ОП) > 1,5; иммуноферментных единицах (EIU) > 60, международных единицах (МЕ) > 125 и титрах антител (ТА) > 1:1600.
Внимание! Нормы ИФА зависят от того, какой набор реактивов используется для определения концентрации антител. Например, в лабораториях «Синэво» приняты следующие нормы: IgG – менее 9,0 — отрицательный результат, а более 12 – положительный результат; IgM – менее 0,8 – отрицательный результат, а более 1,1 – положительный результат.
Приобретенный токсоплазмоз. При анализе и интерпретации результатов серологической диагностики следует учитывать «иммунологическую» инкубацию – появление антител на антигены паразита только через определенный латентный период – и оценивать результаты исследований в динамике.
|
|
|
АТ IgM к T. gondii появляются через 1-3 недели после заражения, достигают пика через месяц и исчезают через 2-3 мес., иногда уже через месяц. При первичном инфицировании АТ IgM выявляют у 97% инфицированных токсоплазмами. При реинфекции титр АТ IgM вновь повышается. При наличии иммунодефицита (у больных СПИДом) они могут не обнаруживаться.
Высокую информативность для диагностики и мониторинга токсоплазмоза имеют АТ IgA. АТ класса IgA появляются через 2-3 недели после заражения, достигают максимальной концентрации через месяц, в 90% случаев исчезают через 6 месяцев (в отдельных случаях могут выявляться в течение года). Их концентрация может увеличиваться при реактивации. IgA свидетельствует в пользу активного процесса, позволяет установить подострое течение и рецидив заболевания.
АТ IgG выявляются в крови при острой, подострой и хронической формах токсоплазмоза. При первичном инфицировании АТ IgG появляются через 3-4 недели после контакта и сохраняются до 10 лет. При острой инфекции информативен метод парных сывороток. По нарастанию титра АТ при исследовании через 2-4 недели можно судить о развивающейся инфекции. При давности заражения более 12 мес. повышенные показатели АТ IgG не связаны с клиническими проявлениями и проводимой терапией.
Определение низкоавидных IgG-антител с расчетом индекса авидности (ИА) оправдано в случаях, когда не выявляются специфические IgM. При ИА менее 40% можно предполагать заражение в течение последних 6 месяцев и сопоставлять этот показатель со сроком беременности. При инфицировании в течение последних 3-х месяцев, предшествующих тестированию, ИА определяется менее 30%. ИА от 40% до 60% относится к числу пограничных и может свидетельствовать о завершении острого или подострого процесса. У пациентов с хроническим течением и у инфицированных в давние сроки ИА более высокий. Повторное определение ИА в динамике не целесообразно, т.к. высокий ИА не исключает реактивацию. Для оценки эффективности терапии определение ИА также не целесообразно, т.к. в результате выброса антигена происходит образование низкоавидных антител, за счет чего наблюдается снижение ИА и повышение содержания специфических антител. В этом случае целесообразно определение IgA.
Диагностическая ценность определения ДНК в ПЦР при приобретенном токсоплазмозе не высока из-за кратковременной паразитемии.
Врожденный токсоплазмоз.Обнаружение АТ класса IgM у новорожденного свидетельствует о врожденной инфекции. При внутриутробном инфицировании АТ IgM выявляются у 75% новорожденных, но утрачиваются через 3 мес. Специфическое лечение женщин на ранних стадиях процесса снижает риск поражения плода на 60%.
В связи с прохождением материнских АТ через плаценту у новорожденных могут выявляться материнские АТ Toxo IgG. К 4-6 мес. концентрация материнских АТ падает. Стойкое повышение уровня АТ IgG ко второму полугодию жизни подтверждает врожденный токсоплазмоз. Для врожденного токсоплазмоза характерно длительное, в течение многих лет, сохранение титров АТ IgG.
Высокое диагностическое значение при врожденном токсоплазмозе имеет детекция ДНК T. gondii в крови и ликворе методом ПЦР.
Сифилис
Показания для исследования: диагностика скрытого сифилиса.
Метод диагностики: для диагностикисифилиса наиболее широко используют серологические методы с определения противосифилитических IgM и IgG.
АТ класса IgM появляются на 2-4 неделе после заражения и исчезают у нелеченых через 18 мес., при лечении раннего сифилиса – через 3-6 мес., позднего – через 1 год. АТ IgG появляются на 4 неделе после заражения, могут длительно сохраняться, даже после клинического излечения.
Серологическая диагностика сифилиса осуществляется следующим образом:
РМП/ RPR и их аналоги – отборочная реакция, качественный и количественный варианты;
РИФ, РИБТ – диагностические реакции;
ИФА, РПГА – отборочные и диагностические реакции, в том числе для ликвородиагностики;
РИФ, РИБТ, РСК (реакция Вассермана) – диагностические реакции.
Табл. 6. Методы лабораторной диагностики сифилиса (Дмитриев Г.А., 2004)
| Название реакции | Используемые реактивы | Предназначение | Модификации реакции | Примечание |
| Реакция микропреципитации (РМП) | кардиолипиновый АГ | Отборочный (скринирующий тест) | RPR, VDRL, TRUST | быстрый простой тест |
| Реакция пассивной гемагглютинации (РПГА) | трепонемный АГ или патогенный (набор) | Специфический тест: подтверждающий или отборный | РПГА с культуральным или патогенным АГ, эритроциты птичьи или бараньи | Высокочувствительный быстрый и простой тест |
| Иммуноферментный анализ (ИФА) | культуральный трепонемный АГ (набор) | Специфический тест: подтверждающий или отборный | Выявление иммуноглобулинов классов G, M и суммарных | Высокочувствительный быстрый и простой тест |
| Комплекс серореакций: РСК и РМП | трепонемный ультраозвученный и кардиолипиновый АГ | Диагностический тест | Недостаточно чувствительный и специфический тест | |
| Реакция иммунофлюоресценции (РИФ) | трепонемный АГ (Штамм Никольс) | Специфический, подтверждающий тест | РИФ-абс, РИФ-200, РИФ-ц | Высокочувствительный, субъективный тест |
| Реакция иммобилизации бледных трепонем (РИБТ) | трепонемный АГ (Штамм Никольс) | Меланжерный метод | Высокочувствительный тест, субъективный |
Тесты для выявления сифилиса делятся на нетрепонемные и трепонемные (специфические).
Нетрепонемные основаны на выявлении АТ к липопротеидам трепонем (реагинов), способных неспецифически связываться с кардиолипиновым АГ. К ним относят качественные и количественные реакции микропреципитации (РМП) с кардиолипиновым АГ. Зарубежные модификации – RPR, VDRL, TRUST. Эти тесты являются отборочными. Их используют при скрининговом обследовании населения на сифилис.
Кроме качественных реакций используют количественные с определением титра реагиновых АТ. Титр более 1:16 указывает на активный процесс, титр менее 1:8 – на ложноположительный результат, низкий титр возможен при позднем или позднем латентном сифилисе. Исследования титра АТ в динамике используют для оценки эффективности лечения. Адекватное лечение первичного или вторичного сифилиса сопровождается 4-кратным снижением титра АТ к 4 мес. и 8-кратным – к 8 мес. Подъем титра в 4 раза указывает на рецидив, реинфекцию.
Следует иметь ввиду, что ложноположительные результаты РМП возможны при склеродермии, системной красной волчанке, ревматоидном артрите, инфекционном мононуклеозе, микоплазмозе, активном туберкулезе, скарлатине, бруцеллезе, лептоспирозе, кори, эпидемическом паротите, ветряной оспе, хламидиозе, гемобластозах.
При обследовании новорожденных группы риска подъем титра АТ в течение 6 мес. свидетельствует о врожденном сифилисе, при пассивном носительстве АТ исчезают в течение 3 мес. При оценке результатов РМП у детей грудного возраста следует иметь в виду феномен прозоны. В тех случаях, когда количество АТ в крови значительно превышает уровень АГ, реакции агглютинации не происходит. Для нейтрализации данного эффекта необходимо проведение исследования, как с разведением исследуемой сыворотки, так и без ее разведения.
При положительных отборочных тестах пациенту проводят диагностические (трепонемные) тесты – РПГА, РСК (реакция Вассермана), РИФ, ИФА.
В РПГА в качестве тест-системы используют АГ из культуральных или патогенных бледных трепонем, результаты выражают в титрах, используют для диагностики заболевания и оценки проводимого лечения.
В ряде случаев применяют комплекс серологических реакций на сифилис, состоящий из РСК с трепонемным и кардиолипиновым АГ и РМП. Комплекс относят к диагностическим подтверждающим тестам.
РИФ используют для выявления специфических трепонемных АТ IgG. Исследование проводят для подтверждения диагноза, если есть подозрение на поздний сифилис любого типа, даже при отрицательной реакции микропреципитации. Титры IgG в РИФ не коррелируют с клинической активностью заболевания и остаются высокими в течение многих лет, их не используют для оценки проводимого лечения. Также этот тест не может быть использован для диагностики врожденного сифилиса у новорожденных.
Основным специфическим тестом для подтверждения сифилиса является ИФА. Выявление АТ IgM является приоритетным для диагностики первичного, вторичного и врожденного сифилиса, при врожденном сифилисе имеет чувствительность 100%. Определение титров IgM используют для диагностики рецидивов и реинфекций, мониторинга терапии. При эффективном лечении содержание IgM снижается до отрицательных результатов.
Кандидоз
Показания для исследования: диагностика поверхностных и висцеральных форм кандидоза, тяжёлые поражения кожи и слизистых при иммуносупресии, обширных ожогах и обширных хирургических вмешательствах.
Метод диагностики: серологический, иммунологический (ИФА). Диагностика поверхностного кандидоза основана на обнаружении элементов гриба в окрашенном мазке.
АТ к Candida ( albicans, tropicalis , pseudotropicalis, parapsilosis) в сыворотке крови в норме отсутствуют.
В этиологическом спектре кандидоза отмечается резкое преобладание Candida albicans.
При висцеральных формах АТ класса IgG к Candida albicans обнаруживаются иммуноферментным методом более чем у 90% больных уже в первые 2 недели заболевания, у переболевших сохраняются более 5 лет.
Для подтверждения заболевания важно 4-х кратное нарастание АТ между острой фазой и реконвалесценцией, 4–х кратное снижение АТ в процессе лечения – показатель успешной терапии.
Одним из видов иммунологической диагностики служит РЛА для определения АГ Candida.
АГ Candida albicans в сыворотке крови в норме отсутствуют. Этот тест более специфичен, чем выявление АТ. Чувствительность метода у онкологических больных составляет 65-70% при специфичности – 100%. Для выявления АГ в сыворотке крови следует проводить не реже 2 раз в неделю.
Обнаружение молекул ДНК в материале в реакции ПЦР является самым чувствительным методом диагностики.
Лямблиоз
Показания для исследования: диарея, диспептические проявления, признаки поражения системы желчевыделения или поджелудочной железы, субфебрилитет, проявления аллергии (в том числе эозинофилия), проявления токсидермии, нарушения питания, анемия неясного генеза.
Методы диагностики: копрологическое, иммунологическое и серологическое исследование.
Материалом для исследования служат фекалии, дуоденальное содержимое, кровь.
При микроскопии осадочных компонентов фекалий или дуоденального содержимого, позволяющих обнаружить цисты или трофозоиты лямблий, эффективность метода составляет менее 50%. Диагностику затрудняет «феномен прерывистого цистовыделения», который может составить 8-12 дней и более. При назначении желчегонных и противолямблиозных препаратов цисты выделяются чаще.
Высокоэффективный метод диагностики лямблиоза – выявление АГ лямблий в кале с помощью моноклональных АТ к АГ GSA-65 (ИФА, РИФ). Метод позволяет выявлять лямблии даже в «немые» промежутки, когда цисты не выявляются. АГ GSA-65 прекращает выделяться с фекалиями лишь спустя 2 недели после излечения лямблиоза, поэтому контрольное исследование показано через 2 недели после окончания терапии.
Из серологических методов используется ИФА, позволяющий определить специфические АТ IgM, IgA, IgG или суммарные антитела. АТ класса IgM к лямблиям обнаруживаются в крови на 10-14 сутки после инвазии. Через 2-3 недели появляются специфические АТ IgG, которые сохраняются на высоком уровне на всех стадиях заболевания. После полной элиминации паразита уровень специфических IgG и суммарных АТ резко снижается в течение 1-2 месяцев, но полностью исчезает из крови через 2-6 месяцев. В качестве контроля излечения определение антител не используют. Диагностического значения IgG АТ не имеют.
Высокоспецифичный и чувствительный метод (92-98%) – выявление ДНК лямблий в ПЦР.
Аскаридоз
Показания для исследования: острый инфекционно-аллергический процесс (лихорадка, мигрирующие инфильтраты в легких, бронхит, уртикарные высыпания на коже, отек Квинке, увеличение печени и селезенки), синдромокомплекс (боли в животе, тошнота, нарушение сна, нарушение стула).
Методы диагностики: копрологический, серологический.
Материалом для исследования служат фекалии, кровь, редко мокрота.
В ранней миграционной стадии при подозрении на аскаридоз рекомендуется провести клинический анализ крови (выявляется гиперэозинофилия, умеренный лейкоцитоз). При рентгенологическом исследовании легких отмечается наличие мелких округлых, звездчатых, фестончатых инфильтратов. Исследование фекалий не обнаруживает гельминтов. Редко удается обнаружить личинок аскарид в мокроте.
IgM можно обнаружить в течение 1-2 недель после инфицирования, далее их уровень опускается ниже определяемых значений.
В случае излечения от аскаридоза IgG через 3 месяца уже не выявляются.
Существующие методы серодиагностики основаны на определении IgG.
Определение специфических антител к аскаридам класса IgG (анти-Ascaris lumbricoides IgG) методом ИФА позволяют предположить диагноз уже в ранней (миграционной или личиночной) стадии. Поскольку на основании только одного серологического тестирования диагноз не может быть поставлен, методы серодиагностики аскаридоза широкого применения в практике не имеют.
В кишечной стадии (через 3 месяца) диагностика основана на выявлении яиц гельминтов в кале. Используют методы накопления (эфир-формалиновый, Каплантарян и др.). Ввиду возможного перерыва в яйцекладке самок рекомендованы повторные исследования с интервалом 1-2 недели.
Токсокароз
Показания для исследования: лимфаденопатия, гепатомегалия, лихорадка неясного генеза, рецидивирующий бронхообструктивный синдром, сыпи аллергического характера, неясные инфильтративные изменения в легких, снижение остроты зрения, страбизм, эозинофилия.
Метод диагностики: серологический, методом ИФА.
Диагностическим для висцерального токсокароза считается титр IgG к токсокаре 1:800 и выше, для глазного токсокароза – 1:400 и выше. Титр 1:200-1:400 свидетельствует об инвазированности. Таким детям необходимо провести консультацию окулиста и при отрицательных результатах осмотра проводить повторное обследование каждые 3 месяца.
Для оценки сроков инвазии (острая и хроническая стадия) в профильных учреждениях используют определение авидности антител. Низкая авидность IgG к токсокарам (индекс до 35%) является маркером острой стадии инвазии, высокая (выше 40%) – маркером хронической стадии.
Информативным является повышение общих и специфических IgE. Коммерческие тест-системы к антигенам Тoxocara canis в России до настоящего времени отсутствуют.
Для подтверждения результатов ИФА можно использовать иммуноблотинг.
Паразитологический диагноз токсокароза возможет только при исследовании биопсийного материала, когда в тканях удается обнаружить личинки токсокар.
Описторхоз
Показания для исследования: вероятный диагноз описторхоза (лихорадка, токсико-аллергический синдром, синдромы холецистопанкреатита, гастродуоценита, лейкоцитоз и эозинофилия) с учетом эпидемиологического анамнеза (употребление термически не обработанной, слабосоленой рыбы в эндемичных районах – бассейны пресноводных рек).
Метод диагностики: серологический, методом ИФА, паразитологический.
АТ к возбудителю описторхоза в сыворотке крови в норме не обнаруживаются. Чувствительность метода ИФА в острую фазу приближается к 100%, в хронической фазе – к 70%.
АТ IgM появляются в крови спустя 1 неделю после инфицирования, достигают максимума через 1,5-2 нед, а через 6-8 нед. их тир начинает быстро снижаться.
АТ IgG начинают синтезироваться на 2-3 недели позже IgM, их концентрация становится максимальной ко 2-3 месяцу и может сохраняться в течение 1 года.
Паразитологическая диагностика описторхоза методом копроовоскопии возможна только в хронической стадии, т.к. гельминты начинают выделять яйца спустя 6 недель от начала инвазии.
Helicobacter pylori (НР)
Антитела к НР класса IgG в сыворотке крови. В норме отсутствуют (качественное определение). Исследование относят к скрининговым.
Показания для исследования: установление этиологии гастропатологии, выделение группы пациентов с положительными результатами исследования для проведения ФГДС, оценка эффективности эрадикационной терапии. Данные антитела появляются в крови через месяц после инфицирования. Чувствительность теста 98%, специфичность 48%, при асимптомном течении гастрита у взрослых – 15-50%. В настоящее время лечение больных с асимптомными и бессимптомными вариантами гастрита не рекомендуется. После успешной эрадикации уровни анти-НР антител снижаются в сроки 3-6 месяцев, но остаются положительными почти у половины больных в течение года.
«Быстрая» серологическая диагностика проводится при помощи визуального экспресс-теста по определению в 2-х каплях цельной крови человека, а также в сыворотке или плазме IgG-антител к Helicobacter pylori одностадийным иммунохроматографическим методом. Использование у детей для диагностики Нр-инфекции «быстрых» серологических тестов ограничено тем, что до 10 лет результаты могут быть отрицательными даже при наличии бактерий в слизистой оболочке желудка.
Целиакия
Дата добавления: 2018-11-24; просмотров: 231; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!