Ветряная оспа ( Varizella - zoster)

Показания для исследования: диагностика ветряной оспы и опоясывающего лишая (Herpes-Zoster).

Метод диагностики: для специфической диагностики применяют ИФА, РСК, РТГА.

АТ IgM к варицелла-зостер (VWZ) в сыворотке в норме отсутствуют, их используют для определения острого периода ветряной оспы или опоясывающего лишая. АТ IgM регистрируются в первые 5 дней после появления сыпи, исчезают – через несколько недель или месяцев.

АТ IgG к VWZ появляются в период реконвалесценции и могут присутствовать в крови неопределённое время, диагностическим считается 4-кратное увеличение их титра в парных сыворотках. Первую пробу берут не позднее 3-го дня высыпаний, вторую – спустя 10-14 дней

Вирусологическая диагностика: ПЦР и РИФ.

Материалом для выделения VWZ служит содержимое везикулезной жидкости.

При световой или электронной микроскопии в мазках везикулезной жидкости обнаруживают вирусные частицы (тельца Арагао). Вирусологический метод практически не используется.

Эпштейн-Барр вирусная инфекция (инфекционный мононуклеоз)

Показания для исследования: диагностика инфекционного мононуклеоза, в том числе при комплексе признаков: лихорадка, лимфаденопатия, увеличение печени и селезенки, изменение периферической крови.

Лабораторная диагностика инфекционного мононуклеоза базируется на сочетании различных методов исследования.

Методы диагностики: определение гетерофильных антител (реакции Гоффа-Бауэра и Пауля-Буннеля), специфических антител (ИФА, ИХА [иммунохемилюминисцентный анализ]) к вирусу Эпштейн-Барр (ВЭБ), ДНК методом ПЦР.

Важнейшую роль в диагностике инфекционного мононуклеоза играют серологические методы исследования.

Определение гетерофильных АТ в реакциях Гоффа-Бауэра и Пауля-Буннеля имеет преимущественно историческое значение и может быть использовано только в качестве скрининга. Диагностический титр в реакции Пауля-Буннеля 1:224. На первой неделе заболевания гетерофильная агглютинация положительна у 60% пациентов, через 4 недели – у 90%. Возможно определение гетерофильных АТ в реакции латексной агглютинации.

Особенностью специфического иммунного ответа на ВЭБ-инфекцию является дифференцированный по времени синтез иммуноглобулинов к различным вирусным белкам: вирусному капсидному антигену (анти-VCA), раннему антигену (анти-ЕА), нуклеарному (ядерному) антигену (NA).

Информативность и эффективность диагностики повышается при одновременном определении антител ко всем вирусным белкам, что позволяет выявить стадию ВЭБ-инфекции.

Следует отметить, что спектр выпускаемых фирмами диагностических тест-систем, основанных на определении титра АТ, очень широк, поэтому необходимо ориентироваться на диагностический титр АТ, указанный в инструкции к тест-системам.

Лучшим маркером первичной инфекции является положительный тест на антитела к капсидному антигену класса IgМ (анти-VCA IgM), но необходимо исключить ложноположительный результат при ревматоидном артрите. Анти-VCA IgМ почти всегда присутствуют в крови при активной инфекции, поэтому очень чувствительны и специфичны для острого эпизода инфекционного мононуклеоза.

Анти-VCA IgМ появляются очень рано, обычно до клинических симптомов и обнаруживаются в начале заболевания в 100% случаев; высокие титры бывают на 1-6 неделе от начала инфекции, начинают снижаться с 3-й недели и обычно исчезают через 1-6 мес.

Наличие анти-VCA IgМ в крови больного более 3 мес. свидетельствует о затяжном течении ИМ, более 6 мес. – о хроническом течении. Длительная персистенция высоких титров анти-VCA IgG характерна для ВЭБ-индуцированных опухолей, аутоиммунных заболеваний, иммунодефицитных состояний.

Антитела к капсидному антигену класса IgG (анти-VCA IgG) могут появиться рано (1-4 недели), достигают пика ко 2-му месяцу заболевания. В начале заболевания обнаруживаются в 100% случаев. Только у 20% пациентов выявляют 4-кратное увеличение титра при исследовании парных сывороток. Титр снижается при выздоровлении, но обнаруживается в течение нескольких лет (часто пожизненно) после перенесенной инфекции, поэтому бесполезен для диагностики инфекционного мононуклеоза. Наличие анти-VCA IgG свидетельствует о состоянии после инфекции и иммунитете.

Таким образом, на ранних фазах развития инфекции в крови пациента обнаруживаются анти-VCA IgM и анти-VCA IgG, причем синтез анти-VCA IgG продолжается весь период сосуществования вируса и макроорганизма (т.е. пожизненно), а анти-VCA IgM определяются только в течение 1-3 мес.

Антитела к ранним антигенамВЭБ IgG представляют собой иммуноглобулины, состоящие из диффузного D (анти-EA-D IgG) и связанного R (анти-EA-R IgG) компонентов.

Анти-EA IgG достигают высокого титра на 3-4 неделе острой ВЭБ-инфекции, исчезают в среднем через 3-4, максимум через 6 месяцев. Поэтому определение АТ к раннему антигену ВЭБ – это тест для ранней диагностики острой первичной инфекции.

Для определения АТ класса IgG к раннему антигену ВЭБ в лабораториях используют метод иммуноферментного анализа (ИФА) и иммунохемилюминистентного анализа (ИХА).

При оценке результатов исследований методом ИФА уровень анти-EA IgG в титре выше 1:40 оценивается как положительный и свидетельствует об острой ВЭБ-инфекции.

При оценке результатов исследования методом ИХА, уровеньАТ класса IgG к раннему антигену ВЭБ:

• менее 10 Е/мл – результат отрицательный;

• 10-40 Е/мл – результат сомнительный («серая» зона);

• более 40 Е/мл – результат положительный.

Сомнительные результаты должны быть повторены через 5-7 дней и в случае получения аналогичных данных расцениваются как отрицательные.

Отсутствуют анти-EA IgG при атипичной форме заболевания.

Длительное (свыше 6 мес.) присутствие высоких титров анти-ЕА IgG (1:40 в ИФА или выше 40 Е/мл в ИХА) свидетельствует о сохраняющейся активности процесса и переходе в хроническую форму.

Увеличение титра анти-EA IgG является индикатором реактивации инфекции. Анти-EA IgG коррелирует с первичной инфекцией, но наиболее часто используются как маркер фазы реактивации.

Титры анти-EA IgG могут быть очень высокими (например, 1:1280-1:10240) в случаях, связанных с ВЭБ-ассоциированными опухолями (лимфома Беркитта и назофарингеальная карцинома) и аутоиммунными заболеваниями.

Антитела к ядерному антигену класса IgG (анти-EBNA IgG) (EBNA=нуклеиновые кислоты вируса) появляются позже всех, спустя недели и месяцы от начала болезни (на стадии реконвалесценции).

Их уровень возрастает в период выздоровления (3-6-12 мес.) и может сохраняться в крови всю жизнь. Эти антитела являются показателем имевшей место в прошлом инфекции (т.н. паст-инфекция). Их можно обнаружить у более 50% подростков и более 90% взрослых людей.

Если анти-EBNA IgG не обнаруживаются в крови в течение 3-6 мес. после начала ИМ – это свидетельствует о наличии иммунодефицита (дефект Т-клеточного звена иммунитета).

При использовании метода ИФА можно одновременно определить анти-EBNA классов IgM и IgG. Если анти-EBNA IgM больше анти-EBNA IgG – острая инфекция, при обратном соотношении – ранее перенесенная.

Отсутствие анти-EBNA IgG в сыворотке крови при наличии анти-VCA IgМ и анти-ЕА IgG свидетельствует о текущей инфекции.

Таким образом, для острого периода характерно наличие АТ классов IgM и IgG к вирусному капсидному АГ (VCA) и IgG к раннему АГ (ЕА). Для периода реконвалесценции – IgG к капсидному (VCA) и ядерному АГ (EBNA). Для обострения хронической инфекции характерно повышение АТ к капсидному (VCA) IgG, ядерному (EBNA) IgG и раннему (ЕА) IgG антигенам.

Как правило, лабораторный диагноз первичной ВЭБ-инфекции не вызывает затруднений и определяется наличием в сыворотке анти-VCA IgM и анти-VCA IgG, а также анти-EA IgG. Однако известно, что анти-VCA-IgM продуцируются не у всех пациентов с первичной инфекцией, более того, в редких случаях анти-VCA IgM могут определяться в течение 1 года после инфицирования. Кроме этого у 30% инфицированных может отсутствовать либо прекращаться (например, при иммуносупрессии) синтез маркера паст-инфекции – антител к NA. Для дифференциации нетипичных случаев первичной и паст-инфекции рекомендуется использовать определение индекса авидности специфических антител к капсидному белку вируса. Авидность антител определяется силой взаимодействия их с антигенным эпитопом вирусного белка и зависит, как правило, от давности инфекции и особенностей иммунной системы человека (скорости соматических мутаций в генах, кодирующих вариабельные участки IgG).

Вирусологическая диагностика: дополнительным подтверждением ВЭБ служит тест по выявлению ДНК вируса в крови или слюне методом ПЦР. Материалом для исследования может служить также соскоб слизистых оболочек (уретра, цервикальный канал, стенки влагалища, секрет предстательной железы), осадок мочи.

Чувствительность ПЦР 70-75%, что значительно ниже, чем при других герпесвирусных инфекциях (95-100%).

Обнаружение ДНК ВЭБ в исследуемом материале указывает на этиологическую роль вируса в развитии заболевания при наличии соответствующей клинической картины. Однако из-за того, что ВЭБ может длительно персистировать в организме пациента и, соответственно, обнаруживаться в исследуемом материале, оценить его роль в развитии заболевания не всегда возможно. Применение ПЦР эффективно для обнаружения ЭБВ-инфекции у новорожденных, когда определение серологических маркеров малоэффективно, а также в сложных и сомнительных случаях у старших детей.

Маркеры Эпштейн-Барр инфекции в зависимости от формы заболевания приведены в табл. 1.

Табл. 1. Формы Эптшейн-Барр вирусной инфекции и ее маркеры

Форма инфекции	Низкоавидные антитела	Анти- VCA IgM	Анти- VCA IgG	Анти-EA IgG	Анти-NA IgG	ДНК в крови	ДНК в слюне
Отсутствие инфицирования	-	-	-	-	-	-	-
Острая первичная инфекция (инфекционный мононуклеоз)	+	+	+	+	-	+	-/+
Поздняя первичная инфекция	-	+/- (≤0,3)	+	+	+/-	+	-/+
Атипичная первичная инфекция	-	+	+	-	-	+	-/+
Хроническая инфекция в стадии реактивации	-	+/-	+	+	-	+	+/-
Ранняя паст-инфекция (реконвалесценция)	-	-	+	+	+	-	-/+
Поздняя паст-инфекция (латентная инфекция у клинически здоровых людей)	-	-	+	-	+	-	-/+

Следует иметь в виду, что в редких случаях клиника инфекционного мононуклеоза может быть обусловлена герпесом типа 6, токсоплазмозом, ЦМВИ, ВИЧ.

Дата добавления: 2018-11-24; просмотров: 217; Мы поможем в написании вашей работы!

Поделиться с друзьями:

⇐ Предыдущая 1 234 5 6 7 8 9 10 Следующая ⇒

Мы поможем в написании ваших работ!