Гемофильная инфекция ( Hib-инфекция)
Показания к исследованию: диагностика клинических форм HiB-инфекции.
Методы диагностики: бактериологический, серологический.
Материалом для исследования служат кровь, СМЖ, плевральный выпот, мокрота, мазки из носоглотки, моча.
Диагноз Hib-инфекции устанавливают на основании выделения гемокультуры возбудителя и культуры из патологических секретов. При обнаружении возбудителя в мазках из носоглотки диагностическое значение имеет только выделение капсульных штаммов.
Для подтверждения диагноза, особенно при развитии менингита, в настоящее время применяются методы обнаружение специфического АГ (РЛА, встречный иммуноэлектрофорез, ИФА), методы выявление АТ к Haemophilus influenza (ИФА, РПГА) и обнаружение ДНК возбудителя методом ПЦР.
Дифтерия
Показания к исследованию: диагностика клинических форм дифтерии, оценка напряженности иммунитета, оценка эффективности вакцинации дифтерийной вакциной.
Методы диагностики: бактериологический, серологический, молекулярно-генетический.
Материалом для исследования служат кровь, мазки с пораженной поверхности (слизистая оболочка миндалин, носа и др.).
Бактериологическая диагностика основана на выделении чистой культуры возбудителя и его идентификации по культурально-морфологическим, биохимическим и токсигенным свойствам. Проводится трехкратно (при поступлении в стационар, на 2-е и 3-е сутки после госпитализации).
|
|
|
С целью ранней диагностики дифтерии используют РЛА для обнаружения дифтерийного токсина в крови в течение 1-2 часов. Серологический метод основан на выявлении специфических антитоксических АТ методом парных сывороток, взятых с интервалом 10-14 дней. Используют реакции РПГА, РНГА, РН у больных, не леченых антидифтерийной сывороткой. Диагностическое значение имеет нарастание АТ в 4 раза и выше. Метод ИФА применяют для количественного и качественного определения антибактериальных и антитоксических АТ классов IgA, IgM, IgG.
Использование ПЦР позволяет определить наличие гена дифтерийного токсина (tox-гена) в ДНК Corynebacterium diphtheriae.
Коклюш
Показания к исследованию: диагностика коклюша, длительный или навязчивый кашель в отсутствие повышения температуры тела.
Метод диагностики: основным методом является бактериологическое исследование, однако подтвердить клинический диагноз обнаружением Bordetella pertussis удается лишь в 13-15% случаев.
Материалом для исследования служат мазки с задней стенки глотки или мокрота.
Экспресс методы, направленные на выявление АГ (РИФ, РЛА, ИФА) или ДНК (ПЦР) применяются в катаральном периоде и на 1-2 неделях спазматического кашля.
Применяемые в настоящее время методы серологической диагностики РА и РПГА носят ретроспективный характер и не вполне надежны. Для обнаружения АТ к Bordetella pertussis применяют метод парных сывороток с интервалом 10-14 дней с нарастанием титра АТ в 4 раза и более. Диагностически значимым является титр 1:80 и выше (у непривитых). В случае использования РПГА у привитых детей, контактировавших с больным коклюшем, наблюдается нарастание титра АТ, как и у заболевших коклюшем, что затрудняет интерпретацию диагноза. При использовании РА можно получить ложноотрицательный результат.
|
|
|
В связи с этим желательно определение АТ классов IgA, IgM, IgG к АГ Bordе tella pertussis в сыворотке крови методом ИФА. AT класса IgM к АГ Bordеtella pertussis и IgA к токсину появляются в крови на 3-й неделе от начала заболевания. AT класса IgG появляются в крови несколько позже, их можно обнаружить в течение нескольких лет после выздоровления. По возможности результаты ИФА следует подтверждать методом Western-blot (ИФА на тестовых полосках) с определением АТ к коклюшному токсину и филаментозному гемаггютинину (специфичность более 95%).
Паракоклюш
Нарастание титра АТ в серологических реакциях (РА, РСК) наблюдается со 2-ой недели заболевания с максимумом на 3-4 неделях.
|
|
|
Лептоспироз
Показания к исследованию: вероятный диагноз лептоспироза (лихорадка, озноб, мышечные и головные боли, поражение печени, почек, ЦНС, геморрагические проявления) с учетом эпиданамнеза (природно-очаговое заболевание, купание в открытых водоемах, контакт с дикими и домашними животными).
Методы диагностики: бактериоскопический, бактериологический и серологический. Материалом для исследования служит кровь, моча, бронхолегочные смывы, СМЖ.Прямая микроскопия крови в темном поле по методу «раздавленной капли» позволяет определить наличие лептоспир в первые 5 суток заболевания, с 10-х суток – в СМЖ и моче. Выделение гемокультуры проводят в первые 2-4 суток.Серологические методы (РА и РНГА) становятся информативны со 2-3 недели болезни. Увеличение специфических АТ в 4 и более раз в парных сыворотках, взятых с интервалом 7-10 дней, свидетельствует о лептоспирозе. Золотым стандартом диагностики является реакция микроагглютинации (РМА), позволяющая определить серогруппу возбудителя. Для ранней диагностики используют также реакцию слайд-агглютинации, ИФА. АТ в сыворотке крови обнаруживаются в низких разведениях (1:20) начиная с 4-го, чаще на 7-8 день болезни, достигая максимума на 14-17 день, затем постепенно снижаются. АТ в сыворотке крови переболевших обнаруживаются в течение 3-5 лет. В спорадических случаях обнаружение нарастания АТ даже в небольших разведениях (1:10-1:100) является абсолютным доказательством наличия заболевания. При вспышках лептоспироза достаточно однократного исследования. При этом подтверждением лептоспирозной этиологии вспышки служит выявление у больных и переболевших АТ в титрах от 1:100 и выше (соответственно срокам болезни). АТ в сыворотке крови переболевших обнаруживаются в течение 3-5 лет.
|
|
|
Боррелиоз (Болезнь Лайма)
Показания к исследованию: вероятный диагноз боррелиоза (поражение кожи, нервной системы, сердца, суставов, склонность к хроническому течению) с учетом эпиданамнеза (природно-очаговое заболевание, укус клеща).
Методы диагностики: ПЦР и определение антител к боррелиям.
Материалом для исследования служат кровь, моча, СМЖ, синовиальная жидкость, биоптаты кожи.
Основу диагностического алгоритма составляет серологическая диагностика (ИФА, РНИФ). Для исключения ложноположительных реакций в качестве подтверждающего теста используют иммуноблотинг.
АТ к боррелиям в сыворотке крови в норме отсутствуют. АТ IgM появляются через 2-4 недели после возникновения мигрирующей эритемы. В стадии 1 IgM выявляются у 40-60% больных и сохраняются у некоторых пациентов в течение нескольких месяцев. Титр АТ IgG повышается медленно – через 4-6 недель после появления эритемы.
Однократное повышение IgG диагностического значения не имеет, так как может свидетельствовать о ранее перенесённой инфекции. Исследование в парных сыворотках, взятых с интервалом 4-6 недель, показывающее снижение или повышение, указывает на выздоровление или наличие инфекции.
Возможно определение ДНК различных геновидов методом ПЦР с, однако метод пока не включен в стандарт диагностики.
Столбняк
Показания к исследованию: вероятный диагноз столбняка (приступы генерализованных тетанических судорог, возникающих на фоне мышечного гипертонуса, тризм, сардоническая улыбка, дисфагия), с учетом эпиданамнеза (травмы с попаданием в рану частичек почвы).
Лабораторная диагностика столбняка имеет второстепенное значение. Выявление АТ не имеет диагностического значения, поскольку свидетельствует о прививках в анамнезе. При столбняке нарастания титров АТ не происходит, т.к. даже летальные дозы экзотоксина не вызывают иммунного ответа.
В отдельных случаях применяют бактериологические методы (микроскопия мазков-отпечатков, посевы раневого содержимого на питательные среды). Выделить культуру возбудителя из раны удается не более чем у 30% больных.
Микоплазмоз
В детской практике имеют значение микоплазменные инфекции, вызванные Mycoplasma pneumoniae, Mycoplasma hominis и Ureaplasma urealyticum.
Показания для исследования: заболевания дыхательной системы (затяжной бронхит, атипичная пневмония, бронхиальная астма); урогенитальные заболевания, признаки внутриутробной инфекции с преимущественным поражением бронхолегочной системы.
Методы диагностики: основным является серологический метод, основанный на выявлении антител к M. pneumoniae, M. hominis и U. urealyticum в реакциях ИФА, РСК, РИФ, РПГА.
Для диагностики респираторного микоплазмоза (M. pneumoniae) также используют методы выявления антигенов (РИФ, ИФА) и ДНК в ПЦР. Материалом служат мазки из носоглотки, мокроты и др.
Методы РПГА и РИФ на современном этапе практически утратили свою актуальность. В РПГА используют метод парных сывороток с увеличением титров АТ в 4 раза и более, взятых в первые 7 дней заболевания и через 10-14 дней. Диагностический титр в РПГА 1:32.
Диагностика заболеваний, вызванных микоплазмами, осуществляется преимущественно методом ИФА. Титры АТ IgM и IgG к микоплазме определяют в острый период заболевания и через 2-4 недели. АТ IgM появляются в течение первой недели заболевания и исчезают после выздоровления, в отдельных случаях сохраняются до 1 года. АТ IgG появляются через 2-4 недели. На текущую инфекцию указывает повышение АТ IgМ выше 1:10, а также 4-кратное увеличение титров АТ IgG или IgA в парных сыворотках, взятых с интервалом 2-4 недели. Реинфекция сопровождается быстрым подъемом АТ IgA и IgG.
Следует помнить, что антигенное родство M. pneumonia с тканями человека может провоцировать аутоиммунные реакции и вызвать ложноположительные результаты в различных серологических реакциях.
Золотым стандартом диагностики микоплазмозов остается бактериологический метод. В настоящее время существуют коммерческие наборы («bioMerieux», НПО «Иммунотэкс»), позволяющие выявлять жизнеспособные формы микоплазм, а также в течение 24-48 часов определять их чувствительность к широкому спектру противомикробных средств.
Дата добавления: 2018-11-24; просмотров: 208; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!