Пищевые токсикоинфекции (ПТИ)
ПТИ – полиэтиологическая группа острых кишечных инфекций, возникающих после употребления в пищу продуктов, контаминированных условно-патогенными бактериями (цитробактер, клебсиелла, протей, стафилококк и др.), в которых произошло накопление микробной массы возбудителей и их токсинов.
Показания для исследования: клинические признаки (боль в животе, тошнота, рвота, озноб, повышением температуры, жидкий стул) с учетом эпидемиологического анамнеза (групповой характер заболевания, связь с употреблением продукта при нарушении правил его приготовления, хранения или реализации).
Метод диагностики: бактериологический.
Для подтверждения диагноза ПТИ исследуют рвотные массы, кал, промывные воды желудка, остатки подозрительных продуктов. Учитывают массивность роста и антигенную однотипность выделенного штамма.
Ботулизм
Показания для исследования: офтальмоплегический синдром, дыхательные расстройства, поражения ядер ЧМН на фоне нормальной температуры, связь с употреблением консервов домашнего приготовления.
Метод диагностики: обнаружение токсина или возбудителя в биоматериале (кровь, рвотные массы, кал, моча, а также в пищевых продуктах) служит абсолютным подтверждением диагноза.
Серологические методы: для обнаружения ботулинического токсина используется РН фильтратов фекалий или сыворотки больного со специфическими противоботулиническими сыворотками. В настоящее время для обнаружения ботулинических токсинов всех типов используются также методы ИФА и РЛА, позволяющие уже через 1-2 дня подтвердить клинический диагноз. Окончательный диагноз устанавливается на основании обнаружения в крови специфических антитоксических АТ с помощью реакции ИФА.
|
|
|
Для выделения возбудителя ботулизма производят посевы содержимого желудка, испражнений, подозрительных продуктов на специальные питательные среды (Китта-Тароцци, казеиново-грибную, бульон Хоттингера и др.).
Холера
Показания для исследования: неукротимая рвота и профузная водянистая диарея с развитием эксикоза.
Метод диагностики: основной и решающий метод диагностики холеры – бактериологический посев биоматериала на питательные среды.
Материалом для исследования служат испражнения и рвотные массы, у погибших – лигированный отрезок тонкой кишки и желчного пузыря. Результаты экспресс-анализа получают через 2-6 ч. (ориентировочный тест), ускоренного анализа – через 8-22 ч. (предварительный ответ), полного анализа – через 24-36 ч. (заключительный ответ). Эффективность метода – 40-60%.
Ориентировочные методы экспресс-диагностики обнаружения холерного вибриона: фазово-контрастная микроскопия. Идентификация в течение 3-5 мин, подтверждение диагноза в 80% случаев.
|
|
|
Реакция микроагглютинации с нативным материалом и холерной агглютинирующей О-сывороткой позволяет получить ответ через 5-10 мин.
Люминестентно-серологический метод позволяет через 1,5-2 часа в 90% случаев подтвердить диагноз холеры, но только при условии концентрации вибрионов в биоматериале свыше 1 млн. микробных тел.
Серологические методы имеют вспомогательное значение и могут применяться в основном для ретроспективной диагностики. Они направлены на обнаружение специфических АТ. Дают возможность подтвердить диагноз и выявить переболевших. Чаще всего используют РА, РАФ (реакция адсорбции фага) и реакцию обнаружения вибриоцидных АТ.
Перспективным является метод энзим-меченых АТ и метод ИФА.
Иерсиниоз
Показания для исследования: диагностика иерсиниоза, бактериальные артриты, болезнь Рейтера, синдром Бехчета, инфекционные артропатии.
Методы диагностики: специфическая лабораторная диагностика включает бактериологические, иммунологические и серологические методы.
Материалом для бактериологического исследования служат фекалии, моча, кровь, смыв с задней стенки глотки. Материал берется не позднее 7-го дня болезни. Бактериологическая диагностика иерсиниозов трудоемка, длительна, не всегда завершается выделением возбудителя.
|
|
|
Главная роль в лабораторной практике принадлежит серологическим методам – РПГА, ИФА, РА, РСК. Следует учитывать, что коммерческие диагностикумы позволяют диагностировать случаи заболеваний, вызванные серотипами 03 и 09, тогда как в ряде случаев не менее значимы и другие типы иерсиний (05, 07, 08). В клинической практике используется преимущественно метод РПГА. Титр АТ повышается через 7 дней после начала заболевания. Значительное нарастание АТ отмечается на 2-3 неделе, их снижение – после 5-й недели заболевания. Диагностическим считается титр 1:200 и выше (у детей до года 1:100) или нарастание титра АТ в 4 раза в парных сыворотках, взятых через 10-14 дней. Титр 1:50 встречается у 1,5% здоровых лиц, не имевших в анамнезе иерсиниоза.
Возможно определение специфических IgM методом ИФА.
Иммунологические методы позволяют обнаружить АГ Yersinia enterocolitica в клиническом материале не позднее 10-го дня от начала болезни (ИФА, РИФ, РНИФ, иммуноблотинг, ПЦР).
Псевдотуберкулез
Показания для исследования: диагностика клинических форм псевдотуберкулеза, бактериальные артриты, болезнь Рейтера, синдром Бехчета, инфекционные артропатии.
|
|
|
Метод диагностики: основной метод лабораторной диагностики – серологическое исследование, т.к. бактериологическое исследование выполняется в течение длительного времени (15-28 суток) и дает положительный результат в 15-30% случаев. Наиболее распространенным методом серологической диагностики является РПГА, выявляющая АТ к Yersinia pseudotuberculosis более чем у 80% больных псевдотуберкулезом. Диагностическим считают титр 1:100 или нарастание титра АТ в 4 раза в парных сыворотках, взятых при поступлении и через 10-14 дней.
Кампилобактериоз
Показания для исследования: клинические признаки кампилобактериоза (лихорадка, артралгия, озноб, тошнота, боли в эпигастральной области) с учетом эпидемиологического анамнеза (контакт с животными, групповой характер заболевания).
Метод диагностики: основным методом, подтверждающим диагноз, является бактериологический метод. Материалом для исследования служат испражнения, кровь, цереброспинальная жидкость.
Роль серологического метода в диагностике спорадических случаев относительно невелика, поскольку АТ появляются в крови с 5-7 дня болезни, а максимума титр антител достигает только через 2 недели от начала заболевания. Для серологической диагностики используют реакции РА, РСК, РПГА, РЛА, иммуноэлектрофорез. Наиболее информативен метод ИФА. Диагностически значимым в ИФА является титр 1:60 для детей первого года жизни и 1:320 для больных всех остальных групп.
В качестве экспресс-метода может быть использована латекс-агглютинация, выявляющая АГ возбудителя в фекалиях, диагностически значимый титр составляет 1:4 и выше.
Листериоз
Показания для исследования: вероятный диагноз листериоза (выделение в ликворе грамм положительных палочек, септическое состояние у беременной, наличие типичной клинической симптоматики у лиц, связанных с больными листериозом животными).
Метод диагностики: окончательно установить диагноз можно только бактериологическим методом. Листерии могут быть выделены из крови, СМЖ, мазков с миндалин, пунктатов лимфоузлов и др.
В качестве экспресс-методов диагностики применяются иммунохимические (РИФ, ИФА), а также ПЦР.
Серологическая диагностика листериоза детально не разработана. При определении специфических АТ имеют место как ложноотрицательные, так и ложноположительные результаты. Для определения АТ к листериям используют РА, РПГА, РСК, ИФА. В норме АТ к Lysteria monocytogenes в крови отсутствуют. Диагностическим считают нарастание специфических АТ в 4 раза и выше в парных сыворотках, взятых с интервалом 10-14 дней. Диагностический титр в РА – 1:160, РПГА – 1:80, РСК – 1:10.
Наибольшее значение имеет метод ИФА. Специфические антилистериозные IgM появляются с 5-го дня заболевания, IgG – через 10-14 дней, сохраняются длительно.
Бруцеллёз
Показания для исследования: вероятный диагноз бруцеллеза (лихорадка, поражение опорно-двигательного аппарата, нервной системы, половых органов) и эпидемиологические предпосылки (контакт с животными, больными бруцеллезом, употребление в пищу брынзы домашнего изготовления, молока и др.).
Метод диагностики: серологический.
В норме АТ к возбудителю бруцеллёза в крови отсутствуют.
Самым надёжным серологическим тестом служит реакция Райта, для определения АТ к липополисахаридам бруцелл. Диагностический титр в РА (Райта) – 1:160 и выше. АТ появляются на 2-й недели болезни, в дальнейшем их титр нарастает. Критерием диагностики является повышение титров АТ в 4 раза и более, полученных с интервалом 1-4 недели. Повышенный титр АТ может сохраняться 5-7% пациентов в течение 2 лет после инфекции. Следует помнить, что постановка аллергической пробы (проба Бюрне) сможет спровоцировать появление антител или нарастание их титра.
При хронических локализованных формах заболевания титры могут быть отрицательными или ниже 1:160. На фоне лечения титры быстро снижаются и в течение года приближаются к нулю.
Агглютинацию на стекле (реакция Хеддлсона) для диагностики не используется, т.к. часто дает ложноположительные результаты. Она предложена для выявления лиц, подлежащих обследованию на бруцеллёз, массовых обследованиях по эпидпоказаниям.
Другие серологические реакции: РПГА, острофазовые реакции – менее информативны по сравнению с реакцией Райта и не имеют существенного значения. В последние годы применяют более чувствительный метод ИФА для определения IgG и IgM-антител.
Отрицательные результаты пробы Бюрне позволяют исключить бруцеллез (кроме ВИЧ-инфицированных, у которых исчезают все реакции ГЗТ).
Туляремия
Показания для исследования: вероятный диагноз туляремии (лихорадка, интоксикация, воспалительные изменения в области входных ворот, регионарный лимфаденит) с учетом эпидемиологического анамнеза (природно-очаговое заболевание, контакт с грызунами).
Методы диагностики: серологические и аллергические тесты, бактериологическое исследование.
Для диагностики применяют РА (в пробирках и микроагглютинацию), РПГА и ИФА.
АТ к возбудителю туляремии в сыворотке крови в норме отсутствуют. Диагностическим при агглютинации в пробирках считают титр 1:60 и выше, при микроагглютинации – 1:128 и выше, начиная со 2 недели заболевания (10-15-й день). Диагностическая ценность РПГА выше, т.к. АТ в титре 1:100 обнаруживаются рано, уже к концу первой недели. Нарастание титра АТ в 2-4 раза в РА и РПГА подтверждают диагноз туляремии.
ИФА – более чувствительный и специфичный метод диагностики туляремии. Диагностический титр 1:400. Обнаружение AT IgM или 4-х кратное увеличение титра IgG подтверждает острую инфекцию или реинфекцию. AT IgM исчезают в течение нескольких месяцев (не более года), IgG сохраняются пожизненно.
Кожная аллергическая проба становится положительной уже с 3-5 дня болезни.
ПЦР, с помощью которой можно обнаружить ДНК в различных биологических субстратах, положительна в начальном лихорадочном периоде, поэтому считается методом ранней диагностики.
Стрептококковая инфекция
Показания к исследованию: скарлатина, ангина, гломерулонефрит, стрептодермии, рожа, отит, синусит, ревматизм, миокардиты.
Методы диагностики: бактериологический и серологический.
Постановка диагноза стрептококковых глоточных и кожных инфекций во всех случаях, кроме скарлатины и рожи, требует проведения бактериологических исследований с видовой идентификацией возбудителя. Для этих целей применяют экспресс-методы идентификации стрептококков группы А, с помощью которых можно в течение 15-20 мин диагностировать острую стрептококковую инфекцию без предварительного выделения чистой культуры возбудителя. Вместе с тем выделение стрептококков не всегда свидетельствует об их причастности к патологии в связи с широко распространенным здоровым носительством.
Истинные инфекции, вызванные стрептококками группы А¸ всегда инициируют развитие специфического иммунного ответа, сопровождаемого значительным титром антител к одному из внеклеточных стрептококковых АГ – стрептолизину О, дезоксирибонуклеазе В, гиалуронидазе или никотинамидаденин-динуклеотидазе.
Антистрептолизины О (АСЛО) появляются через 2 недели после инфицирования, максимальный титр АТ выявляется на 4-6 неделе.
В большинстве лабораторий референтными значениями титра АСЛО в крови приняты следующие значения:
• дети младше 10 лет – не более 150 МЕ/мл;
• взрослые и дети старше 10 лет – не более 200 МЕ/мл.
Повышение титра АТ сохраняется 6-12 месяцев. При ангине высокие титры АТ определяются у 40-50% больных, при фарингите – у 40-50%, при ревматизме – у 80-85%. Даже при тяжелой инфекции титры АСЛО повышаются лишь у 70-80% больных. Чувствительность метода резко снижается на фоне антибактериальной терапии.
При установлении роли стрептококков в формировании иммунопатологических процессов важное значение имеет обнаружение циркулирующих антигенов методом ИФА и использование антисывороток к дискретным АГ стрептококков группы А.
Скарлатина
Показания к исследованию: диагностика скарлатины.
Метод диагностики: основным является серологический метод.
Оценивают нарастание титров АТ к стрептококковым АГ: к стрептолизину О (АСЛО), М-протеину, А-полисахариду. Для каждой лаборатории приняты свои нормы, которые называются референтными значениями.
В большинстве лабораторий референтными значениями титра АСЛО в крови приняты следующие значения:
• дети младше 10 лет – не более 150 МЕ/мл;
• взрослые и дети старше 10 лет – не более 200 МЕ/мл.
Чистую культуру возбудителя практически не выделяют в связи с характерной клинической картиной заболевания и широким распространением бактерий у здоровых лиц и больных с другими формами стрептококковой инфекции.
Реакция коагглютинация (РКА) является наиболее перспективным методом, позволяющий выявить именно стрептококк в материале из любого очага в течение 30 мин.
Пневмококковые инфекции
Показания к исследованию: диагностика клинических форм пневмококковой инфекции, высоколихорадящие дети в возрасте до 3 лет.
Метод диагностики: бактериологический.
Верифицировать диагноз можно только на основании результатов микробиологического исследования соответствующего биосубстрата: при рините – отделяемого носовых ходов (мазок), при отите, синусите – гнойного экссудата, при пневмонии – мокроты, при менингите – СМЖ. При всех генерализованных формах пневмококковой инфекции проводят посев крови. Материал необходимо исследовать быстро, т.к. бактерии склонны к аутолизу, обусловленному активностью внутриклеточных ферментов.
При менингите также производят бактериоскопию СМЖ, РЛА и ПЦР СМЖ.
Стафилококковые инфекции
Показания к исследованию: диагностика клинических форм стафилококковой инфекции.
Метод диагностики: бактериологический.
Материалом для исследования служат биосубстраты (гной, мокрота, плевральный экссудат, кровь, СМЖ и др.).
Диагностика основана на результатах микробиологического исследования. Выделенную культуру исследуют на наличие коагулазы (коагулазный тест), на способность к ферментативному расщеплению манита, на способность синтезировать термостабильную ДНКазу, агглютинировать сенсибилизированные эритроциты барана; проводят фаготипирование выделенного штамма.
Для экспресс-диагностики применяют РЛА.
Менингококковая инфекция
Показания к исследованию: диагностика клинических форм менингококковой инфекции; болезней, протекающих с геморрагическими высыпаниями и поражением ЦНС.
Методы диагностики: микробиологический, РЛА, ПЦР.
Материалом для исследования служит кровь, ликвор, моча, носоглоточная слизь.
Бактериоскопически менингококк можно обнаружить в крови и СМЖ, однако данные бактериоскопии ориентировочны. Наиболее достоверный метод – выделение культуры менингококка.
Экспресс-методы – обнаружение АГ возбудителя в материале методами латекс-агглютинации (РЛА), коагглютинации (РКА), ИФА.
РЛА, применяемая для выявления АГ менингококка в СМЖ, увеличивает частоту положительных результатов до 45-70%. Более чувствительными для выявления АГ в ликворе являются тесты, в основе которых лежит метод ИФА (чувствительность более 80%, специфичность более 95%).
Наиболее информативным является ПЦР, позволяющий подтвердить диагноз более чем у 90% больных, причем антибиотики не влияют на частоту положительных результатов.
Серологический метод (РНГА) имеет вспомогательное значение, т.к. АТ выявляются не ранее 3-5 дня болезни. Оценивается нарастание титра специфических АТ в 4 раза и более в парных пробах крови и ликвора, взятых на первой и четвертой неделях болезни. При однократном серологическом обследовании диагностический титр составляет 1:40, у детей до 1 года – 1:20.
Дата добавления: 2018-11-24; просмотров: 242; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!