Цитогенетический метод медицинской генетики.
Цитогенетический метод применяется для анализа кариотипа и его аномалий у отдельных индивидуумов. Для проведения исследования достаточно получить образец периферической крови пациента объемом 1-2 мл.
Анализ кариотипа проводят в три этапа: культивирование лимфоцитов крови, окраска препарата и его микроскопический анализ.
Культивирование проводят для того, чтобы стимулировать деление лимфоцитов, так как успех цитогенетического исследования зависит от количества клеток, находящихся на стадии метафазы, когда хромосомы находятся в наиболее компактной форме. - 72 ч. Для увеличения количества метафазных клеток в конце культивирования в среду вводят колхицин, который приостанавливает деление на стадии метафазы, разрушает веретено деления и увеличивает конденсацию хромосом. Далее клетки помещают в гипотонический раствор, который приводит к разрыву ядерной оболочки. На следующем этапе клетки фиксируют смесью этанола и уксусной кислоты в соотношении 3:1, их суспензию раскапывают на предметные стекла и высушивают. В зависимости от целей используют различные методы окрашивания (G-, R-, C-, Q-методы). Световое микроскопирование является самым трудоемким. Для выявления хромосомных аномалий необходимо проанализировать не менее 30 метафазных пластинок. Большой эффективностью обладают методы компьютерного анализа хромосом, в сочетании с использованием флюоресцентных окрасок.
|
|
|
Классификация. Хромосомы располагаются в порядке уменьшения их длины. Все пары аутосом нумеруют арабскими цифрами от 1 до 22. Половые хромосомы обозначают латинскими буквами X и Y и помещают в конце раскладки, все аутосомы распределяются на 7 групп, которые различаются между собой по длине и форме составляющих их членов и обозначаются буквами английского алфавита отAдоG. В группеA(1–3) оказываются 3 пары самых крупных хромосом: 1, 3 – метацентрические хромосомы и 2 – субметацентрическая. ГруппаB(4–5) включает 2 пары длинных субметацентрических хромосом. Группа С (6–12) объединяет семь пар субметацентрических аутосом и не отличающуюся от них Х хромосому. В группуD(13–15) входят три пары акроцентрических хромосом, а в группу Е (16–18) – три пары субметацентрических хромосом. ГруппаF(19–20) содержит две пары маленьких метацентрических хромосом, группаG(21–22) – две пары самых мелких акроцентрических хромосом.Yхромосома- как самостоятельная.
Показания для исследования кариотипа пробанда
1. Множественные врожденные пороки развития и микроаномалии у новорожденных детей и их родителей.
2. Олигофрения, задержка физического и нервно-психического развития в сочетании с врожденными аномалиями.
|
|
|
3. Нарушение дифференцировки пола.
4. Первичная и вторичная аменорея.
5. Бесплодие.
6. Женщины со спонтанными абортами, привычными самопроизвольными абортами, мертворождением.
7. У родственников пробанда первой степени родства, который имеет структурные перестройки хромосом.
Кдинико цитогенетическая характеристика синдрома Дауна.
синдром Дауна, одна из форм умственной отсталости, обусловленная присутствием дополнительной 21 хромосомы – трисомия по 21 хромосоме (дистальный отдел длинного плеча хромосомы 21 – 21q22, в котором локализован ген ключевого фермента антиоксидантной защиты – супероксиддисмутазы). При трисомии происходит гирерэкспрессия этого фермента с последующим нарушением регуляции активных форм кислорода. Гиперпродукция свободных радикалов приводит к нейродегенеративным процессам в ЦНС, преждевременному старению и другим клиническим проявлениям синдрома Дауна. Диагноз -. Больные отличаются своеобразными лицевыми аномалиями: косой, идущий снаружи и сверху внутрь и вниз разрез глаз, нередко эпикант (вертикальная кожная складка), короткий нос с широкой переносицей, маленькие деформированные уши, часто полуоткрытый рот с высунутым языком и с выступающей нижней челюстью, сухие в трещинах губы, проблемы с сосанием из-за гиперглоссии, «карпьего рта», общей гипотонии и адинамии. Фигура больного расслаблена, походка и движения неловкие, голос грубый, речь односложная, косноязычная. Кроме того, в 60% случаев у больных наблюдается одна большая поперечная борозда на ладони, нередко на двух. Нередко у больных синдромом Дауна наблюдаются врожденные пороки сердца, желчно-выделительной системы, лейкоз. У всех больных наблюдается врожденное слабоумие. В младенческом возрасте больные синдромом Дауна апатичны и анормально спокойны, никогда не плачут, у них резко понижен мышечный тонус.
|
|
|
Дата добавления: 2018-05-31; просмотров: 426; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!