Лабораторная работа 1. Химические свойства углеводов

⇐ ПредыдущаяСтр 18 из 52Следующая ⇒

Все качественные реакции выполняются с растворами глюкозы, фруктозы, галактозы, ксилозы, сахарозы, мальтозы, лактозы и крахмала.

Работа 1. Реакция Подобедова-Молиша

К 1 мл углевода добавить 2-3 капли спиртового раствора a-нафтола. Перемешать. Осторожно по стенке подслоить 2 мл концентрированной H₂SO₄. Реакция положительна, если на границе раздела жидкостей появляется фиолетовое кольцо.

Работа 2. Проба на пентозы с орцином

Для сравнения берут растворы ксилозы (или несколько кусочков соломы, содержащей полисахарид, построенный из остатков ксилозы) и глюкозы. К 1мл углевода добавить 1 мл солянокислого раствора орцина и кипятить до появления зеленой окраски в пробирке с ксилозой.

Работа 3. Реакция Селиванова (на фруктозу)

По сравнению с другими гексозами фруктоза быстрее образует оксиметилфурфурол при обработке минеральными кислотами. Это видно при использовании разбавленных минеральных кислот. Данное свойство легло в основу качественного определения фруктозы.

Ход работы. В 3 пробирки налить по 1 мл фруктозы, глюкозы и сахарозы (для сравнения) и добавить по 2 мл раствора резорцина в 12%-ной НСl. Одновременно нагреть все 3 пробирки до кипения и кипятить до появления вишнево-красной окраски в пробирке с фруктозой.

Работа 4. Реакция Фелинга

Представляет собой процесс восстановления Сu²⁺ до Сu¹⁺в щелочной среде в присутствии углеводов со свободными карбонильными группами. На примере гексозы:

CuSO₄ + NaOH ® Cu(OH)₂ + NaSO₄

CH₂OH(CHOH)₄CHO +2Cu(OH)₂ ® CH₂OH(CHOH)₄COOH +Cu₂O¯ +2H₂O

Появление красного осадка (закись меди) или желтого осадка (гидрат закиси меди) свидетельствует о наличии в данном углеводе свободной карбонильной группы.

Ход работы. К 2 мл раствора углевода добавить 1 мл раствора Фелинга (готовится из смеси растворов NaOH, СuSO₄ и сегнетовой соли). После перемешивания нагреть содержимое пробирки в пламени горелки или кипящей водяной бане до появления в некоторых пробирках красного или желтого осадка. Нагревать либо одновременно все пробирки, либо по 2 пробирки, одна из которых обязательно должна содержать раствор редуцирующего углевода. Реакцию Фелинга провести также с гидролизованными сахарозой и крахмалом.

Гидролиз сахарозы. К 1 мл раствора сахарозы добавить 0,5 мл 10% раствора H₂SO₄и кипятить смесь 1-2 минуты. Нейтрализовать кислоту добавлением 1 мл 10% раствора NаОН.

Гидролиз крахмала. К 2 мл крахмала добавить 0,5 мл 10% раствора H₂SO₄и поместить в кипящую водяную баню на 10-15 мин. Охладить и нейтрализовать кислоту добавлением 1 мл 10% раствора NаОН.

Работа 5. Реакция серебряного зеркала

Представляет собой процесс восстановления серебра в щелочной среде углеводами со свободными карбонильными группами, т.е. имеет тот же механизм, что и реакция Фелинга.

AgNO₃ + NH₄OH ® AgOH + NH₄NO₃

CH₂OH(CHOH)₄CHO +2AgOH ® CH₂OH(CHOH)₄COOH +2Ag¯ +H₂O

Ход работы. К 1 мл раствора углевода добавить 1 мл аммиачного раствора AgNO₃ и осторожно нагреть в пламени горелки до появления на стенках пробирки осадка металлического серебра.

Работа 6. Реакция с реактивом Ниландера

Основана на восстановлении азотнокислого висмута до металлического висмута в щелочной среде в присутствии редуцирующих углеводов. Этой реакцией пользуются в клинических лабораториях для определения содержания глюкозы в моче, т.к. в отличие от солей меди, соли висмута не восстанавливаются мочевой кислотой. Реакция очень чувствительна.

Ход работы. К 0,5 мл углевода добавить 5-6 капель реактива Ниландера. Нагревать смесь до появления черного осадка металлического висмута.

Работа 7. Реакция осмоления

Данная реакция основана на способности углеводов со свободными карбонильными группами при нагревании со щелочами конденсироваться и образовывать смолы или карамели.

Ход работы. К 1 мл углевода добавить 0,5 мл 10% раствора NaOH и нагреть. Появление золотисто-коричневой окраски и запаха жженого сахара свидетельствует об осмолении исследуемых сахаров.

Работа 8. Реакция замещения карбонильного кислорода (образование озазонов) Углеводы, имеющие свободные карбонильные группы, при нагревании с фенилгидразином в кислой среде образуют озазоны. Озазоны разных сахаров отличаются по форме кристаллов, температуре плавления и растворимости, что используется для идентификации сахаров. Некоторые сахара (глюкоза, фруктоза, манноза) дают одинаковые продукты, и потому данным методом не могут быть идентифицированы.

Ход работы. На дно сухой пробирки насыпать смесь (свежеприготовленную) солянокислого фенилгидразина с уксуснокислым натрием (1:2) так, чтобы дно было покрыто этой смесью. Прилить 1-2 мл раствора сахара. Пробирки поместить в водяную баню (100°) на 30-40 мин. После появления желтого осадка озазонов жидкость охладить в струе проточной воды. Нанести каплю жидкости с осадком на предметное стекло и рассмотреть под микроскопом. Зарисовать форму кристаллов.

Работа 9. Проба на брожение.

Спиртовым брожением называется процесс превращения глюкозы в спирт и СО₂ в анаэробных условиях под влиянием микроорганизмов. Данная проба позволяет отличить сбраживающиеся ферментами дрожжей углеводы (гексозы, триозы и некоторые дисахариды) от несбраживающихся. Используется при идентификации раствора углевода.

Ход работы. Налить в пробирки по 9 мл раствора глюкозы, фруктозы, галактозы, лактозы, сахарозы, мальтозы, добавить по 2 мл суспензии дрожжей и перемешать. Заполнить смесью бродильный сосуд Эйхгорна так, чтобы в запаянном колене не было пузырьков воздуха. Жидкость должна заполнить трубку бродильного аппарата до расширенной его части. Для этого, налив жидкость в расширенную часть аппарата, закрывают отверстие большим пальцем руки и переворачивают аппарат. Когда трубка заполнится жидкостью, аппарат осторожно возвращают в нормальное положение. Бродильный аппарат помещают в термостат (37°С) и через 30-40 мин наблюдают выделение пузырьков углекислого газа, которые собираются в верхней части закрытого колена трубки, что свидетельствует о сбраживаемости данного углевода.

На основании результатов проделанных работ заполняют таблицу и делают выводы о свойствах исследованных углеводов.

Дата добавления: 2016-01-05; просмотров: 53; Мы поможем в написании вашей работы!

Поделиться с друзьями:

⇐ Предыдущая 13 14 15 16 171819 20 21 22 Следующая ⇒

Мы поможем в написании ваших работ!