Иммунные сыворотки, опред, области прим-я и общие биотехнологические приемы получения
Сыворотки – средства для образования пассивного иммунитета, которые содержат поликлональные АТ против инфекционных агентов и микробных токсинов.
Иммунные сыворотки животноro происхождения для мед прим– это жидкие или лиофилизированные ЛС, содержащ ие очищенные Ig-ы или фрагментыIg-ов, полученные из сыворотки или плазмы иммунизированных животных различных видов.
Основные области применения сывороток:
1)профил и леч инф заб (антисыворотки против бактериальных или вирусных агентов);
2)при отравлениях ядами микробов при столбняке, бутулизме, дифтерии (антитоксины против микробных токсинов);
3)при укусах змей — для инактивации экзотоксинов в ядах кобры, гадюки и др. (сыворотки против ядов змей);
4)для диагностических целей (создание разных диагностических наборов, например в тестах на определение беременности).
Получают сыворотки путем иммунизации домашних животных (, лошадей, круп рогат скота). Забор крови у этих животных производят в период максимального содержания АТ, для этого нужно постоянно контролировать кровь на как титр антител, что представляет определенные технические трудности. Из крови животных выделяют плазму, затем из нее удаляют фибрин и получают сыворотку.Приготовленные этим способом сыворотки хар-тся низкой активностью и существенным количеством примесей.
Сыворотки можно получать также из культивируемых на искусственной питательной среде животных клеток. В этом случае главной проблемой является обеспечение стабильного роста животных клеток вследствие их генетич нестабильности, непостоянства генетических экспрессии и старения.
|
|
|
Стандартизация вакцин (внутрикожный и летальный провокационные тесты).
При стандартизации вакцин учитываются показатели: описание, подлинность, р-римость, прозрачность, цветность, механические включения, рН, содержание белка, стерильность, токсичность, специфическая активность, специфическая безопасность, антигенная активность, пирогенность, упаковка, маркировка, транспортирование, хранение, срок годности, назначение. Подлинность проверяется в реакциях идентификации микробного компонента, путем окраски и просматривания препаратов под микроскопом. Специфическая активность (иммуногенность) – необходимый минимальный титр микробного компонента в прививочной дозе.
В спецификации убитых вакцин указывается содержание инактивирующих агентов и консервантов. Если для получения вакцины использовалась клеточная культура, необходим контроль содержания бычьего сывороточного альбумина. Специфическая безопасность это контроль полноты инактивации, отсутствие остаточной вирулентности, генетическая стабильность. Специфическая активность вакцин – количество АГ в единице объема; количество живых или убитых микробных клеток, составляющих основу вакцины; уровень специфических АТ в сыворотке крови иммунизированных животных.
|
|
|
Количественное определение адсорбированной дифтерийной вакцины
Активность дифтерийной вакцины определяется назначения вакцины морским свинкам с последующей провокацией дифтерийным токсином (методы А или В) или путем определения титра антител против дифтерийноro токсина или анатоксина в сыворотке крови морских свинок (метод С).
Метод А. Внутрикожный провокационный тест на морских свинках
Берут здоровых морских свинок и распределяют не менее чем на 6 равных групп по 5 в каждой. Готовят по 5 разведений р-ра стандарта и иссл р-ра с шагом не более 2,5 раза. Назначают по одному разведению одной группе морских свинок и вводят подкожно по 1,0 мл разведения каждой морской свинке. Спустя 28 дней вводят внутрикожно по 0,2 мл каждогo из 6 разведений токсина в 6 различных мест на коже.
Места инъекций обследуют через 48 часов и записывают наличие покраснения. Записывают также число мест инъекций без реакции (внутрикожный провокационный индекс). Сравнивают индекс исследуемого и стандартного р-ров.
|
|
|
Метод В. Летальный провокационный тест на морских свинках
Используют здоровых морских свинок весом 250–350 г. Животных одного пола pacпределяют в 6 равных групп. Назначают по одному разведению одной группе морских свинок и вводят подкожно по 1 мл разведения каждой морской свинке. Спустя 28 дней вводят подкожно по 1 мл р-ра токсина. Считают выживших животных спустя 4 дня после инъекции токсина. Рассчитывают активность испытуемой вакцины по отношению к активности стандартного образца.
Билет
Дата добавления: 2018-04-04; просмотров: 221; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!