Порядок выполнения работы
1. Определение степени чистоты молока (ГОСТ 8218).
Ознакомиться с устройством прибора для определения степени чистоты молока. Для определения механической загрязненности молока, на сетку прибора помещают ватный фильтр и закрепляют его. Молоко тщательно перемешивают и быстро, чтобы механические частицы не осели, отбирают 250 мл и выливают в прибор. Для ускорения фильтрации холодное молоко предварительно подогревают до 20-300С, когда все молоко профильтруется, снимают фильтр с сетки и накладывают на эталон, степень чистоты молока определяют сравнивая со стандартным эталоном. К первой группе относится молоко, при фильтрации которого на фильтре отсутствуют частицы механических примесей, ко 2-ой группе – если на фильтре имеются отдельные частицы, к 3-ей - если на фильтре имеется осадок мелких и крупных механических примесей.
Причины неточности анализа
1. Молоко плохо перемешано перед анализом.
2. Молоко плохо фильтруется, причиной может быть низкая температура молока или повышенная кислотность.
2. Определение общей микробной обсемененности молока (ГОСТ 9225)
а) Редуктазная проба
Для определения бактериальной обсемененности в пробирку наливают 20 мл молока и 1 мл 2,5% раствора метиленовой сини. Пробирки закрывают, тщательно перемешивают содержимое и погружают в водяную баню с температурой воды 37-400С. Уровень воды в бане должен быть выше уровня молока в пробирках. За обесцвечиванием молока наблюдают через 20 минут, 2; 5,5 часов, об окончании анализа свидетельствует полное обесцвечивание молока
|
|
|
В зависимости от продолжительности обесцвечивания метиленовой сини в пробирке, по таблице определяют количество бактерий в молоке и класс молока по бактериальной загрязненности.
| Скорость обесцвечивания | Количество бактерий в 1 мл молока | Класс молока |
| Более 5,5 часа От 2 до 5,5 часа От 20 мин. до 2 часов Менее 20 мин. | До 500 тыс. От 500 тыс. до 4 млн. До 20 млн. Свыше 20 млн. | I (хорошее) II (удовлетворительное) III (плохое) IV (очень плохое) |
б) Ускоренная реакция с метиленовой синью (редуктазная проба)
Разбавляют раствор метиленовой сини, приготовленной по стандартной методике 1:9 (10 мл раствора краски и 90 мл дистиллированной воды). К 10 мл молока добавляют 1 мл 0,25% раствора метиленовой сини, пробирки помещают в водяную баню.Наблюдения ведут через 8 минут, 1 и 3 часа, классность молока определяют по таблице:
| Скорость обесцвечивания | Оценка качества молока | Класс |
| 8 минут и менее | Очень плохое | IV |
| От 8 мин.до 1 часа | плохое | III |
| От 1 часа до 3-х часов | удовлетворительное | II |
| От 3-х час. и более | хорошее | I |
в) Редуктазная проба с резазурином
|
|
|
В предварительно прокипяченные или стерильные пробирки наливают 10 мл молока и 1 мл 0,05% раствора резазурина. Закрывают пробкой и медленно переливают без встряхивания 3 раза, ставят в водяную баню редуктазника, защищенную от света, при температуре 37-380С и сразу отмечают начало опыта. Наблюдают изменение окраски реактива от сине-стального до розового цвета, а затем до полного обесцвечивания. Учет проводят через 20 минут и 1 час, делают вывод о качестве молока пользуясь эталоном для редуктазной пробы и таблицей.
| Скорость обесцвечивания | Цвет пробы | Класс молока |
| 20 минут | белый | IV |
| 1 час | розовый или белый | III |
| 1 час | сиреневый | II |
| 1 час | сине -стальной | I |
3. Лабораторные методы диагностики мастита у коров
а) Бромтимоловая проба
0,2% спиртовый раствор бромтимолового синего наносится на плотную фильтровальную бумагу в виде 4-х пятен. Бумага высушивается и сохраняется в сухом виде. Из каждого соска вымени в середине или в конце доения на участки бумаги, пропитанные индикатором, наносится капля молока. Молоко из здоровой четверти вымени окрашивает пятно в желтый цвет или желтовато-зеленый, а из больной четверти в зеленую или сине-зеленую окраску в зависимости от тяжести болезни.
|
|
|
б) Димастиновая проба
Для диагностики мастита на специальные молочно-контрольные пластинки из каждого соска в соответствующую лунку сдаивают молоко до нижней метки (1 мл) и в каждую лунку добавляют 1 мл 5% раствора димастина. Перемешивают реактив и молоко вращательными движениями стеклянной палочкой в течение 5-17 секунд в каждой луночке и определяют консистенцию и цвет смеси. При воспалительном процессе в вымени молоко при смешивании с димастином образует желеобразный сгусток малинового цвета.
в) Проба с мастопримом
В луночку молочно-контрольной пластинки к 1 мл сборного молока приливают 1 мл 2,5% раствора мастоприма. Смесь молока с мастопримом перемешивают стеклянной палочкой в течение 10-20 секунд. Результаты реакции оцениваются по консистенции смеси молока с мастопримом.
Оценка результатов молока с мастопримом проводится по таблице:
| Консистенция | Результат оценки реакции | Наличие примеси маститного молока (%) |
| Однородная жидкость | - | Не более – 2-3 |
| Слабое желе | + | 4-6 |
| Выраженный желеобразный сгусток | ++ | 8-12 |
| Плотный желеобразный сгусток | +++ | Свыше 15 |
г) Каталазная проба
Каталаза гидролизующий фермент, он способен разлагать перекись водорода на воду и молекулярный кислород: 2 Н2О2 → 2Н2О + О2. По объему выделившегося кислорода можно судить о количестве каталазы. Количество миллилитров кислорода, выделившегося в течение 2-х часов называют каталазным числом. Для определения каталазного числа молока в каталазник Функе наливают 15 мл исследуемого молока и 5 мл 1% раствора перекиси водорода. Жидкость тщательно перемешивают и закрывают пробкой со вставленной в не градуированной трубкой. Трубку устанавливают так, чтобы уровень жидкости находился у нулевой ее черты. Каталазник погружают в водяную баню с температурой воды 250С на 2 часа. При наличии в молоке каталазы под давлением выделившегося кислорода, уровень молока в трубке поднимается. По уровню молока в градуированной трубке определяют каталазное число молока. Свежее молоко, полученное от здоровых коров имеет каталазное число молока 2,5-3, у коров, больных маститом, в молозивый период и в конце лактации каталазное число выше.
|
|
|
4. Контроль качества пастеризации, ГОСТ 3623
а) лактоальбуминовая проба. Белок молока альбумин при нагревании молока выше 800С свертывается и выпадает в осадок. Пастеризованное при таком режиме молоко альбуминов не содержит. Если молоко пастеризовали при более низкой температуре, то альбумин остается в молоке. В колбу наливают 5 мл молока и 20 мл воды. К смеси из бюретки приливают раствор серной кислоты (0,1 н) для осаждения казеина. Казеин отфильтровывают. Отмеривают в пробирку 5 мл фильтрата и кипятят. Если молоко нагревалось до температуры 800С и выше, хлопьев альбумина после кипячения не окажется.
б) реакция на фермент фосфатазу. Фосфатазная проба используется для определения эффективности пастеризации.
В пробирку наливают 2 мл исследуемого молока и добавляют 1 мл 0,1% раствора реактива фенолфталеинфосфата натрия. Пробирку закрывают пробкой и после тщательного перемешивания содержимого, её помещают в водяную баню при температуре 40-450. Реакция учитывается через 10 минут и 1час. Если молоко пастеризованное, в пробе никаких изменений не наблюдается. При нарушении режима пастеризации или добавления сырого молока наблюдается изменение окраски от светло-розового до ярко-розового.
Реакция на фосфотазу показывает добавление сырого молока к патсеризованному в количестве не менее 2%.
Реакция на фермент пероксидазу В пробирку к 3 мл молока добавляют 3-4 капли йодокалиевого крахмала и 1-2 капли раствора перекиси водорода. Если молоко непастеризовано, появляется интенсивно синее окрашивание, при недостаточной пастеризации (65-700), появляется бледно-синее окрашивание. Отсутствие окрашивания в течение 1 минуты после прибавления реактивов показывает, что молоко пастеризовано при температуре выше 800С.
Выполнить самостоятельно
1. Определить степень чистоты молока.
2. Определить бактериальную обсемененность молока тремя методами.
3. Провести исследование молока на мастит, сравнить полученные
результаты.
4.Определит качество пастеризации молока, сравнить полученные
результаты.
Результаты занести в таблицу. Сделать заключение о качестве проб молока.
| Определяемые показатели | Пробы молока | |
| 1. Чистота молока по эталону. 2. Бактериальная обсемененность молока: а) редуктазная проба б) ускоренная редуктазная проба в) резазуриновая проба 3. Диагностика мастита а) проба с димастином б) бромтимоловая проба в) каталазная проба г) проба с мастопримом 4. Контроль качества пастеризации а) фосфатазная проба б) пероксидазная проба в) лактоальбуминовая проба |
Проблемные задания
1.Определить сортность молока, если в результате анализа установлено:
а) молоко бело-желтого цвета, без посторонних не свойственных свежему молоку привкусов и запахов. Плотность – 1,028, кислотность 210Т, степень чистоты по эталону III группы.
б) молоко чистое, без посторонних не свойственных свежему молоку привкусов и запахов, белого цвета. Плотность – 1028, кислотность 160Т. Степень чистоты по эталону II класса. Бактериальная обсемененность II класса.
2.Определить качество пастеризации молока:
а) при контроле пастеризации молока по реакции на пероксидазу с йодокалиевым крахмалом содержимое пробирки окрасилось в ярко синий цвет;
б) при контроле пастеризации молока по реакции на пероксидазу с йодокалиевым крахмалом после добавления реактивов цвет содержимого в пробирке не изменился
3.Можно ли разрешить продажу молока на продовольственном рынке, если на молочно-контрольной пластинке после прибавления к молоку раствора мастоприма образуется плотный желеобразный сгусток?
Контрольные вопросы:
1. Как проводится сортовая оценка молока в зависимости от результатов определения группы чистоты?
2. Рассказать о значении микробного фермента редуктазы для определения количества микробов в молоке. Какие вещества применяются для определения активности фермента редуктазы? Как проводится сортовая оценка молока по ГОСТ Р 52054-2003 в зависимости от результатов определения бактериальной обсемененности молока?
3. Рассказать об изменениях в молоке при заболевании коров маститом. Какие методы применяются для диагностики маститов?
4. Какие изменения вызывает в молоке пастеризации? Рассказать о методах выявления эффективности пастеризации молока.
5. Рассказать о ферментах молока. Какое значение имеет определение этих ферментов в оценке санитарного качества молока?
Т е м а 11
Дата добавления: 2015-12-21; просмотров: 20; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!