Опыт 1. Определение концентрации пировиноградной кислоты (ПВК) в моче или сыворотке крови.
Приборы. 1. Штатив с пробирками.
2. Набор пипеток.
3. Фотоколориметр.
4. Кюветы, 0,5 см.
Реактивы. 1. Дистиллированная вода.
2. Моча.
3. Гидроксид натрия, 10%-ный раствор.
4. 2,4-динитрофенилгидразин, раствор.
1. В три пробирки внесите реактивы согласно следующей таблице:
| Раствор | Опытная проба, мл | Калибровочная проба, мл | Контрольная проба, мл |
| Исследуемый образец | - | - | |
| Калибровочный раствор пирувата | - | - | |
| Дистиллированная вода | - | - | |
| 2,4-динитрофенилгидразин | 0,8 | 0,8 | 0,8 |
2. Содержимое пробирок на 15 мин поместите в темное место при комнатной температуре.
3. В каждую пробирку внесите по 1 мл 10%-го раствора NаOH и через пять минут измерьте оптическую плотность при длине волны 620 нм опытной пробы против контрольной (О) и калибровочной пробы против контрольной (К).
4. Расчет проведите по следующей формуле:
Концентрация ПВК = 
5. Расчет проведите и по готовому калибровочному графику.
Калибровочный график зависимости величины оптической плотности раствора (D) от концентрации ПВК в пробе.
Сравните полученные значения с нормальными величинами. Каковы причины повышенного содержания пировиноградной кислоты в сыворотке крови и моче?
Опыт 2. Определение активности сукцинатдегидрогеназы мышц.
Приборы. 1. Штатив с пробирками.
2. Набор пипеток.
3. Ступка с пестиком.
4. Водяная баня.
Реактивы. 1. Мышечная ткань.
|
|
|
2. Янтарная кислота, 5%-ный раствор.
3. Метиленовая синь, 0,01%-ный раствор.
4. Растительное масло.
5. Стеклянный песок.
1. Взвесьте 1 г мышечной ткани.
2. Поместите ткань в ступку, тщательно разотрите со стеклянным песком, добавляя 3-4 мл раствора 5%-ной янтарной кислоты.
3. Полученный гомогенат перенесите поровну в 2 пробирки.
4. Содержимое одной пробирки кипятите в водяной бане в течение 3-5 минут.
5. Затем в обе пробирки добавьте по 1 капле раствора метиленовой сини, перемешайте и залейте поверхность жидкости 0,5 мл растительного масла для изоляции от кислорода воздуха. Обе пробирки инкубируйте в водяной бане (40оС) в течение 10 минут.
Дайте объяснение наблюдаемым явлениям. Какова функция метиленовой сини в данном эксперименте? На какое соединение эта функция возлагается в живой клетке?
Дата выполнения ________ Балл ____ Подпись преподавателя ____________
Занятие № 10. «Обмен углеводов (часть 1)»
Цель занятия: рассмотреть факторы, влияющие на переваривание углеводов; освоить метод количественного определения глюкозы в крови.
ВОПРОСЫ К КОНТРОЛЬНОЙ РАБОТЕ:
1. Углеводы: строение и классификация.
2. Углеводы: биологическая роль и функции углеводов в организме.
3. Переваривание углеводов в желудочно-кишечном тракте у моногастричных животных. Ферменты, участвующие в переваривании углеводов. Нарушения переваривания углеводов.
|
|
|
4. Особенности переваривания углеводов у жвачных животных. Пути включения летучих жирных кислот (ЛЖК) в метаболизм.
5. Метаболизм глюкозо-6-фосфата. Регуляция содержания глюкозы в крови. Биологическая значимость данного явления.
6. Синтез гликогена: последовательность стадий и биологическое значение процесса.
Дата выполнения ________ Балл ____ Подпись преподавателя ____________
Дата добавления: 2016-01-05; просмотров: 37; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!