Последовательность микроморфометрии и обработки изображения
1. Изображения, полученные в полях зрения микроскопа, обрабатывались с помощью фильтров программы, в котором по заданным параметрам (площадь объекта, цветовая гамма, размеры по осям Х, Y, яркость, оптическая плотность и др.) производилось измерение объектов (согласно «маске»).
2. Следующий этап был направлен на выбор калибровки при соответствующих увеличениях микроскопа. В нашем случае измерение площади исследуемых структур производилось при увеличении х1000 (объектив 100, окуляр 10)с помощью масляной иммерсии, измеренные объекты выдавались в реальных величинах (мкм).
3. Для измерения площади интерстициальной соединительной ткани на панели инструментов выбирали опцию «выделение по контуру», позволяющую обводить интересующий нас контур, в частности площадь, приходящуюся на межканальцевую соединительную ткань, площадь просвета сосудов – капилляров в центре каждого поля зрения. В итоге получали следующий интересующий нас параметр морфометрического исследования – площадь (S), для капилляров – площадь просвета, периметр, диаметр капилляров (максимальный и минимальный размер просвета капилляров).
4. Измерение площади сперматогенного эпителия осуществляли в режиме полуавтоматического выделения «монослоя» с помощью предложенных в окне «Выделение масок объектов» с режимами «добавления и вычитания», что помогало решить задачу о селективности измерения исключительно площади, приходящейся на сперматогенный эпителий, сводя погрешность измерений к минимуму (рис.1.).
|
|
|
5. Использование методики «Фильтры» помогло решить проблему нечеткости (мутности) изображения, затрудняющей подсчет количества клеточных популяций и осуществления выделения границ исследуемых структур (площади межканальцевой соединительной ткани, извитых семенных канальцев, сперматогенного эпителия, параметров сосудистого – капиллярного компонента).
Рис. 1. Измерение площади сперматогенного эпителия извитых семенных канальцев яичка с использованием программы «Видео Тест 4.0. Морфология». Окраска гематоксилином и эозином, увеличение х1000. (отмечена площадь сперматогенного эпителия). В центре стрелкой указан капилляр.
Рис. 2. Измерение площади межканальцевой соединтельной ткани яичка с использованием программы «Видео Тест 4.0. Морфология». Окраска гематоксилином и эозином, увеличение х1000 (отмечена площадь межканальцевой соединительной ткани).
Рис. 3. Измерение площади извитых семенных канальцев ткани яичка с использованием программы «Видео Тест 4.0. Морфология». Окраска гематоксилином и эозином, увеличение х1000 (отмечена площадь извитых семенных канальцев).
Дата добавления: 2018-02-18; просмотров: 462; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!