Хроматограмма. Параметры разделения.
Селективность: 
Способы идентификации веществ на хроматограмме.
Метод использования веществ-свидетелей.
В тех же условиях, в которых получают хроматограмму разделяемой смеси, записывают хроматограммы веществ-свидетелей, наличие которых предполагается в анализируемой смеси. Фиксируют время удерживания веществ-свидетелей и сравнивают их со временем удерживания компонен-тов разделяемой смеси. Совпадение на хроматограмме разделяемой смеси времени удерживания вещества-свидетеля со временем удерживания того или иного компонента может свидетельствовать о том, что данный компонент смеси и вещество-свидетель идентичны.
Иногда вещество-свидетель вносят непосредственно в пробу анализируемой смеси (метод метки). Записывают в одинаковых условиях хроматограммы такой пробы и пробы анализируемой смеси, не содержащей вещества-свидетеля. Если число пиков остается одним и тем же, а интен-сивность (высота) пика того или иного компонента на хроматограмме при внесении вещества-свидетеля в пробу возрастает, то это означает, что данный компонент и вещество-свидетель идентичны.
Метод относительных удерживаний:
К анализируемой пробе прибавляют вещество сравнения и хроматографируют смесь строго в тех условиях, которые указаны в методике анализа. По формуле определяют относительное исправленное время удерживания:
где t, tS, t0 – время удерживания соответственно определяемого компонента, вещества сравнения и несорбируемого компонента смеси. Сравнивают относительное исправленное время удерживания с указанным в методике.
|
|
|
Способы количественного определения веществ на хроматограмме.
Метод абсолютной градуировки:
Пусть требуется найти содержание определяемого вещества в анализируемом растворе с использованием площади пика этого вещества на хроматограмме. Готовят серию i-эталонных растворов с точно известной концентрацией ci определяемого вещества в каждом растворе. Записывают хроматограммы каждого раствора в одинаковых условиях и измеряют площадь Si пика определяемого вещества на каждой хроматограмме. По полученным данным строят градуировочный (калибровочный) график в координатах Si—сi (площадь - массовое или объемное содержание вещества в пробе (%) или его абсолютное количество, мл, мкг) . Затем строго в тех же условиях хроматографируют пробу анализируемого раствора с неизвестной концентрацией Сx и измеряют площадь Sx пика определяемого вещества.
Метод внутренней нормализации:
На одной и той же хроматограмме измеряют площади Si всех пиков и определяют их сумму SSi считая, что элюируются (выходят из колонки) все компоненты анализируемой пробы, так что ни один из компонентов не остается прочно связанным в хроматографической колонке. Поскольку площадь пика любого компонента прямо пропорциональна массе этого компонента в разделяемой смеси, то рассчитывают, массовую долю сx в процентах (хроматографический процент) данного компонента Х по формуле:
|
|
|
Метод внутреннего стандарта:
Готовят несколько (часто—пять) эталонных смесей, каждая из которых включает точно известную массу m1 определяемого компонента и массу тст стандарта. В строго одинаковых условиях хроматографируют каждую смесь и на полученных хроматограммах измеряют площади Si пиков определяемого вещества и площадь Sст стандарта. Так как площадь пика на хроматограмме прямо пропорциональна массе данного вещества, то:
Затем к анализируемому раствору, содержащему неизвестную массу тх определяемого вещества, прибавляют точно известную массу стандарта тст и хроматографируют полученный раствор в тех же условиях, что и эталонные растворы, после чего измеряют площади Sх и Scт обоих пиков. Иногда, наоборот, к раствору стандарта прибавляют определенное количество определяемого вещества. По полученным данным вычисляют отношение Sх / Scт.
Дата добавления: 2020-04-25; просмотров: 217; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!