Понятие о ситовой (эксклюзионной) хроматографии. Гель-хроматография.

⇐ ПредыдущаяСтр 11 из 13Следующая ⇒

Метод ситовой хроматографии представляет собой один из вариантов жидкостной распределительный хроматографии. Он основан на использовании в качестве НФ пористых веществ – молекулярных сит, размеры пор которых могут быть больше или меньше размеров частиц разделяемых компонентов. Частицы с размерами, меньшими размеров пор сорбента, проникает вместе с растворителем ПФ в эти поры и могут удерживаться в них, тогда как более крупные частицы не могут проникнуть в поры из-за своих размеров и уносятся с ПФ. Крупные частицы элюируются первыми.

Носитель: гель.

НФ: элюент, находящийся в порах зерен носителя.

ПФ: этот же элюент, протекающий вдоль слоя частиц полимера.

Гели – представляют собой вещества, способные к набуханию и имеющие поры разного размера.

1. Гидрофильные: декстрановые

2. Гидрофобные: полистерольные (стирогель)

Гели:

1. Мягкие (сефадексы)

· малое число поперечных связей

· способны поглощать большие количества растворителя, увеличиваясь в объеме

· фактор емкости равен 3

· невысокая механическая прочность

· малая скорость движения ПФ

· большинство гелей гидрофильны

2. Полужесткие (сополимеры, стирола и дивинилбензола)

· большое число поперечных связей

· фактор емкости 0,8-1,2

· скорость движения ПФ больше, чем для мягких гелей

· предел ситового исключения 2500-410*10⁶

· в основном гидрофобны

3. Жесткие гели (силикагель)

· диаметр пор меняется в узком интервале

· устойчивы термически и химически

· скорость элюирования высока

· фактор емкости 0,8-1,1

· как гидрофильные, так и гидрофобные

Фактор емкости – это отношение объема растворителя внутри геля к объему растворителя вне гранул геля.

Предел ситового исключения – величина молекулярной массы вещества, выше которой частицы не способны проникать в поры геля.

Растворители:

1. вода

2. толуол

3. хлороформ

4. диметилформамид

Адсорбционная хроматография. Тонкослойная хроматография (ТСХ).

(Коэффициент подвижности, относительный коэффициент подвижности, степень (критерий) разделения, коэффициент разделения) - не знаю, надо или нет.

Тонкослойная хроматография — метод, основанный на использовании тонкого слоя сорбента в качестве неподвижной фазы. Он основан на том, что разделяемые вещества по-разному распределяются между сорбирующим слоем и протекающим через него элюентом, вследствие чего расстояние, на которое эти вещества смещаются по слою за одно и то же время, различается.

Сорбенты: силикагель, оксид алюминия. Растворители: при выборе растворителей учитывают их элюирующую способность, т.е. способность вытеснять соединения, сорбированные на НФ.