Осадочная проба Вельтмана в модификации Тайфля



Принцип

При добавлении к сыворотке крови раствора СаСl2 и нагревании до кипения снижается коллоидная устойчивость белков из-за уменьшения электрического заряда частиц под действием электролита, и белки выпадают в осадок, первыми осаждаются g‑глобулины (иммуноглобулины).

Реактивы

0,5 % CaCl2.

Проведение анализа

В пробирку добавляют 0,1 мл сыворотки, 4,9 мл дистиллированной воды и 0,1 мл раствора СаСl2, встряхивают, нагревают до однократного закипания и охлаждают. Если хлопья в пробирке не обнаруживаются, то добавляют еще 0,1 мл раствора хлорида кальция и вновь нагревают до кипения. Процедуру повторяют до выпадения хлопьевидного осадка. Учитывают объём раствора СaCl2, пошедший на образование хлопьевидного осадка сывороточных белков, и определяют состояние по коагуляционной ленте Вельтмана по схеме:

N пробы 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
CaCl2, мл 1,0 0,9 0,8 0,7 0,6 0,5 0,4 0,3 0,2 0,1
 

Сдвиг влево — обусловлен увеличением содержания a‑ и b‑глобулинов

 

Сдвиг вправо — при росте содержания g‑глобулинов

Клинико-диагностическое значение

Ревматизм, активный
туберкулез, перитонит, нефроз, острые инфекции, опухоли, сахарный диабет

Фиброзы дистрофия печени, гепатит, цирроз, гемолиз, плеврит, пневмония, туберкулез, остеомиелит

Нормальные величины

Сыворотка крови 0,4‑0,5 мл раствора CaCl2

Оформление работы

Указывают принцип метода, регистрируют результаты, сравнивают с нормальными величинами, делают выводы по обеим осадочным пробам.

Вопросы для самоконтроля

1) Клеточные, неклеточные (органические, неорганические) компоненты крови. Плазма и сыворотка крови.

2) Физико-химические свойства и функции белков плазмы крови. Общий белок и его фракции при электрофорезе, представители фракций. Гипо-, гипер-, пара-, диспротеинемии, причины и значение в клинике. Протеинограммы при заболеваниях (острое и хроническое воспаление, рак и др.)

3) Общая характеристика, происхождение и свойства ферментов плазмы крови. Органоспецифичные и собственно плазменные ферменты. Энзимодиагностика заболеваний. Ингибиторы протеиназ плазмы в лечении заболеваний

4) Понятие о формах поступления и выведения азота из организма. Образование, транспортные формы и утилизация аммиака в организме.

5) Остаточный азот и его фракции в сыворотке крови. Клиническое значение определения общего показателя остаточного азота и отдельных фракций (мочевина, мочевая кислота, креатин-креатинин и др.), клиренс креатинина.


ТЕМА 11.2.
Эритроцит. Обмен железа и гемопротеинов

Актуальность

Эритроцит необходим для поддержания жизненно важных функций организма, что определяет ряд особенностей его структуры и метаболизма (гликолиз, активность пентозофосфатного пути), механизмы защиты от избыточного воздействия кислорода. Главным белком эритроцита является гемоглобин. Широкое разнообразие биологически важных функций гемоглобина и других гемопротеинов (цитохромов, пероксидаз, миоглобина) вызывает необходимость изучения роли этих белков в метаболизме. Состояния, связанные с нарушением синтеза и распада гема, приводят к развитию заболеваний крови и печени.

Цель

1. Изучение особенностей обмена эритроцита, реакций синтеза и распада гема, метаболизма билирубина.

2. Освоение методов определения концентрации основных показателей пигментного обмена — гемоглобина в крови, билирубина в сыворотке крови и моче, желчных пигментов в моче.

Вопросы для самоподготовки

1) Обмен железа в организме: потребность, всасывание, транспорт, железо-связывающие белки, запасная форма. Пищевые источники. Симптомы и клинические проявления недостаточности железа. Понятие гемохроматоза.

2) Функции эритроцитарных белков — спектрина, гликофорина, белка полосы 3. Особенности окисления глюкозы в эритроците. Механизмы защиты мембраны эритроцита от окисления.

3) Строение гема, реакции и основные этапы его синтеза. Регуляция синтеза гема и гемоглобина.

4) Причины порфирий, их клинические проявления, основы лечения порфирий. Талассемии, их виды и причины.

5) Строение наиболее распространённых в организме гемсодержащих белков (гемоглобин, миоглобин, цитохромы, каталаза, пероксидаза), их функции и локализация.

6) Патологические и физиологические типы гемоглобина (оксигенированный, гликозилированный, серповидно-клеточный гемоглобин; карбо-, карбокси- и метгемоглобин). Значение определения концентрации окси- и карбогемоглобина, гликозилированного гемоглобина.

7) Реакции, происходящие в эритроците в капиллярах легких и тканей (схемы).

8) Механизмы транспорта углекислого газа. Транспортные формы углекислого газа, связь СО2 с гемоглобином, роль карбоангидразы. Роль эритроцита в изменении концентрации бикарбонат-ионов плазмы.

9) Механизм транспорта кислорода. Связывание гемоглобина с кислородом, нормальная степень насыщения гемоглобина кислородом, влияние температуры, величины рН, концентрации СО2 на сродство гемоглобина к О2, регуляция. Кооперативность протомеров гемоглобина, эффект Бора, роль 2,3‑дифосфоглицерата.

10) Кривые насыщения гемоглобина кислородом или диссоциации гемоглобина. Причины S-образного характера кривой диссоциации.

11) Распад гемоглобина и гема в ретикулоэндотелиальной системе.

12) Непрямой (свободный) билирубин, его строение, реакции образования. Дальнейшая судьба непрямого билирубина.

13) Прямой (связанный) билирубин, его строение, реакции образования, дальнейшая судьба. Роль фермента УДФ-глюкуронилтрансферазы. Выведение конечных продуктов распада гема.

14) Состояния, связанные с избыточным распадом гемоглобина. Причины гемолитической желтухи, её виды и лабораторные критерии.

15) Состояния, связанные с нарушениями оттока желчи. Причины обтурационной желтухи и её лабораторные критерии.

16) Состояния, связанные с недостаточностью функции гепатоцитов. Причины паренхиматозной желтухи и её лабораторные критерии.

17) Виды физиологической и патологической желтухи новорожденных.

18) Нарушения выведения билирубина – наследственные (синдромы Жильбера‑Мейленграхта, Криглера‑Найара, Дубина‑Джонсона) и приобретенные (избыток эстрогенов молока, инфекционные и токсические причины). Представление о механической желтухе при муковисцидозе, болезни Нимана‑Пика, гипоплазии желчных путей.


Дата добавления: 2020-04-25; просмотров: 309; Мы поможем в написании вашей работы!

Поделиться с друзьями:






Мы поможем в написании ваших работ!