Антиген инфекционности» (HBeAg)
HBeAg представляет собой вид сердцевинного белка, он не является, как полагали раньше, продуктом распада HBcorAg. Ген, кодирующий синтез HBeAg, расположен в непосредственной близости к гену синтеза HBcorAg и насчитывает 29 кодонов. Установлено, что наличие HBeAg в крови является характеристикой экспрессии его зрелым вирусом так называемого дикого типа (нормальный, наиболее распространенный вариант).
HBeAg характеризует высокую инфекционность крови, являясь показателем активной репликации вируса и высокой ДНК-полимеразной активности. Появляется в крови больных острым и хроническим гепатитом В обычно в фазе вирусемии. В первую неделю желтушного периода он выявляется у 85–95% больных. Исчезновение HBeAg из крови через 2–4 недели с начала болезни и появление антител к нему (сероконверсия) указывает на благоприятное течение заболевания. Напротив, длительное сохранение HBeAg (в течение двух и более месяцев) указывает на высокий риск хронизации гепатита В. У больных ХВГ В с высокой активностью HBeAg сохраняется длительное время (до нескольких лет).
Тестировать на наличие HBeAg имеет смысл только HBsAg-положительные сыворотки, так как обнаружение его в HBsAg-отрицательных образцах весьма редко и большей частью представляет собой ложноположительный результат.
Антитела к «антигену инфекционности» (anti-HBe)
Антитела к HBeAg появляются в крови после элиминации HBeAg и завершения репликации вируса. К концу 9-й недели острого периода гепатита В более 90% больных имеют anti-НВе. В период выздоровления anti-НВе могут исчезать. Однако наличие anti-НВе не является показателем отсутствия инфекционности конкретной сыворотки крови.
|
|
|
Существовавшее ранее однозначное мнение о наличии anti-HBe в крови как благоприятном прогностическом признаке, свидетельствовавшем о развитии протективного иммунного ответа, сегодня нуждается в существенной коррекции. Можно сказать, что при остром гепатите В благоприятное прогностическое значение имеет, в первую очередь, выявляемая при динамическом наблюдении сероконверсия, т.е. исчезновение HBeAg и появление anti-HBe. В особенности этот серологический феномен важен в прогностическом отношении при оценке эффективности противовирусной терапии.
Неоднозначность интерпретации anti-HBe-положительности оказалась связанной с открытием дефектных вариантов вирусов, имеющих мутацию в зоне генома, предшествующей гену синтеза сердцевинного белка (так называемые pre-core-мутанты) и получивших обозначение HBeAg-отрицательных. Эти вирусы не способны синтезировать HBeAg, но, тем не менее, при инфекции, вызванной ими, в крови длительно обнаруживаются anti-HBe. Основные различия хронической инфекции, вызванной вирусами гепатита В дикого типа и рге-соге-мутантами, приведены в таблице 2.
|
|
|
Таблица 2. Сравнительные характеристики хронического гепатита В, вызванного различными вариантами вируса
| Характеристики | Инфекция, вызванная | |
| вирусом дикого типа | рге-соге-мутантом | |
| Возраст | чаще < 40 лет | чаще > 40 лет |
| Повышение активности АлАТ | стабильное | перемежающееся |
| Вирусемия | стабильная | перемежающаяся |
| Прогрессирование | у 50% | у 80% |
| Эффективность интерферона | высокая | низкая |
Наличие HBeAg-отрицательного мутанта приводит к прогрессированию поражения печени при продолжающейся репликации вируса (наличие ДНК HBV в сыворотке крови). При первичном инфицировании HBeAg-отрицательным мутантом существенно возрастает риск развития фульминантного гепатита.
При хроническом гепатите В, вызванном вирусом дикого типа, отсутствие HBeAg при наличии антител к нему свидетельствует об интегративной стадии заболевания. Появление HBeAg указывает на активную репликацию вируса и обострение гепатита. Отсутствие HBeAg у больных хроническим гепатитом В при наличии вирусемии (ДНК HBV в крови) следует считать косвенным признаком инфекции рге-core-мутантом вируса.
|
|
|
Антиген X
HBxAg состоит из 159 аминокислот и представляет собой регуляторный белок, хотя возможна и роль его как структурного вирусного белка. Полагают, что он активирует экспрессию всех вирусных генов и усиливает синтез вирусных протеинов. Играет особую роль в развитии первичной гепатокарциномы, т.к. наиболее активно функционирует в клетках первичного рака печени. Антитела к антигену X выявляются в крови больных хроническим, но не острым гепатитом В.
ДНК вируса (DNA HBV)
ДНК вирусагепатита В обнаруживается в сыворотке или плазме крови методом полимеразной цепной реакции. Методы генодиагностики, к которым относится ПЦР, существенно расширяют возможности лабораторной диагностики вирусного В, позволяя непосредственно выявить возбудитель, установить тканевую и внутриклеточную локализацию HBV, выявить и охарактеризовать мутантные формы вируса, оценить уровень виремии в течение заболевания, в том числе на фоне противовирусной терапии.
Выявление ДНК HBV означает вирусемическую стадию процесса и свидетельствует о высокой репликативной активности вируса. При остром гепатите В содержание ДНК HBV в крови быстро возрастает в течение инкубационного периода и становится максимальным в начале периода разгара. Циркуляция ДНК вируса более 5–6 месяцев является неблагоприятным прогностическим признаком и часто свидетельствует о хронизации гепатита В. При интегративной форме хронического гепатита В ДНК HBV в сыворотке крови не выявляется.
|
|
|
Методы генодиагностики, к которым относится ПЦР, существенно расширяют возможности лабораторной диагностики вирусного В, позволяя непосредственно выявить возбудитель в биологическом материале: сыворотке или плазме крови, установить тканевую и внутриклеточную локализацию HBV (в ткани печени, мононуклеарах), выявить и охарактеризовать мутантные формы вируса, оценить уровень виремии в течение заболевания, в том числе на фоне противовирусной терапии. Одним из вариантов качественного определения ДНК HBV является технология ПЦР in situ (в гистологических срезах), позволяющая установить внутриклеточную локализацию вируса в гепатоцитах.
Единственная коммерческая тест-система дифференциальной диагностики НВеAg-отрицательного гепатита В создана фирмой «Abbot» с использованием лигазной цепной реакции. Выявление всей совокупности генетических изменений, характерных для НВеAg-отрицательных вирусов гепатита В, возможно пока только прямым секвенированием ПЦР-амплифицированных фрагментов вирусного генома.
Новым методом количественного определения вирусной ДНК является технология, разработанная фирмой Chiron Corporation (США), с использованием так называемой разветвленной ДНК (branched DNA, или bDNA), отличающаяся очень высокой чувствительностью и воспроизводимостью, следовательно, большей точностью количественного определения по сравнению с другими методами.
Количественная характеристика содержания ДНК HBV важна для оценки эффективности противовирусной терапии и имеет прогностическое значение для определения хронизации HBV. При исходно низком уровне виремии (ДНК HBV менее 500 фг/мкл) процент хронизации острого гепатита В близок к нулю, при концентрации ДНК HBV от 500 до 2000 фг/мкл хронизация процесса наблюдается у 25–30% больных, а при высоком уровне виремии у пациента (более 2000 фг/мкл) острый гепатит В чаще всего переходит в хронический. Больные ХВГ В с низкими уровнями ДНК НВV лучше отвечают на противовирусную терапию.
Маркеры хронизации гепатита В:
1. высокие уровни ДНК вируса гепатита В в сыворотке крови на начальной стадии инфекции;
2. высокие концентрации HBsAg и HBeAg на начальной стадии инфекции;
3. персистенция HBsAg более 6 месяцев и HBeAg более 10 недель;
4. аnti-HBs не появляются после перенесенной инфекции;
5. персистенция аnti-HBs IgM более 2 месяцев;
6. инфицирование в раннем детском возрасте;
7. инфекция, вызванная HBeAg-негативным мутантом вируса;
8. наличие у инфицированных первичного или вторичного иммунодефицита.
Дата добавления: 2020-04-08; просмотров: 81; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!