Схема лабораторной диагностики ВГВ
1. Первичное массовое обследование на ВГВ — определение методом ИФА в сыворотке крови HBsAg (инфицированность).
2. Определение панели серологических маркеров для уточнения стадии заболевания и активности инфекции.
3. ПЦР-анализ — определение генетического маркера ДНК ВГВ для подтверждения диагноза ВГВ, мониторинга хронического течения, оценки эффективности проводимой терапии.
Маркеры инфекции
HBsAg (поверхностный антиген)
HBsAg — основной маркер инфицирования HBV. Концентрация HBsAg в сыворотке больных обычно колеблется от 1 до 50 мкг/мл, редко — до 500 мкг/мл.
НВs-антиген существует в виде трех морфологически различных вариантов:
– представляет суперкапсид цельного вириона;
– в большом количестве встречается в виде малых сферических белковых частиц диаметром 20–22 нм. Эти частицы внутри полые, не содержат ДНК вируса, следовательно, неинфекционные и, главным образом, состоят из НВs-антигена с небольшим содержанием preS2-антигена.
– в виде нитей длиной 230 нм.
С точки зрения имуногенности выделяют различные серотипы HBsAg (adw, adr, ayw, ayr), образующиеся путем сочетания основной антигенной детерминанты «а» с двумя субдетерминантами, попарно исключающими друг друга (d/y, w/r).
Выявление HBsAg указывает на инфицированность вирусом гепатита В. Обнаруживается и при остром гепатите В, и при хроническом гепатите В, поэтому этот маркер не может быть использован для дифференциальной лабораторной диагностики острых и хронических форм инфекции.
|
|
|
HBsAg является наиболее ранним маркером острого вирусного гепатита В, появляется в крови в инкубационном периоде, начиная с 3–5-й недели заражения. HBsAg циркулирует при остром течении заболевания в среднем 70–80 дней (очень редко до 5–6 месяцев). Обнаружение HBsAg в крови более 6 месяцев может указывать на начало хронизации процесса. При хроническом гепатите В HBsAg циркулирует в крови больного на протяжении многих лет.
Положительный результат обязательно должен быть проверен путем перестановки анализа в двух параллельных пробах. Если хотя бы одна из двух проб данной сыворотки или плазмы при этом снова дает положительный результат, образец считают первично положительным и исследуют в подтверждающей тест-системе на основе реакции нейтрализации. Это необходимо иметь в виду, поскольку многие иммуноферментные тест-системы, обладая невысокой специфичностью, способны давать большое число ложноположительных результатов.
Отрицательный результат тестирования на HBsAg чаще всего свидетельствует об отсутствии гепатита В у обследуемого. Однако необходимо иметь в виду, что полностью диагноз данной инфекции при этом исключить нельзя, так как:
|
|
|
а) пациент может находиться в инкубационном периоде заболевания до появления маркеров ВГВ;
б) HBsAg не обнаруживается при фульминантных формах гепатита В;
в) HBsAg не обнаруживается при инфекции, вызванной HBsAg-негативным мутантом;
в) чувствительность тест-системы может быть недостаточной;
г) при преимущественном синтезе «большого» HBsAg «малая» форма антигена может какое-то время не секретироваться в кровоток.
Поэтому при наличии клинических признаков гепатита и отсутствии HBsAg в сыворотке крови необходимо исследовать другие маркеры инфекции HBV.
Наличие HBsAg в крови свидетельствует о присутствии вируса в печени и с большой долей вероятности в крови. Но не всякая сыворотка, содержащая HВsAg, содержит вирус гепатита В. В ряде случаев ДНК вируса встраивается в ДНК гепатоцита не полностью, а частично, только тем участком, который кодирует синтез HBsAg. В этих случаях синтезируются HBsAg без других компонентов вириона, то есть без других антигенов. Считают, что такая ситуация возникает при "здоровом" носительстве HBsAg.
HBsAg не обнаруживается у реконвалесцентов острого вирусного гепатита В и у привитых против гепатита В (иммунных лиц).
|
|
|
2. Антитела к поверхностному антигену (anti-HBs)
Антитела к HBsAg (anti-НВs) свидетельствуют о ранее перенесенной инфекции или о наличии поствакцинального иммунитета. При острой инфекции anti-HBs IgM появляются в период выздоровления, через 4 недели после начала заболевания, определяются в течение 1–2 месяцев, затем они исчезают. Anti-HBs IgG достигают максимальной концентрации через 1–2 года, сохраняются в течение 10 лет и более с последующим постепенным снижением уровня, недоступного выявлению современными методами диагностики. В некоторых случаях anti-HВs могут циркулировать пожизненно.
Поскольку эти антитела являются вируснейтрализующими, их исчезновение через 10 лет, по крайней мере, у части пациентов, перенесших инфекцию, означает, что постинфекционный иммунитет при гепатите В не всегда является пожизненным. Не исключена возможность развития повторных случаев гепатита В у одного и того же человека.
Быстрое исчезновение HBsAg (в первые дни желтухи) с появлением anti-НВs — плохой прогностический признак, указывающий на развитие гепатодистрофии. Появление anti-HBs на фоне клинического улучшения у больного гепатитом В является хорошим прогностическим признаком.
При проведении вакцинации, когда в организм вводится рекомбинантный HBsAg, титр anti-HBs постепенно нарастает, тогда как антитела к другим антигенам вируса не образуются. При этом уровень anti-HBs 10 МЕ/мл и выше свидетельствует об адекватном ответе на вакцинацию. Поствакцинальный иммунитет сохраняется 10–15 лет.
|
|
|
3. Антитела к сердцевинному антигену ( anti-HBcorAg )
HBcorAg антиген (сердцевинный) обнаруживается только в ткани печени, в крови не циркулирует. Он обладает высокой иммуногенностью, с которой связан адекватный иммунный ответ организма при циклическом течении острого гепатита В в виде образования антител (anti-HBcor).
Особая диагностическая роль принадлежит антителам (anti-HBcor).Антитела к сердцевинному антигену вируса гепатита В класса M (anti -НВ c or IgM) — маркер активной репликации НВV и острой инфекции. Выявляются через 1–2 недели после обнаружения HBsAg и сохраняются на протяжении 2–18 месяцев. Появление их в крови является подтверждением острого гепатита В. Поскольку данный диагноз чаще ставится на основании клинической картины, повышения активности аланинаминотрансферазы (АлАТ) сыворотки крови и обнаружения HBsAg в крови, диагностическое значение anti-HBcor IgM особенно велико в следующих случаях:
а) когда специфическая диагностика гепатита В по каким-либо причинам производится поздно; при этом HBsAg в крови может уже отсутствовать;
б) при остром гепатите у больного хроническим гепатитом В. Если такой гепатит связан с суперинфицированием другими гепатотропными вирусами (картина, часто наблюдающаяся в эндемичных по гепатиту В районах), то характерным будет отсутствие или низкий титр anti-HBcor IgM.
При хроническом вирусном гепатите В anti-НВcor IgM выявляются в стадию репликации, указывая на обострение заболевания. Причем выявляются они в меньших титрах, чем при острой инфекции.
Антитела к HBcorAg класса IgG (anti-НВc or IgG) появляются практически одновременно с anti-НВcor IgM. Они остаются пожизненно у всех лиц, переболевших гепатитом В (маркер пастинфекции).
Значимость anti-HBcor IgG как маркера перенесенной инфекции выше, чем anti-HBs, так как:
а) anti-HBs могут появиться в результате вакцинации;
б) anti-HBs при остром гепатите В не развиваются у 15% реконвалесцентов;
г) в течение 6 лет после острого гепатита В anti-HBs могут исчезать у 20% переболевших;
Аnti-НВcor IgG также выявляются у носителей HBsAg и больных хроническим гепатитом В.
Службы крови ряда зарубежных стран (например, США) включили в перечень обязательных исследований всей донорской крови тестирование на наличие anti-HBcor. При этом выявляются суммарные антитела (total) без идентификации отдельного класса иммуноглобулинов. Для выбраковки крови достаточно просто наличия в ней anti-HBcor.
Дата добавления: 2020-04-08; просмотров: 85; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!