Опыт №1. Моделирование ОПГА и изучение ее морфологических особенностей.

⇐ ПредыдущаяСтр 24 из 52Следующая ⇒

Предварительно за 4–5 дней до проведения практического занятия производят взятие крови у соматически здоровой лабораторной крысы в объеме 1,5–2% от массы тела животного.

Взятие крови в эксперименте, приготовление и окрашивание мазка крови проводят в соответствии с ранее предложенными и освоенными методиками (см. глава «Патологическая физиология системы крови. Красная кровь. Эритроцитозы» опыт №1–2).

Исследуют мазок крови методом световой микроскопии с цифровой морфометрией, определяют диаметр RBC, характер окрашивания клеток, процентное соотношение RTC/RBC, относительную лейкоцитарную формулу. Ход опыта и результаты исследования записывают в протокол эксперимента.

Опыт №2. Моделирование приобретенной токсической гемолитической анемии

и изучение ее морфологических особенностей [3].

Учитывая, что большинство нелинейных лабораторных крыс являются носителями бартонеллеза, за 5–7 суток до проведения практического занятия у лабораторной крысы удаляют селезенку, вызывая манифестацию заболевания и развитие приобретенной токсической гемолитической анемии.

Исследуют мазок крови методом световой микроскопии с цифровой морфометрией, определяют процентное соотношение RTC/RBC, оценивают величину, форму эритроцитов, интенсивность и равномерность их окрашивания, относительную лейкоцитарную формулу, количество, форму и объем тромбоцитов. Ход опыта и результаты исследования записывают в протокол эксперимента.

Список литературы

1. Льюис С.М. и др. Практическая и лабораторная гематология / С.М. Льюис, Б. Бэйн., И. Бэйтс; пер. с англ. под ред. А.Г. Румянцева. – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2009. – 672.: ил.

2. Титов В.Н., Творогова М.Г. Клиническая лабораторная диагностика / В кн. Клиническая биохимия / Под ред. В.А. Ткачука. – 2-е изд. – М.: ГЭОТАР-МЕД, 2004. С. 19 – 166.

3. Зайчик А.Ш., Чурилов Л.П. Механизмы развития болезней и синдромов. Книга 1-я (Учебник для студентов медицинских вузов). Издание 2-е, дополненное и переработанное – СПб., 2005, ЭЛБИ-СПб, 507 с., илл.

ПАТОЛОГИЧЕСКАЯ ФИЗИОЛОГИЯ СИСТЕМЫ КРОВИ.

ДИЗЭРИТРОПОЭТИЧЕСКИЕ АНЕМИИ

Дизэритропоэтические анемии – сборная группа патологических состояний системы крови, характеризующихся снижением концентрации гемоглобина и числа эритроцитов в единице объема крови вследствие нарушения образования форменных элементов и/или гемоглобина. Различают дефицитные (недостаток одного или нескольких компонентов, необходимых для эффективного эритропоэза) и апластические (прямое поражение красного костного мозга с угнетением гемопоэза) дизэритропоэтические анемии.

В классической патофизиологии обычно из группы дефицитных анемий рассматривают мегалобластические (дефицит витаминов В₁₂ и/или В₉) и железодефицитные анемии.

В организме железо в свободном виде практически не встречается и, как правило, связано с различными протеинами. В зависимости от функций комплексов железо-протеин весь пул железа организма можно разделить на «рабочую» группу (комплекс с гемоглобином, миоглобином, цитохромами), «циркулирующую» группу (комплекс с трансферрином) и «резервную» группа (комплекс ферритина).

Среднесуточные потери железа составляют около 1 мг (мужчины) и до 2 мг (женщины), они восполняются алиментарным путем. Всасывание железа в тонкой части кишечника – комплексный стадийный процесс и в кровоток из пищеварительного тракта поступает не более 10% потребляемого железа. Циркуляция железа и железосодержащих соединений в кровотоке происходит при связывании его с белками плазы крови: трансферрином (основной транспортный белок железа, осуществляющий перенос ионов железа от двенадцатиперстной и тощей кишки до специализированных трансферриновых рецепторов на мембране клеток; одна молекула трансферрина связывает два иона Fe³⁺в присутствии бикарбонатов крови), β-глобулинами (другие транспортные глобулины), гаптоглобином (образует комплекс с свободным гемоглобином плазмы крови и в таком виде элиминируется макрофагами), гемопексином (осуществляет перенос гема в клетки) [1, 3].

Концентрация трансферрина в плазме крови составляет лабораторный показатель общая железосвязывающая способность крови (ОЖСС), которая рассчитывается как сумма концентрации железа (связанного с трансферрином) в крови (сыворотке) и остаточная (свободная) концентрация трансферрина. В норме пул трансферрина крови насыщен железом на 30–35%.

Комплекс трансферрин-железо поступает в костный мозг, связывается с рецепторами мембраны эритроидных клеток, происходит высвобождение трансферрина, захват железа, соединение с молекулой протопорфирина IX и формирование группировки гема. Входящее в состав гема железо находится в восстановленном состоянии (Fe²⁺) под контролем фермента метгемоглобинредуктазы. Депонирование избытка железа происходит преимущественно в клетках печени, селезенке и красном костном мозге в виде ферритина (комплекс протеина апо-ферритина с ионами железа), часть ферритина распадается с формированием гранул гемосидерина, окрашивающихся по Перльсу.

Нерастворимые гранулы гемосидерина практически не вовлекаются в обменные процессы, откладываясь в органах и тканях (гемосидероз) они запускают свободно-радикальные механизмы повреждения клеток и каскады воспалительных реакций.

Нарушение метаболизма железа может протекать по следующим сценариям [1, 2]:

1. Дефицит железа вследствие его низкого поступления в организм и/или избыточных потерь (алиментарная недостаточность, голодание, повышенное потребление железа, кровотечения и кровоизлияния),

2. Нарушение всасывания железа (гипоацидный гастрит, энтеропатии, резекция двенадцатиперстной кишки),

3. Дизметаболические процессы (генетические дефекты протеинов-переносчиков железа и/или рецепторов для них, конкуренция со стороны бактериальных и паразитарных агентов при тяжелых формах инфекции, избыточное запасание железа в макрофагах, снижении скорости мобилизации депонированного железа),

4. Перегрузка организма железом (миелодиспластический синдром, гемосидероз, наследственный гемохроматоз).

Железодефицит – патологическое состояние, вызванное снижением количества железа (рабочего, циркулирующего и резервного) в организме. Стадии железодефицита:

- Латентная (доклиническая): снижение количества сидеробластов и сидероцитов в костном мозге, снижение концентрации железа в плазме крови, снижение уровня ферритина в крови, увеличение ОЖСС,

- Манифестирующая (клиническая): железодефицитная анемия.

Железодефицитная (сидеропеническая) анемия(ЖДА) – клинико-лабораторный синдром, возникающий вследствие глубокого железодефицита и выражающийся в снижении концентрации гемоглобина в единице объема крови, гипохромазии, микроцитозе, анизоцитозе. Как правило, при ЖДА уменьшение концентрации гемоглобина выражено непропорционально сильнее по сравнению с уменьшением содержания эритроцитов. Возможно развитие вторичной лейкопении.

Анализ структуры костного мозга выявляет усиление активности эритроидного ростка кроветворения и дефицит железа: эритро-миелоидное соотношение – 1:1 (1:2), полихромазию, исчезновение сидеробластов/сидероцитов. Биохимический анализ дополняет картину ЖДА снижением концентрации ионов железа и ферритина в сыворотке, увеличением ОЖСС крови.

Помимо гематологических признаков, для ЖДА характерно поражение слизистых оболочек, кожных покровов и их дериватов (сидеропенический синдром), мышечная слабость, дисфагия и нарушения функций ЖКТ. ЖДА чаще развивается у женщин и подростков, железодефициты у мужчин практически всегда являются осложнениями основного заболевания (опухоли, язвенная болезнь).

Сидеробластическая анемия – патологическое состояние системы крови, возникающее вследствие нарушений синтеза протопорфирина IX и включения ионов железа в состав гемовой группировки гемоглобина и выражающееся в снижении количества эритроцитов и/или гемоглобина в единице объема крови, гипохромазии, базофильной пунктации эритроцитов, анизоцитозе.

Биохимический анализ крови указывает на увеличение концентрации ионов железа и ферритина в сыворотке и уменьшение ОЖСС крови. Анализ структуры костного мозга выявляет усиление активности эритроидного ростка кроветворения и избыток железа в организме: эритро-миелоидное соотношение – 1:1 (1:2), полихромазию, большое количество сидеробластов/сидероцитов, в т.ч., кольцевидных форм, отложения гранул гемосидерина. Сидеробластическая анемия всегда рефрактерна к терапии препаратами железа.

Дефицит витаминов В₁₂ и/или В₉ приводит к нарушению процесса синтез ДНК, что в первую очередь сказывается на быстрообновляемых тканях, в т.ч., на гемопоэтической ткани. Невозможность поддерживать адекватный уровень синтеза ДНК приводит к обратимой перестройке эритропоэза на неэффективный «мегалобластический» тип и развитию мегалобластических анемий. Снижение скорости образования эритроцитов не сопровождается снижением скорости синтеза гемоглобина, поэтому показатель МСН соответствует норме или повышен.

Дефицит витамина В₁₂ приводит также к нарушению метаболизма жирных кислот и накоплению в организме метилмалоновой кислоты, оказывающей токсический эффект на структуры неровной системы.

Характерными гематологическими признаками мегалобластических анемий являются: макроцитоз (MCV более 110 фл), гипорегенераторное состояние костного мозга, обнаружение в периферической крови ядросодержащих предшественников ретикулоцитов и нормоцитов («мегалобластов»), не имеющих признаков неопластической перестройки, гиперхроматоз, пойкилоцитоз, анизоцитоз, выявление в эритроцитах базофильной пунктации и телец Хауэлла-Жолли, лейкопения со сдвигом лейкоцитарной формулы вправо с появлением в периферической крови большого количества гиперсегментированных гранулоцитов (более 7 сегментов).

Анализ состояния красного костного мозга выявляет нарастание активности эритропоэза (увеличивается содержание гемопоэтической ткани за счет эритроидного ростка кроветворения). Но, при этом наблюдается неэффективный гемопоэз: признаки дегенеративных изменений ядер эритроидных и миелоидных клеток, наличие мегалобластов и мегалоцитов, снижение количества ретикулоцитов. Биохимический анализ крови указывает на ускорение гемолиза: нарастание билирубинемии (преимущественно за счет несвязанной фракции) и гипогаптоглобинемии; отмечается увеличение содержания железа в организме: концентрация железа и ферритина в сыворотке крови увеличены, ОЖСС снижена.

Помимо общих анемических клинических симптомов (слабость, бледность, снижение толерантности к физической нагрузке), мегалобластические анемии характеризуются нарушениями работы пищеварительной системы: глоссит, дисфагия, диспепсический синдром. Кроме того, дефицит витамина В₁₂ вызывает развитие неврологической патологии: парастезии, болевой синдром, структурно-функциональные нарушения нейронов и нервов задних и боковых столбов спинного мозга – нарушение походки, параличи (чаще нижних конечностей).

Этиология мегалобластических анемий (дефицит витамина В₁₂ и фолиевой кислоты):

- алиментарная недостаточность (вегетарианство, диеты),

- нарушение всасывания (резекция желудка/тонкой кишки, нарушение секреции внутреннего фактора Кастла или выработка антител к нему, инфекции, конкуренция со стороны микробных и паразитарных агентов),

- увеличение потребности (беременность),

- ятрогенные причины (избыточное применение NO, противосудорожные прерараты) [4].

Апластическая анемия – клинико-лабораторный синдром, характеризующийся снижением содержания эритроцитов и/или гемоглобина в периферической крови вследствие значительного угнетения гемопоэза.

Анализ структуры костного мозга выявляет угнетение активности гемопоэтических ростков кроветворения с преобладанием в костном мозге участков жировой и/или соединительной тканей, инфильтрацию костного мозга неопластическими клетками (метастазы опухолей), перегрузку организма железом – отложение гранул гемосидерина. При апластических анемиях тяжелой степени возможно возникновение экстрамедуллярных очагов кроветворения в селезенке, печени и лимфатических узлах.

В периферической крови наблюдается снижение гематокрита за счет всех видов форменных элементов (нормохромная, арегенераторная/гипорегенераторная анемия, лейкопения со сдвигом вправо, тромбоцитопения). Это приводит к развитию гемической гипоксии органов и тканей, геморрагическим осложнениям и нарастанию частоты инфекционных заболеваний.

Биохимический анализ выявляет признаки тяжелой анемии (незначительное увеличение концентрации HGB F) и перегрузки организма железом (высокие уровни ферритина и железа сыворотки и низкие значения ОЖСС).

Этиология апластических анемий:

1. Наследственные формы (анемия Фанкони);

2. Приобретенные формы:

- Физические факторы (ионизирующее излучение, механические повреждения),

- Химические факторы (ароматические циклические соединения),

- Биологические факторы (аутоиммунная панцитопения, вирусы гепатита, герпесвирусы, парвовирусы),

- Ятрогенные факторы (лекарственные соединения на основе тяжелых металлов, цитостатики, антиконвульсанты).

3. Идиопатические формы (около 2/3 всех диагностированных случаев).

Цель занятия:

1. Исследование морфологических особенностей дефицитных и апластических дизэритропоэтических анемий.

2. Решение учебных гемограмм

Дата добавления: 2019-03-09; просмотров: 166; Мы поможем в написании вашей работы!

Поделиться с друзьями:

⇐ Предыдущая 19 20 21 22 232425 26 27 28 Следующая ⇒

Мы поможем в написании ваших работ!