Опыт 3. Значение места введения пирогенала в развитии лихорадки у крыс.

Двум крысам вводят равную дозу пирогенала – 10 мг, одной – внутрибрюшинно (можно использовать контроль предыдущих опытов), другой – подкожно. Термометрия, расчеты – как в предыдущих опытах.

 

Опыт 4. Влияние повышенной температуры крови на работу сердца лягушки.

Опыт демонстрирует зависимость частоты возникновения импульсов в клетках синусового узла от температуры жидкости, его омывающей.

Оборудование и реактивы. Шприц 1,0 мл. Ампула магния сульфата 20% - 5,0 мл. Секундомер. Пинцеты анатомический, хирургический. Ножницы хирургические. Иглы для фиксации животного к пластине.

Метод: Наркотизированную 0,5-1,0 мл 20% раствора магния сульфата лягушку фиксируют на пластине брюшком кверху. Вскрывают грудную полость путем острожного удаления мечевидного отростка. В операционное отверстие выводят сердце. Подсчитывают исходное число сердечных сокращений. К области правого предсердия прикладывают донышко конической пробирки, заполненной водой с температурой около 20⁰С. Регистрируют число сердечных сокращений. Исходные данные вносят в таблицу результатов. Затем пробирку заполняют водой с температурой 40⁰С. Опыт повторяют с регистрацией числа сердечных сокращений. Данные вносят в таблицу результатов.

В разделе «Обсуждение» описать механизм учащения сердечных сокращений при воздействии тепла на область синусного узла. Указать на вклад интенсивной работы сердца при лихорадке в общее теплопроизводство организма. Привести примеры использования правила Либермейстера в оценке выраженности лихорадки.

 

Литература:

1. Зайчик А. Ш., Чурилов Л. П. Основы общей патологии. Часть 1. Основы общей патофизиологии. (Учебное пособие для студентов медВУЗов). -СПб.. 1999.-ЭЛБИ, 624 с.

2. Бачериков А.Н., Кузьминов В.Н., Ткаченко Т.В., Назарчук А.Г. Современные представления о системе терморегуляции. Вiсник психiатрii та психофармакотерапii.- 2006.-№1-с.178-182.

3. Дидковский Н.А., Танасова А.Н. Лихорадка. Русский медицинский журнал, 2003, №4, 189.

4. Войнов В.А. Атлас по патофизиологии. Учебное пособие. – М., Медицинское информационное агентство, 2004, 218 с.

5. Физиология человека под ред. В.М.Покровского, Г.Ф.Коротько. – М. Медицина, 2001, гл.11.

6. Boulant J.A. Role of the Preoptic-Anterior Hypothalamus in Thermoregulation and Fever. Clinical Infectious Diseases – 2000, 31, S. 157-61.

7. Beutler Bruce, Beutler Steven M. The Pathogenesis of Fever//CECIL Textbook of Medicine, 19^th ed., 1994, p.1568-1571.

 

ПАТОФИЗИОЛОГИЯ СИСТЕМЫ КРОВИ.

КРАСНАЯ КРОВЬ: ЭРИТРОЦИТОЗЫ

 

Кровь – ткань внутренней среды организма, циркулирующая по замкнутому контуру системы кровообращения, состоящая из форменных элементов (клетки крови и постклеточные структуры) и плазмы с растворенными в ней органическими и неорганическими веществами. Общий объем крови составляет около 6–8% массы организма и условно разделен на циркулирующую и депонированную части.

Система крови – функциональное объединение собственно крови, лимфы, органов гемопоэза и кроверазрушения, органов продуцирующих компоненты плазмы крови, периферических диффузных скоплений лимфоидной ткани (MALT- и BALT-системы) и клеток, реализующие свои функции преимущественно в органах и тканях организма, но по происхождению связанных с форменными элементами крови [4].

Соотношение совокупности форменных элементов (эритроциты, лейкоциты и тромбоциты) и плазмы образует лабораторный показатель гематокрит (НСТ), обладающий выраженными половыми различиями и составляющий 40–50% от общего объема крови у мужчин и 36–46% у женщин. Наибольший удельный вес в показатель НСТ вносят эритроциты (RBC) – постклеточные структуры, содержащие гемоглобин (HGB) (до 95% от массы эритроцита), имеющие в норме форму двояковогнутого диска и эозинофильно окрашиваемые при стандартных гистологических исследованиях. Основная функция эритроцитов и их предшественников (клетки эритроидного ряда) заключается в синтезе, накоплении и обеспечении оптимальных условий работы гемоглобина. Гемоглобин – металлопротеид, состоящий из глобиновой (две цепи типа α и две цепи β (или δ, или γ) и гемовой (протопорфирин-IX, соединенный с ионом Fe²⁺) группировок. В онтогенезе последовательно синтезируется несколько типов гемоглобина: HGB Gower₁, HGB Gower₂, HGB Portland₁, HGB Portland₂ – эмбриональные типы, HGB F – фетальный тип (до 1,0% присутствует в крови взрослого здорового человека), HGB A₁, HGB A₂ – постнатальные типы. Контроль и регуляция синтеза гемоглобина осуществляется генами, локализованными в 11 и 16 хромосомах.

Патологически измененные эритроциты (вследствие наследственных и/или приобретенных дефектов цитоскелета мембраны, наличия/организации ядерного материала, нарушений синтеза гемоглобина, иммунопатологических процессов, спленэктомии и пр.) имеют различную форму и способность воспринимать красители, что имеет важное диагностическое значение. При патологии эритроидного ростка кроветворения в мазке крови можно обнаружить:

- Эритробласты – ядросодержащие эритроидные клетки. Их появление в периферической крови свидетельствует о резком усилении эритропоэза и характерно для тяжелых форм анемии, неопластических заболеваний крови, гемолитической болезни новорожденных и других заболеваниях;

- Анизоцитоз ( RDW ) – наличие в крови более 14,5% эритроцитов, отличных по диаметру (объему) от референсных значений. Анизоцитоз может проявляться преобладанием макроцитов (дизэритропоэтические анемии, алкогольиндуцированный цирроз печени, ретикулоцитоз) или микроцитов (железодефициты, талассемии);

- Пойкилоцитоз – наличие в крови более 10% эритроцитов имеющих форму, отличную от двояковогнутого диска (овальные, сферические, каплевидные, эхиноциты);

- Шизоцитоз – наличие в крови фрагментов разрушенных эритроцитов (например, при малярии и других гематотропных паразитарных инвазиях);

- Диффузная базофилия цитоплазмы – базофильное окрашивание цитоплазмы эритроцита при стандартных методах гистологического исследования мазка крови. Явление характерно для ретикулоцитоза (RTC более 1,2% от общего числа RBC), неопластической трансформации эритроидного ростка и является маркером ускоренного эритропоэза в красном костном мозге;

- Базофильная пунктация эритроцитов – наличие в цитоплазме эритроцитов базофильно окрашенных гранул. Является маркером нарушения эритропоэза (характерна также отрицательная реакция Перльса на железо) или наличия внутриклеточно расположенных инфекционных агентов;

- Гипохромазия – снижение интенсивности окраски эритроцитов. Возникает при снижении среднекорпускулярного содержания гемоглобина (нарушение синтеза глобиновой и/или гемовой группировок HGB);

- Гиперхромазия – избыточное окрашивание эритроцитов стандартными гистологическими методами. Как правило, обусловлена повышенным среднекорпускулярным содержанием гемоглобина и характерна для макроцитоза и сфероцитоза;

- Анизохромазия – присутствие в мазке крови эритроцитов с различной интенсивностью окраски. Классическим примером является анизохромазия при лечении желедодефицитной анемии препаратами железа. Это явление следует отличать от диморфизма эритроцитов (например, при переливании крови, когда в кровотоке присутствуют эритроциты донора и реципиента);

- Полихромазия – разнообразное окрашивание эритроцитов в мазке крови (эозинофильная окраска сочетается с базофильной). Характерно для ретикулоцитоза и неопластических процессов;

- Патологические эритроцитарные включения: тельца Хауэлла-Жолли – остатки ядерного материала (пернициозная анемия, спленэктомия), тельца Паппенгеймера – интенсивно базофильные включения гемосидерина, дающие положительную реакцию при окраске по Перльсу (нарушение утилизации железа в организме) [2].

В зависимости от степени насыщения эритроцитов гемоглобином меняется способность форменных элементов воспринимать красители. Для оценки этого показателя используется критерий среднее содержание гемоглобина в эритроците (МНС), определяемый автоматически на всех типах современных гематологических анализаторов и пришедший на смену устаревшему, определяемому расчетным методом «цветовому показателю». Референсные значения МНС в крови взрослого человека составляет 28-34 пг_HGB/RBC. Для пересчета в относительные единицы цветового показателя удобно пользоваться следующим соотношением: «цветовой показатель» = 1,0 соответствует значению MHC = 33,34 пг_HGB/RBC. Интенсивность окраски эритроцитов в мазке крови определяется также их величиной. Для оценки этого показателя используется величина MCV – средний объем эритроцита (автоматическое определение на гематологическом анализаторе) и D_RBC – средний диаметр эритроцита (стандартное гистологическое исследование с математическим анализом микроизображения). В норме MCV составляет 80–100 фл, D_RBC – 6,5–8,5 мкм.

Содержание эритроцитов и гемоглобина в единице объема крови подвержено значительным колебаниям, причиной которых могут быть различные физиологические (возрастные изменения, беременность и пр.) и патологические (гипоксия, наследственная патология, онкологические заболевания и пр.) процессы.

Эритропоэз – процесс формирования и дифференцировки клеток эритроидного ряда, с четвертого месяца внутриутробного развития и в постнатальном онтогенезе происходит в красном костном мозге под влиянием эритропоэтина (ЕРО) и паракринного воздействия клеток микроокружения, при участии витаминов В₉ и В₁₂, ионов железа и меди и завершается выходом в циркулирующую кровь полностью дифференцированных, лишенных ядра и максимально содержащих гемоглобин эритроцитов (нормоцитов) и временно сохранивших остатки ядерного материала ретикулоцитов (RTC) (не более 1,2% от общего числа эритроидных клеток в крови взрослых и не более 2 – 5% в крови доношенных новорожденных).

Ретикулоциты легко отличаются от нормоцитов в мазке крови большим размером (объемом) и по диффузной базофильной окраске при стандартном гистологическом исследовании. Процесс «дозревания» циркулирующих в крови ретикулоцитов происходит в течение 1 – 3 суток. Это время может быть увеличено при патологических состояниях, сопровождающихся увеличенным выходом ретикулоцитов в кровоток [2].

В норме эритропоэз происходит в относительно обособленных эритробластических островках красного костного мозга, представляющих собой объединение регуляторного центрально расположенного макрофага и периферических эритроидных клеток на различных стадиях дифференцировки.

На кроветворение большое влияние оказывает эндокринная система. Увеличение продукции андрогенов способствует усилению пролиферации эритроидных клеток, а повышенный уровень эстрогенов, напротив, оказывает ингибирующий эффект. Высокие концентрации катехоламинов также ускоряют процесс эритропоэза.

Анализируя состояние эритроидного ростка кроветворения в красном костном мозге, оценивают морфофизиологические свойства эритроцитов и их предшественников. Различают эффективный (эритроциты и ретикулоциты не имеют структурно-функциональных дефектов, как правило, не разрушаются в костном мозге, свободно выходят в периферический кровоток, пролиферация их предшественников адекватно усиливается при стимуляции эритропоэтином и другими цитокинами) и неэффективный (происходит разрушение значительной части эритроидных клеток в костном мозге вследствие нарушений механизмов их образования) эритропоэз.

В классической патофизиологии различают «нормобластический» и «мегалобластический» типы эритропоэза. Однако принципиальных отличий в механизмах образования эритроцитов между этими типами нет, «мегалобластический» эритропоэз возникает в условиях дефицита витамина В₁₂ и/или В₉ и переходит на «нормобластический» тип при устранении недостатка. Ярким доказательством этого является «мегалобластический» тип кроветворения организма во внутриутробном развитии, как следствие транзиторнорного дефицита фолатов и кобаламина.

«Мегалобластический» тип гемопоэза приводит к образованию крупных ядросодержащих (мегалобласты) и безядерных (мегалоциты) клеток. MCV значительно превышает 110 фл, продолжительность жизни резко уменьшена. Макроцитоз связан с несовпадением синтетических процессов в цитоплазме (соответствует норме) со скоростью дифференцировки ядер клеток (резко снижена вследствие нарушения процессов синтеза ДНК) [4].

В условиях избыточной активации гемопоэза или, наоборот, апластических изменениях красного костного мозга наблюдается возникновение экстрамедуллярных очагов кроветворения в органах и тканях, в которых гемопоэз происходит в раннем онтогенезе (печень, селезенка, лимфатические узлы). При острой нехватке форменных элементов в периферической крови экстрамедуллярные очаги гемопоэза позволяют восполнить (до определенной степени) их количество, но при этом возрастает риск неопластической трансформации этих тканей.

Состояние красного костного мозга – объективный критерий, отражающий процессы в системе крови в целом. Наиболее информативным показателем активности красного костного мозга является анализ биопсийного материала (миелограмма).

Клеточный состав костного мозга в норме (световая микроскопия) [1]:

- Адипоциты (жировая ткань) – 50% (± 10–15%),

- Гемопоэтические клетки (общее число) – 50% (±10–15%) (соотношение адипоциты /гемопоэтические клетки в норме составляет 1/1 ± 0,10-0,15):

- Эритроидные клетки (эритроциты и их предшественники) – 15 – 20% (из них ≈ в 40% клеток гистологически выявляются 1–2 гранулы гемосидерина и/или ферритина – сидеробласты и сидероциты),

- Миелоидные клетки (общее число) – 40 – 65%,

- Лимфоциты – менее 20% от всех ядросодержащих клеток,

- Мегакариоциты – 2 – 5 клеток в поле зрения,

- Плазматические клетки – менее 3% от всех ядросодержащих клеток.

В условиях острого дефицита эритроцитов и/или гемоглобина гемопоэтические островки красного костного мозга способны увеличить продукцию форменных элементов в 6–8 раз, быстро компенсируя потери (в условиях достаточного присутствия пластических субстратов) [3].

В классической патофизиологии патологические состояния эритроидного ростка кроветворения делят на две группы: эритроцитозы и анемии.

Эритроцитоз (полицитемия) – состояние системы крови, выражающееся в увеличении содержания эритроцитов и/или гемоглобина в единице объема. Т.к. эритроциты составляют основной пул форменных элементов крови, это приводит к увеличению гематокрита, ухудшению гемореологических свойств и созданию условий для развития тромбозов и их осложнений (ишемия органов и тканей, вторичная артериальная гипертензия, тромбоэмболические осложнения).

Классификация эритроцитозов:

ü Относительные эритроцитозы (псевдополицитемии) – возникают вследствие утраты значительной части плазмы крови (при ожогах, рвоте, диареи).

ü Абсолютные эритроцитозы (истинные полицитемии) – увеличение содержания эритроцитов и гемоглобина в крови вследствие усиленной пролиферации клеток-предшественников и увеличения синтеза гемоглобина:

- Физиологические эритроцитозы (адаптация к высоким физическим нагрузкам, к подъему на высокогорье),

- Патологические эритроцитозы (заболевания системы крови или осложнения основного заболевания, сопровождающиеся стимуляцией эритропоэза):

- Первичные патологические эритроцитозы (эритропоэтиннезависимые) (неопластическая трансформация эритроидного ростка кроветворения, истинная (ненеопластическая) полицитемия),

- Вторичные патологические эритроцитозы (эритропоэтинзависимые):

- вызванные экзоэритроцитарными причинами (эритроцитозы при ХОБЛ, пороках сердца, почек, различных видах гипоксии),

- вызванные эндоэритроцитарными причинами (эритроцитозы при эритроцитарных энзимопатиях, при структурно-функциональных дефектах гемоглобина).

Лишенный ядра и большей части органелл, эритроцит обеспечивает свои энергетические потребности путем активации гликолиза и пентозного цикла. Промежуточные продукты этих процессов могут выступать в качестве маркеров нарушений метаболизма эритроцитов или нарушении оксигенации крови. Например, высокоинформативным показателем является определение концентрации 2,3-дифосфоглицерата (2,3-ДФГ), содержание которого в здоровом организме повышается при снижении парциального давления кислорода (Р_О2) в окружающей среде, ХОБЛ, врожденных пороках сердца. 2,3-ДФГ, изменяя конформационные свойства молекулы гемоглобина, не оказывая существенного влияния на константу Хилла, значимо снижает сродство последнего к кислороду, что облегчает процесс отдачи кислорода тканям. Физиологические эритроцитозы (например, эритроцитоз при подъеме на высокогорье), как правило, сопровождаются увеличением уровня 2,3-ДФГ. Наследственно обусловленное снижение концентрации 2,3-ДФГ в эритроцитах компенсаторно приводит к развитию вторичного патологического эритроцитоза.

 

Цель занятия:

1. Освоить методику взятия крови у подопытного животного путем пункции сердца.

2. Освоить методику приготовления и окрашивания мазка крови.

3. Решение учебных гемограмм

 

---

Дата добавления: 2019-03-09; просмотров: 332; Мы поможем в написании вашей работы!

Поделиться с друзьями:

---

---

Мы поможем в написании ваших работ!