Наиболее распространен классический микроскопический метод подсчета клеток в камере Горяева.
Принцип: подсчет эритроцитов под микроскопом в определенном количестве квадратов счетной сетки с последующим пересчетом на 1 мкл крови, исходя из объёма квадратов и разведения крови.
Ход определения: исследуемую кровь разводят в 200 раз, для чего в пробирку с 4 мл 0,9% раствор хлорида натрия добавляют 20 мкл крови. Кончик пипетки вытирают фильтровальной бумагой или марлей, и кровь выдувают на дно пробирки. Пипетку тщательно промывают в верхнем слое жидкости, содержимое пробирки перемешивают и оставляют стоять до момента подсчета. К счетной камере притирают стекло и заполняют ее разведенной кровью. Предварительно несколько раз тщательно встряхивают содержимое пробирки, затем стеклянной или пластиковой пастеровской пипеткой или стеклянной палочкой отбирают каплю разведенной крови и подносят ее к краю покровного стекла, следя за тем, чтобы она равномерно без пузырьков воздуха заполнила всю поверхность камеры с сеткой, не затекая в бороздки. Заполненную камеру оставляют в горизонтальном положении на 1 минуту (для оседания эритроцитов).
Подсчет эритроцитов производят в 5 больших квадратах, разделенных на 16 малых, то есть в 80 малых квадратах. Рекомендуется считать клетки в квадратах сетки, расположенных по диагонали. Для того чтобы не считать одни и те же эритроциты, лежащие на линиях, принято считать клетки только на определенных двух линиях (например, на левой и верхней).
|
|
|
Расчет количества эритроцитов в 1 мкл крови производят, исходя из разведения крови (200), числа сосчитанных квадратов (80) и объема 1 малого квадрата (1/4000 мкл), по формуле:
где Х – число эритроцитов в 1 мкл крови,
А – число сосчитанных эритроцитов.
Эритроциты рекомендуется считать в течение 2-З часов после взятия крови.
В последнее время все чаще используют более точные методы подсчета, без использования микроскоп. Содержание эритроцитов в растворе определяют по степени рассеяния проходящего через него светового луча или по изменению электрической проводимости в тонкой трубке при прохождении через нее клеток.
Гемоглобин, его структура и функции. Виды гемоглобина и его соединения (физиологические и патологические).
Гемоглобин, его структура и функции.
Гемоглобин – это гемопротеин, дыхательный пигмент с молекулярной массой около 60 000, окрашивающий эритроцит в красный цвет после связывания молекулы О2 с ионом железа (Fе++) и составляющего около 95% сухого вещества эритроцита. Молекула гемоглобина состоит из четырех полипептидных цепей (α1, α2, β1 и β2), с каждой из которых нековалентно связана особая пигментная группа – гем – органическое небелковое соединение, способного связывать одну молекулу О2 Таким образом, одна молекула гемоглобина может переносить до 4-х молекул кислорода.
|
|
|
Основная функция гемоглобина – транспорт О2 и, в меньшей степени, СО2. Кроме того, гемоглобин обладает буферными свойствами.
Виды гемоглобина.
Существуют три основных вида гемоглобина:
· НbР – примитивный;
· НbF – фетальный (от лат. fetus – плод);
· НЬА – гемоглобин взрослых (от лат. adultus – взрослый).
НbР и НbF обладают большим сродством к кислороду, чем НbА, благодаря чему облегчается переход кислорода от матери к плоду. НbP обнаруживается у плода до 3-месячного возраста, начиная со 2-го месяца внутриутробного развития преобладающим видом гемоглобина плода становится НbF, а потом – НbА. У новорожденных НbF составляет около 20% от общего количества гемоглобина крови, у взрослых – не более 2%.
Физиологические соединения гемоглобина.
В норме гемоглобин содержится в крови в виде трех физиологических соединений:
· восстановленный (Нb);
· оксигемоглобин (НbО2);
· карбгемоглобин (НbСО3).
Цвет НbO2 – алый, НЬ и НbСО2 – синий, что обуславливает различия цвета артериальной и венозной крови.
Дата добавления: 2018-08-06; просмотров: 771; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!