Техніка приготування препаратів і методи фарбування мікроорганізмів
Зміст роботи:
1. Техніка приготування препаратів для живих та неживих культур.
2. Методи фарбування мікроорганізмів.
1. Техніка приготування препаратів для живих та неживих культур
Для вивчення мікроорганізмів в живому стані використовують препарати «роздавлена крапля» і «висяча крапля», в неживому – фіксований препарат.
Підготовка препарату «роздавлена крапля»
1. На чисте предметне|предметне| скло нанести|завдавати| краплю|краплину| дистильованої води.
2. Металеву петлю прожарити в полум’ї спиртівки, охолодити на повітрі і занурити|навантажити| в досліджуваний настій, внести петлю з|із| невеликою кількістю мікроорганізмів в краплю дистильованої води|краплину|, обережно перемішати|перемішувати| вміст, рівномірно розповсюдити мазок бактерій по предметному склу і накрити покривним склом. Покривне скло накладають таким чином, щоб між ним і предметним склом не було міхурців повітря. Надлишок рідини, що виступає за край покривного скла, видаляють фільтрувальним папером.
3. Розглянути|розглядувати| препарат під мікроскопом при збільшенні 15x40. При детальнішому вивченні структури мікрооб'єкту вивчити його в імерсійному середовищі|середі|. Для цього на поверхню покривного скла нанести|завдавати| краплю|краплину| імерсійної олії|мастила| і занурити|навантажити| в нього об'єктив 90х|. Наприкінці|у кінці| роботи обов'язково протерти об'єктив бавовняною серветкою.
|
|
|
4. Замалювати форми досліджених мікроорганізмів.
Підготовка препарату «висяча крапля»
1. Краї покривного скла акуратно змастити|змазати| вазеліном.
2. Невелику краплю|краплину| суспензії мікробних клітин|клітин| нанести|завдавати| на покривне скло і обережно накласти на нього предметне|предметне| скло з|із| ямочкою так, щоб крапля|краплина| вільно поміщалася в центрі поглиблення, але не| зливалася з|із| ним.
3. Препарат перевернути|перевертати| і розглянути|розглядувати| під мікроскопом при збільшенні 15x40 або 15x90.
4. Вивчити рух мікроорганізмів.
Підготовка фіксованого офарбованого препарату
1. Приготування мазка. Краплю готової мікробної суспензії розмазують по поверхні середньої частини предметного скла на площі 2 см2.
2. Підсушування мазка на повітрі. Щоб прискорити процес висушування препарат направляють під струмінь теплого повітря досить високо над полум'ям спиртівки, тримаючи скло мазком догори. Після сушіння мазка на поверхні скла залишається ледь примітний наліт.
3. Фіксація мазка. Через полум’я пальника проводять предметне скло 3-4 рази мазком догори. При цьому мікроби гинуть і прикріплюються до скла. Мертві клітини також краще забарвлюються фарбами.
|
|
|
4. Фарбування мазка. Існують позитивнийі негативний способи фарбування. При позитивному способі офарбовуються клітини мікроорганізмів. При негативному - фарба заповнює простір між клітинами, а мікроорганізми залишаються нефарбованими. Фарбування буває простим, коли використовується лише одна фарба протягом 1-3 хв (наприклад, метиленовий синій або фуксин), і складним - при використанні двох і більше фарб (наприклад, за методом Грама). Для фарбування на мазок наносять необхідну фарбу, витримують декілька хвилин (за методикою), залишок фарби змивають водою і препарат промокають фільтрувальним папером або підсушують.
Методи фарбування мікроорганізмів
Фарбування живих клітин мікроорганізмів
1. До краплі|краплини| суспензії культури дріжджів на предметному |предметному|склі додати|добавляти| краплю|краплину| слабкого|слабого| розчину (1:1000) фарбника|барвника| (метиленового синього або фуксину), розмішати, потім накрити покривним склом.
2. Розглянути|розглядувати| препарат під мікроскопом при збільшенні 15x40.
3. Замалювати забарвлені|пофарбовані| клітини|клітини| культури дріжджів.
4. Відпрацьовані препарати живих|жвавих| мікроорганізмів помістити в посуд|посудину| з|із| дезінфікуючим розчином для знешкодження.
|
|
|
Простий метод фарбування
1. На предметне скло нанести краплю дистильованої води, внести до неї невелику кількість досліджуваного матеріалу мікробіологічною петлею, обережно розмішати і розмазати на площі 2-3 см2 тонким шаром.
2. Мазок висушити на повітрі або струмені теплого повітря над полум'ям пальника, тримаючи скло мазком вгору|угору|, потім охолоджений мазок зафіксувати в полум'ї пальника: стекло з|із| мазком, оберненим догори, провести 3-4 рази через полум'я. При цьому мікроорганізми гинуть, їх клітини|клітини| прикріпляються до скла, фарбування|пофарбування| поліпшується|покращується|.
3. Фіксований препарат помістити мазком догори на мікробіологічний "місток" над кристалізатором.
4. На мазок нанести|завдавати| фарбник|барвник|, який повинен покрити весь мазок. Фуксин витримати на препараті 1-2 хв|мінути|, метиленовий синій - 3-5 хв|мінути|.
5. Злити залишки фарби|барви|, а препарат промити слабким|слабим| струменем води.
6. Висушити мазок на повітрі або обережно промокнути фільтрувальним папером.
7. На висушений препарат нанести|завдавати| краплю|краплину| імерсійної олії|мастила| або гліцерину і розглянути|розглядувати| під мікроскопом при збільшенні 15x90.
8. Замалювати офарбовані|пофарбовані| клітини|клітини| мікроорганізмів.
Дата добавления: 2018-04-05; просмотров: 2128; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!