Работа 2. Качественная реакция на тироксин

⇐ ПредыдущаяСтр 37 из 52Следующая ⇒

Тироксин можно обнаружить в препарате тиреоидина, получаемого из щитовидной железы крупного рогатого скота. Обнаруживают тироксин следующим образом – отщепляют от него с помощью кислотного гидролиза йодоводородную кислоту и переводят ее в свободный йод. Последний экстрагируют хлороформом, который окрашивается при этом в фиолетовый цвет.

Ход работ. В пробирку внести полтаблетки тиреоидина и 10 капель НNO₃. Осторожно нагреть 1-2 мин. Затем добавить 20 капель 1% KIO₃ (иодат калия), перемешать и охлаждить. KIO₃окисляет освободившуюся при гидролизе йодоводородную кислоту в свободный иод.

5НCI + KIO₃ + HNO₃ = 3I₂ + KNO₃

В пробирку добавить 1-2 мл хлороформа и хорошо встряхнуть. После отстаивания слой хлороформа (нижний) окрашивается в фиолетовый цвет.

Работа 3. Качественные реакции на адреналин

Раствор адреналина: (содержимое ампулы 0,1%) растворить в 100 мл воды.

Адреналин образуется из тирозина при участии метионина (донор метильной группа). При образовании адреналина кольцо тирозина превращается в пирокатехиновое кольцо (оно легко окисляется, образуя различные цветные соединения). Это и используется во многих цветных реакциях на адреналин.

1) Диазореакция. Ход работы. В пробирку поместить 3 капли 1% раствора сульфаниловой кислоты, 3 капли 5% раствора азотистокислого Na, 5 капель раствора адреналина (1:1000) и 3 капли 10% раствора углекислого Na. Жидкость окрашивается в красный цвет.

2) Реакция с йодатом калия. Ход работы. В пробирку внести 3 капли адреналина (1:1000), 2-3 капли 10% раствора KIO₃ и 2 капли 10% CH₃COOH. Жидкость слегка нагреть. Появляется красно-фиолетовое окрашивание.

Результаты исследования гормонов оформить в виде таблицы:

Железа внутренней секреции	Гормон	Химическое строение	Метаболическая роль	Употребляемые реактивы	Получаемое окрашивание

Определение концентрации адреналина

Принцип метода. Метод основан на колориметрическом определении интенсивности синего окрашивания, которое образуется при взаимодействии адреналина с реактивом Фолина. Реактив Фолина состоит из солей фосфорно-вольфрамовой и фосфорно-молибденовой кислот. Эти соли при взаимодействии с фенолами восстанавливаются с образованием более низких окислов, комплексы которых окрашены в синий цвет.

Ход работы.

В сухую пробирку внести1 мл исследуемого раствора, 4 мл 10% раствора Na₂CO₃ и 0,5 мл реактива Фолина. Содержимое встряхнуть. Через 3-5 мин появляется синяя окраска. Экстинкцию измерить на ФЭК против контроля (контроль – 1 мл Н₂О, 4 мл 10% Na₂CO₃ и 0,5 мл реактива Фолина). Количество адреналина определить по калибровочной.

Калибровочная для определения адреналина

В мерную колбу емкостью 25 мл вносят точно 1 мл коммерческого адреналина. Доводят до метки водой. 1 мл стандартного раствора содержит 0,04 мг адреналина, что соответствует концентрации 4 мг%. Этот раствор разводят следующим образом:

Дата добавления: 2016-01-05; просмотров: 52; Мы поможем в написании вашей работы!

Поделиться с друзьями:

⇐ Предыдущая 32 33 34 35 363738 39 40 41 Следующая ⇒

Мы поможем в написании ваших работ!