Возбудители злокачественного отека
Злокачественный отек – неконтагиозная токсикоинфекционная болезнь, возникающая в результате ранений или травм и характеризующаяся отеками, омертвлением пораженных тканей и интоксикацией организма.
Возбудители злокачественного отека – Clostridium ре rfringens , C . septicum , C . novyi , C . histolyticum .
Заболевание полимикробной этиологии, развивается вследствие инфицирования раневой поверхности микробами данной группы. Наиболее благоприятны для развития микробов рваные раны с размозженными и омертвевшими тканями, особенно участки тела, богатые мускулатурой и соединительной тканью. Из пораженных тканей чаще выделяют Cl. perfringens (60–80 %), реже Cl. novyi (20–30 %), Cl. septicum (10–20 %) и в отдельных случаях С1. histolyticum (10–20 %) и другие представители патогенных клостридий. Болезнь вызывают как каждый из этих микроорганизмов, так и их ассоциации. Болезнь, вызванная ассоциацией микробов, протекает остро и в тяжелой форме. Нередко из очагов поражения выделяют и Cl. sporogenes, Cl. sordellii, стрептококки, стафилококки, протей и другие микроорганизмы, которые самостоятельно болезнь не вызывают, но, обладая выраженными протеолитическими свойствами, способствуют обеспечению более благоприятных условий для активного размножения возбудителей.
По локализации инфекционного процесса различают: послераневой злокачественный отек, послеродовой злокачественный отек, злокачественный отек сычуга ягнят, злокачественный отек головы у баранов и т. д.
|
|
|
При послеродовом злокачественном отеке основная этиологическая роль принадлежит Cl. septicum. Злокачественный отек сычуга ягнят преимущественно вызывается Cl. perfringens, а при отечной болезни головы выделяют Cl. novyi.
Патогенез. Возбудители, проникшие в поврежденные ткани, при наличии подходящих условий начинают размножаться с выделением токсинов, а последние оказывают разрушающее действие на здоровые ткани и подготавливают условия для продвижения и усиленного размножения микробов. Процесс приобретает бесконечность, при отсутствии сопротивляемости организма, без оказания лечебной помощи животные погибают. Смерть наступает в результате интоксикации организма не только бактериальными токсинами, но и продуктами тканевого разложения.
Клинические признаки. Симптомокомплекс и течение болезни зависят от вида и токсигенности возбудителей, их ассоциаций, характера и локализации поражений и вида животного.
Инкубационный период длится от нескольких часов до нескольких дней. Чаще всего продолжительный период наблюдается при инфицировании спорами Cl. novyi.
Болезнь длится от нескольких часов до 1–2 суток. При злокачественном отеке головы у баранов основным признаком болезни является опухание головы. В отдельных случаях отек переходит в область шеи, подгрудка и передних конечностей.
|
|
|
Злокачественный отек у свиней характеризуется появлением отчетливых припухлостей вокруг места внедрения инфекций, чаще в области шеи или передних конечностей. Болезнь протекает остро, и животное погибает через 1–2 дня.
Патологоанатомические изменения зависят от места локализации очага инфекций и возбудителя болезни. Наиболее характерные изменения локализуются в пораженных органах или участках тела. Трупы в большинстве случаев вздуты и быстро разлагаются. На месте первичного поражения ткани обильно пропитаны инфильтратом различного оттенка. При разрезе из отечного участка вытекает серозная или серозно-геморрагическая жидкость.
При злокачественном отеке сычуга ягнят отмечаются сильное увеличение сычуга, утолщение его стенок и крепитация за счет инфильтрации и наличия многочисленных пузырьков газа. Слизистая геморрагически воспалена, местами имеются очаги кровоизлияний и некроза. Изменения внутренних органов не типичны. Как правило, выявляются поражения, характерные для токсикоинфекций, в частности гиперемия и отек легких, выпот в сердечной сорочке, перерождения печени и сердечной мышцы, увеличение и кровоизлияния лимфатических узлов и т. д.
|
|
|
При гибели животных в результате заражения С1. novyi обнаруживается студенистый бесцветный или кремового оттенка отек. Поражения при Cl. histolyticum весьма характерны: распад всех тканей от кожи до костей, кровянистый, с частицами распавшихся тканей экссудат.
При родильном злокачественном отеке поражения локализуются в половых органах, мышцах таза, бедер и спины. Слизистая оболочка влагалища и матки сильно утолщена и покрыта грязными, кашицеобразными, издающими неприятный запах некротическими массами.
При злокачественном отеке сычуга ягнят отмечаются сильное увеличение сычуга, утолщение его стенок и крепитация за счет инфильтрации и наличия многочисленных пузырьков газа. Слизистая геморрагически воспалена, местами имеются очаги кровоизлияний и некроза. Содержимое обычно жидкой консистенции с примесью шерсти, остатков корма, земли, часто находят фитопилобезоары различной величины и формы.
Диагноз устанавливается на основании симптомокомплекса болезни. Наличие отечности при явной травме указывает на злокачественный отек. Посмертно диагноз подтверждается характерными патологоанатомическими изменениями пораженных участков и бактериологическим исследованием. Материалом для лабораторного исследования служат кусочки пораженных тканей, экссудат, внутренние органы павших животных. Если материал нельзя быстро доставить в лабораторию, его консервируют в 40 %-ном водном растворе глицерина или же полоски пораженной ткани в марлевом мешочке (от мух) высушивают на воздухе. Препараты-мазки готовят из исследуемого материала и колоний полученных культур, окрашивают по Граму. Для биопробы лучше использовать чистую культуру каждого выделенного возбудителя. Видовую принадлежность выделяемых выше названных микробов определяют в соответствии с характеристикой каждого из них.
|
|
|
При установлении диагноза на злокачественный отек необходимо исключить карбункулезную форму сибирской язвы и эмфизематозный карбункул крупного рогатого скота.
При лабораторном подтверждении диагноза следует учесть, что по морфологическим, культурально-биохимическим и антигенным свойствам один из часто встречаемых возбудителей злокачественного отека крупного рогатого скота Cl. septicum очень близок к возбудителю эмфизематозного карбункула, их дифференциация в практических условиях не всегда представляется возможным.
Глава 15. ГРАМОТРИЦАТЕЛЬНЫЕ
НЕСПОРООБРАЗУЮЩИЕ БАКТЕРИИ
15.
Патогенные бактероиды
Возбудитель копытной гнили
Копытная гниль (Paronychia contagiosa) – хроническая инфекционная болезнь овец и коз, характеризующаяся хромотой, воспалением кожи в области межкопытной щели, гнилостным распадом и отслоением подошвы и боковых стенок рогового башмака.
Возбудитель – Bacteroides nodosus (син. Fusiformis nodosus).
Bacteroides nodosus крупная (6–8 × 0,6–1 мкм), прямая или слегка изогнутая, неподвижная, грамотрицательная, бесспоровая анаэробная палочка с утолщенными концами. Выделяет протеолитические ферменты, играющие значительную роль в патологическом процессе. Известно три серологических варианта этого микроба. Выделить его культуру из патологического материала удается редко и только на средах, содержащих экстракты копытного рога. Микроб непатогенен для лабораторных животных.
Устойчивость во внешней среде незначительна. На пастбищах сохраняется не более двух недель, но в копытном роге жизнеспособен до трех лет. При 90 °С погибает за 1 мин.
К копытной гнили восприимчивы овцы и козы любого возраста, пола и породы, но ягнята до отъема обычно не заболевают. Первые вспышки болезни возникают вскоре после ввода в благополучные отары больных или переболевших животных. При недостаточной эффективности мер борьбы болезнь может принять стационарный характер.
Патогенез. Патологический процесс вначале ограничивается кожей области свода межкопытной щели, а в дальнейшем распространяется на внутренние стенки и на другие части копыта, что приводит к гнилостному распаду и отслоению рогового башмака от основы кожи копыта, к хромоте. Процесс может осложнить действие возбудителей других болезней, в частности некробактериоза, в результате чего поражаются копытная кость, сухожилия и связки, суставы.
Клинические признаки. Инкубационный период 3–6 дней. Вначале болезнь протекает без видимых клинических признаков. При обширном воспалении кожи межпальцевой щели появляется хромота, которая постепенно усиливается, так как патологический процесс распространяется на копыто. Кожа в области межкопытной щели мацерируется, изъязвляется, отделяется экссудат с характерным запахом гнилого сыра, а затем происходит отслоение рогового башмака. При осложнении копытной гнили некробактериозом образуются абсцессы, язвы и свищи в области венчика, развивается некроз копытной кости, сухожилий, связок, суставов.
Патологоанатомические изменения характеризуются гнойно-некротическим распадом сосочкового слоя основы кожи копытец, отслоением рогового слоя, истончением и деформацией стенки копытец.
Диагноз без лабораторного исследования поставить трудно, поскольку аналогичные признаки обнаруживают при некробактериозе, контагиозном пустулезном дерматите, ящуре и некоторых незаразных болезнях. Микроскопическое исследование мазков-отпечатков из свежепораженных участков основы кожи копытец или экссудата позволяет обнаружить (по характерной морфологии) возбудителя болезни. В неясных случаях можно поставить биопробу на овцах, которых заражают втиранием нативного патматериала или его суспензии на физиологическом растворе в скарифицированную кожу межпальцевых щелей. Разработаны методы серологической и непрямой иммунофлуоресцентной диагностики. С помощью PCК выявляют до 80 % зараженных животных.
Возбудитель некробактериоза
Некробактериоз (Necrobacteriosis) – инфекционная болезнь, характеризующаяся гнойно-некротическими поражениями кожи и подлежащих тканей (чаще на нижних частях конечностей), слизистых оболочек, а иногда и паренхиматозных органов.
Возбудитель некробактериоза – Fusobacterium necrophorum из семейств Bacteroidaceae, рода Fusarium. Микроб выделен Р. Кохом в 1881 г. из изъязвленной роговицы барана, пораженного оспой, в 1882 году он был обнаружен и подробно описан Леффлером при дифтерии телят. В последующем его выявляли Шютц и М.Г. Тартаковский. Чистую культуру F. necrophorum первыми получили Банг (1890) и Шморл (1891).
Морфология и тинкториальные свойства. Микроб полиморфный. В препаратах из свежих культур и свежих некротических фокусов имеют форму палочек или длинных зернисто-окрашенных четкообразных переплетающихся нитей длиной 100–300 мкм (могут быть и короче – 30–50 мкм), отдельные нити достигают 400 мкм. Некоторые нити формируют шаровидные и колбовидные вздутия. Длина изолированных палочек 2–5 мкм.
В мазках из старых культур и отпечатках из хронических очагов поражения, особенно инкапсулированных, бактерия некроза имеет форму коротких палочек длиной 0,7–4 мкм и шириной 0,3–0,5 мкм. Окрашиваются они зернисто, неравномерно, часто по концам более интенсивно (биполярно). В таких препаратах встречаются также кокковидные формы. Бактерия неподвижна, жгутиков не имеет, спор и капсулу не образует.
Спиртоводными растворами анилиновых красителей окрашивается неравномерно, с промежутками, по Граму отрицательно. Хорошо красится фуксином Циля, синькой Леффлера, по Романовскому – Гимзе и особенно по Муромцеву.
Культивирование. Бактерия некробактериоза – строгий анаэроб. Для его культивирования используют среду Китт – Тароцци, бульон Мартена, печеночный бульон Хоттингера, сывороточный и глюкозо-кровяной агар, полужидкий агар, мозговую среду. Добавление к среде Китт – Тароцци 10–20 % свежей бычьей сыворотки и 0,2–0,5 % глюкозы приводит к более интенсивному росту микроба и повышению газообразования. Температурный оптимум 36–38 °С, рН среды 7,4–7,6.
На среде Китт – Тароцци через 24–48 ч. появляется помутнение и на кусочках печени образуется хлопьевидный осадок; газообразование слабое, но у отдельных штаммов оно выражено хорошо. Через 5–8 суток наступает просветление среды и выпадение крошковатого осадка, разбивающегося при встряхивании в равномерную муть. При посеве в высокий столбик сывороточного агара через 4–5 дней образуются чечевицеобразные, мелкозернистые, с радиальными отростками колонии.
На поверхности глюкозо-кровяного агара растет при создании вакуума до 4–10 мм ртутного столба, на 2–3-й сутки появляются мелкие круглые или продолговатые росинчатые колонии, увеличивающиеся в размерах к 4–5-му дню. Иногда колонии окружены слабой зоной зеленоватого гемолиза. Поверхность колоний гладкая, матовая. При помещении культуры в аэробные условия колонии продолжают расти, но становятся непрозрачными и шероховатыми.
Микроб хорошо растет на мозговой среде и при добавлении 0,05 % сернокислого железа вызывает ее почернение за счет образования сероводорода.
Патогенность. В естественных условиях некробактериозом заболевают лошади, крупный рогатый скот, буйволы, олени, овцы, козы, свиньи, собаки, кошки, куры, гуси, а также дикие животные – косули, сибирские козероги, лоси, архары, антилопы, ламы, зебры, бегемоты, бобры, сурки, ондатры, суслики, песчанки, пресмыкающиеся. К некробактериозу восприимчив человек. Из лабораторных животных чувствительны кролики и белые мыши.
У лошадей некробактериоз протекает в форме гангренозного мокреца. У взрослого крупного рогатого скота поражаются нижние части конечностей, кожа вымени, слизистая оболочка влагалища и матки; у телят наблюдается дифтеритическое воспаление слизистых оболочек ротовой полости, гортани и внутренних органов. Для северных оленей характерен некробактериоз копыт (копытная болезнь). Взрослые свиньи болеют редко, но восприимчивы поросята-сосуны; у них отмечают некротический стоматит, ринит, дерматит и энтерит. У овец наиболее часто повреждаются конечности. У собак развивается флегмонозный и пустулезный дерматит с подкожными абсцессами. У кур поражаются глотка, корень языка, гортань, пищевод, внутренние органы.
Токсигенность. Бактерии некроза продуцируют экзотоксин, эндотоксин и гемотоксин. Экзотоксин вырабатывается при культивировании микроба в жидких питательных средах, максимальная концентрация его достигает в 24–36-часовых культурах. Более интенсивно его синтезируют штаммы, выделенные от лошадей. Этот токсин нестоек и разрушается при 55 °С в течение 10 мин, при 100 °С –через 5 мин. Добавление к экзотоксину 0,3 % формалина переводит его в анатоксин.
Гемотоксин интенсивно продуцируется на средах из свежего мяса с добавлением пептона,0,5 % глюкозы, фосфата натрия и небольшого количества крови; обладает термолабильными свойствами и разрушается при 48 °С через 15 мин, при 56 °С полностью инактивируется, при 4 °С сохраняется 2 месяца. Лизирует эритроциты лошади, крупного рогатого скота, барана, свиньи, морской свинки, кролика и голубя.
Патогенез. Некробактериоз – послераневая инфекция. Бактерия некроза интенсивно размножается в травмированных тканях: они недостаточно снабжаются кислородом вследствие нарушения целостности капилляров. Это приводит к созданию анаэробных условий. В здоровых тканях, нормально насыщенных кислородом, возбудитель не размножается. Особенно благоприятные условия для своего развития бактерии находят в крови гематом.
В организме бактерия некроза синтезирует токсические компоненты, блокирующие внутриклеточные ферментные системы и вызывающие некроз окружающих тканей. Процесс осложняется механической закупоркой капилляров интенсивно размножившимися микробными клетками.
Из очага поражения микроб гематогенным путем может распространяться по организму, в значительной степени этому способствует поражение стенок кровеносных сосудов и отрыв тромбов, инфицированных бактериями некроза. В результате процесс распространяется на соседние ткани, возникают вторичные очаги в коже, сухожилиях, костях. Проникновение бактерий в кровь приводит к развитию септицемии и образованию метастатических некротических очагов в легких, сердечной мышце, печени. Заболевание приобретает злокачественное течение и нередко заканчивается смертью.
Клинические признаки. Инкубационный период 1–3 дня. У взрослых овец и коз преобладает поражение конечностей, поэтому первый признак заболевания – хромота. Кожа венчика и области межкопытной щели – покрасневшая, отечная, болезненная. Затем образуются язвы, свищи. Некротизируются сухожилия, связки, суставы. Возможно отпадение рогового башмака, и даже отторжение фаланг пальца.
Патологоанатомические изменения. Патологоанатомические изменения – истощение, некрозы кожи, слизистых оболочек рта и подлежащих тканей. Очаги некроза можно обнаружить в паренхиматозных органах, на слизистой оболочке глотки, пищевода, кишок, половых органов. Наиболее часто встречаются поражения конечностей и слизистой оболочки ротовой полости.
Диагностика. В бактериологическую лабораторию направляют кусочки пораженных органов и тканей с прилегающей здоровой тканью, целые трупы мелких животных и птиц.
Глава 16. ЭНТЕРОБАКТЕРИИ
Семейство кишечных бактерий – Enterobacteriaceae – относится к порядку – Eubacteriales – собственно бактерии. По совместной классификации оно включает 12 родов: Escherichia, Edvwarsiella, Citrobacter, Salmonella, Shigella, Klebsiella, Enterobacter, Hafnia, Serratia, Proteus, Yersinia, Erwinia. В патологии домашних животных наибольшее значение имеют роды Escherichia, Salmonella, Proteus, Yersinia.
Энтеробактерии широко распространены в природе. Среди них имеются патогенные, условнопатогенные и сапрофитные виды. Патогенные виды и типы вызывают болезни, отличающиеся по клиническим проявлениям.
16.
Возбудитель колибактериоза
Колибактериоз (Colibacteriosis), колиэнтерит, эшерихиоз, колисепсис,– острая инфекционная болезнь молодняка животных, характеризующаяся септицемией, токсемией и энтеритом.
Возбудитель – Escherichia coli.
Микроб выделен Т. Эшерихом в 1885 г. Е. coli – обитатель толстого кишечника человека и млекопитающих; содержится также в кишечнике птиц, рыб, рептилий, амфибий и насекомых. Выделяясь в изобилии с испражнениями, постоянно обнаруживается и во внешней среде (почва, вода, предметы).
В род Escherichia входит один вид – Е. coli, включающий несколько серогрупп, дифференцирующихся по культуральным, биохимическим и антигенным признакам.
Морфология. Е. coli по морфологии соответствует представителям семейства Enterobacteriaceae, отличается полиморфизмом; имеются подвижные и неподвижные типы. Содержание Г+Ц в ДНК нуклеоида 50–51 %.
На поверхности клеток имеются пили (реснички), на которых адсорбируются некоторые фаги; микрокапсула не всегда отчетливо выражена.
Культивирование. Кишечная палочка аэроб или факультативный анаэроб, оптимальная температура роста 37–38 °С, рН 7,2–7,5. Рост и размножение бактерий возможен при значительных колебаниях рН среды (5,0–8,0) и температурного режима (15–45 °С). К питательным средам неприхотлива. На плотных средах формируются слабовыпуклые, полупрозрачные сероватые колонии в диаметре 2–3 мм, с ровными краями, сочные, с блестящей поверхностью. В жидких средах образует равномерное помутнение и небольшой осадок. На среде Эндо колонии окрашиваются в цвет фуксина с металлическим оттенком. Встречаются штаммы, образующие неокрашенные колонии. На среде Левина (агар с эозином и метиленовой синькой) колонии окрашиваются в темно-фиолетовый или черный цвет.
Биохимические свойства. Е. coli желатин не разжижает, образует индол, как правило, сероводород, восстанавливает нитраты в нитриты, ферментирует с образованием кислоты и газа лактозу, глюкозу, мальтозу, маннит, арабинозу, галактозу и ряд других углеводов.
Имеются варианты Е. coli, ферментирующие сахарозу, не образующие индол, не имеющие жгутиков, не ферментирующие лактозу.
Патогенность. Некоторые серогруппы Е. coli вызывают тяжелые заболевания с очень высокой смертностью у телят-сосунков. При парентеральном введении энтеропатогенных культур кроликам, морским свинкам, белым мышам у них развивается токсико-септический процесс, приводящий к гибели животных.
Устойчивость. Эшерихии неустойчивы к высокой температуре. При температуре 60 °С погибают в течение 15 мин, при 100 °С – моментально. Губительно действуют на них многие дезинфицирующие вещества (формалин, фенол, хлорная известь, едкий натр и др.). Кроме того (по данным многих авторов), эшерихии чувствительны к неомицину, полимиксину, ампициллину, хлорамфениколу, тетрациклинам, нитрофурановым и сульфаниламидным препаратам. Менее чувствительны к стрептомицину; к пенициллину не чувствительны или слабо чувствительны (продуцируют внутриклеточную пенициллиназу).
Однако в связи с широким использованием лечебных средств и кормовых добавок отмечается всевозрастающая устойчивость эшерихии к основным антибиотикам и другим антибактериальным препаратам. Применение антибиотиков и химиотерапевтических препаратов привело к формированию устойчивых штаммов.
A. Gracia в 1925 г. обнаружил в культуре кишечной палочки антибиотическое вещество, подавляющее рост других гомологичных штаммов. Это вещество осаждается ацетоном и разрушается трипсином (протеиновой природы). Подобные вещества выявлены у многих штаммов эшерихии, дизентерийных и других бактерий и названы колицинами. Эшерихии продуцируют до 24 типов колицинов. Специфичность действия колицинов объясняют наличием на поверхности клеток рецепторов, на которых они могут адсорбироваться.
Токсигенность. Кишечная палочка обладает термостабильным эндотоксином энтеротропного действия. Он вызывает лихорадочную реакцию, сменяющуюся гипотермией, диарею, геморрагии в желудочно-кишечном канале, лейкопению с последующим лейкоцитозом.
В свежевыделенных культурах обнаруживают термолабильный и термостабильный экзоэнтеротоксины. Имеются серотипы, продуцирующие довольно сильный гемолизин (гемолитические штаммы кишечной палочки).
У патогенных эшерихий имеется определенная связь колициногенности и антигенной структуры. В ряде стран колициногенность используется в диагностической практике для типирования эшерихий.
Антигенная структура. Эшерихии имеют О-, К-, Н-антигены. О-антиген (соматический) термостабильный, не разрушается при температуре 120° С (выдерживает кипячение и автоклавирование). К-антиген поверхностный, соматический, представляет собой комплекс термолабильных антигенов (L, В) и термостабильных антигенов (А и М), Н-антиген (жгутиковый) термолабильный. Эшерихии подразделяют по характеру О-антигена на 163 серогруппы (серовары), К-антигена – на 94 и Н-антигена – на 56. На основании антигенной структуры каждая серогруппа обозначается формулой с указанием антигена и его разновидности, выражаемой арабской цифрой.
Под влиянием фаговой конверсии и генетических рекомбинаций Е. coli изменяет свои антигенные свойства.
Среди Е. coli выявлены фаготипы и колициновары, которые используются в лабораторной диагностике для дополнительной характеристики выделенных штаммов.
Иммунитет. Переболевший колибактериозом молодняк приобретает иммунитет к последующему заражению. В связи с иммунологической ареактивностью новорожденных животных, целесообразна вакцинация глубокостельных коров и супоросных свиноматок. В этих случаях телята и поросята получают с молозивом большое количество специфических антител. Многие штаммы Е. coli синтезируют антибиотические вещества – колицины, активные в отношении патогенных микробов кишечной группы. Кроме того, Е. coli и другие нормальные обитатели кишечника синтезируют витамины К2, Е и группы В. Угнетение нормальной микрофлоры кишечника, значительную часть которой составляет Е. coli, может привести к тяжелому хроническому заболеванию – дисбактериозу.
Патогенез. Основным путем инфицирования телят считают алиментарный. Возможно заражение через носоглотку и внутриутробно.
Различают две основные формы колибактериоза – энтеротоксемическую (встречается более часто) и септицемическую. При энтеротоксемической форме эшерихии размножаются в тонком кишечнике и часто в сычуге, где накапливаются экзоэнтеротоксины и огромная биомасса бактерий, в результате отмирания которых высвобождаются эндотоксины, вызывающие местный воспалительный процесс. Кроме того, эндотоксины проникают в лимфатическую систему, вследствие чего наступает тяжелая токсемия и телята погибают в ближайшие сутки. При септицемии эшерихии проникают через стенку кишечника сначала в брыжеечные лимфатические узлы, затем в общий лимфоток, что сопровождается энтеритом и сепсисом. Кишечные формы колибактериоза вызывают преимущественно эшерихии, продуцирующие термолабильный и термостабильный экзотоксины.
По мнению многих авторов, в патогенезе колибактериоза большую роль играют возрастные анатомо-физиологические особенности: низкая кислотность желудочного сока, повышенная проницаемость эпителия кишечника, слабая барьерная функция лимфатических узлов и печени, отсутствие (или низкое содержание) в крови гамма-глобулинов. Важным фактором тяжелого течения колибактериоза в период массовых отелов является высокая вирулентность эшерихии в результате пассирования на телятах. Течение колибактериоза нередко осложняется вульгарным протеем (Preteus vulgaris) и другими представителями кишечных бактерий. Штаммы протея устойчивы или быстро приобретают устойчивость к антибиотикам, обладают большой энергией размножения. В случаях смешанной инфекции течение еще более усугубляется. Возникновению болезни способствует запоздалая дача молозива.
Клинические признаки. Инкубационный период – от нескольких часов до 1–2 сут. Тяжесть болезни зависит от физиологического состояния животных и вирулентности возбудителя.
Признаки болезни нарастают быстро. Заболевшие животные вялы, малоподвижны, много лежат, отказываются от молока (молозива). Температура тела кратковременно повышается на 1–1,5 °С, пульс и дыхание учащены, носовое зеркальце сухое, конъюнктива покрасневшая, учащена дефекация. Затем у большинства больных возникает понос, испражнения водянистые, бело-серого цвета, с пузырьками газа, неприятного запаха, нередко с примесью крови и сгустков непереваренного молока. Жидкими каловыми массами выпачкана задняя часть тела животного, к концу болезни выделение кала может быть непроизвольным. Пальпация брюшной стенки вызывает болезненность, при аускультации слышны усиленные перистальтические шумы.
Обычно с появлением поноса температура тела снижается до нормы, а перед смертью может быть и ниже нормы, пульс слабый, дыхание поверхностное. Из-за частой дефекации может развиться обезвоживание организма – хорошо заметны очертания суставов, глаза впадают в орбиты, кожа сухая. В случае быстрого развития болезни и гибели животного признаки обезвоживания могут быть не выражены. С развитием болезни аппетит полностью пропадает, депрессия усиливается, в результате чего наступает коматозное состояние и животное погибает. Характерно возникновение у части животных рецидивов болезни: через 2–3 дня после улучшения состояния клинические признаки появляются вновь, и течение болезни бывает более тяжелым.
При сверхостром течении колибактериоза симптомы энтерита могут отсутствовать. Быстро нарастают признаки сепсиса. Летальность при колибактериозе может быть очень высокой – даже до 100 %, если не применяют эффективные лечебные средства.
Патологоанатомические изменения. В типичных случаях (септический колибактериоз) трупы истощены, хвост, бедра, кожа вокруг анального отверстия выпачканы жидкими каловыми массами, слизистые оболочки бледные. При вскрытии трупов основные изменения находят в желудочно-кишечном тракте: слизистая оболочка желудка (сычуга) воспалена, с геморрагиями, слизистая тонкого, а иногда и толстого отдела кишечника гиперемирована, утолщена, покрыта слизью, усеяна кровоизлияниями, содержимое сычуга – сгустки или комки створоженного молозива. Часто находят кровоизлияния под эпикардом и на эндокарде, брюшине, геморрагическое воспаление мочевого пузыря, а иногда – кровоизлияния под капсулой селезенки, печени ипочек. Печень перерождена (жировая или зернистая дистрофия). Лимфатические узлы брыжейки увеличены, покрасневшие.
Изменения селезенки неодинаковы и зависят от продолжительности болезни. В одних случаях селезенка не изменена, в других – незначительно увеличена и полнокровна. Сердечная мышца дряблая. Сосуды головного мозга сильно инъецированы.
Диагностика. Диагноз ставят на основании эпизоотологических, клинических и патологоанатомических данных с обязательным учетом результатов лабораторного исследования.
В лабораторию целесообразно направлять 2–3 свежих трупа животных, не подвергавшихся лечению антибиотиками или другими антимикробными препаратами. Если нет возможности доставить в лабораторию труп, можно направлять сердце, сосуды которого перевязаны лигатурой, трубчатую кость, кусочек печени с желчным пузырем, селезенку, головной мозг, отрезок тонкого отдела кишечника, перевязанный с двух концов лигатурой, брыжеечные лимфоузлы, почку. Для прижизненной диагностики колибактериоза в лабораторию доставляют фекалии либо используют метод гемокультур – высев на среды стерильно взятой крови из яремной вены. Патматериал направляют свежим или консервируют 30 %-ным водным раствором глицерина, 30 %-ным раствором хлористого натрия.
Посев исследуемого материала производят на плотные питательные среды (Эндо и др.); параллельно делают посевы для выделения тифозно-паратифозной и дизентерийной групп бактерий на среды Плоскирева и висмут-сульфитагар. При подозрении на септический процесс сеют кровь для обогащения в бульон, а затем высевают на плотную среду. Выделенные чистые культуры идентифицируют по морфологическим, культуральным, биохимическим, серологическим и биологическим свойствам.
Принадлежность выделенных эшерихий к соответствующим О-группам устанавливают в реакции агглютинации после разрушения кипячением К-антигена исследуемой культуры. Реакция агглютинации ставится с К- и О-сыворотками.
Для ускоренной идентификации выделенных культур или исследуемого материала применяют метод иммунофлюоресценции с использованием группоспецифических меченых сывороток. Он позволяет получить предварительный ответ через 1–2 ч.
Для серологической диагностики колиэнтеритов применяют реакции непрямой гемагглютинации. Положительным ответом считают нарастание титра антител в динамике заболевания.
Из средств специфической профилактики предложены антитоксическая сыворотка против колибактериоза и сальмонеллеза, моновалентная колисыворотка и бактериофаг и поливалентная гидроокисьалюминиевая формолтиомерсаловая вакцина против колибактериоза.
Патогенные сальмонеллы
под собирательным названием «сальмонеллез» объединяют болезни, которые первично вызываются бактериями из рода Salmonella и обычно протекают с явлениями септицимии или с подострым, иногда хроническим течением и воспалением желудочно-кишечного тракта, поражением печени, органов дыхания, суставов или абортами у самок.
Сальмонеллез – заболевание сельскохозяйственных животных всех видов, птиц, пушных зверей и дикой фауны. У молодняка от 10 дней до 4 месяцев протекает остро, в септической форме, сопровождаясь подъемом температуры тела, энтеритом, бронхопневмонией, артритами и параличами. У взрослых отмечается бактерионосительство, аборты, периодами обострение.
У человека токсикоинфекции вызывают сальмонеллы, адаптированные к организму животных и птиц.
С восьмидесятых годов XIX века различные болезни животных, относящиеся к сальмонеллезам, описывались под разными названиями. В 1885 г. Сальмон выделил в чистой культуре первого возбудителя сальмонеллеза S. cholerae (прежнее название S. suipestifer), которого долгое время считали возбудителем чумы свиней. Шотмюллер назвал в 1890 г. паратифом заболевание людей, возбудителями которых являются S. paratiphy А и В, так как симптомы болезни сходны с брюшным тифом. Впоследствии массовые болезни животных, вызываемые сходными с S. paratiphy бактериями, также назвали паратифами. Однако это название устарело и заменено. Пфейфер, Мюллер и Биттер установили, что S. paratiphy А и В патогенны только для человека, в то время как виды и разновидности, выделяемые от животных и птиц вызывают токсикоинфекции у человека.
Сальмонеллы в последнем издании Краткого определителя бактерий Берги отнесены к семейству Enterobaсteriaceae трибу Escherichiaeе роду Salmonella. семейство Enterobaсteriaceae включает 12 родов:Escherichia, Edwardsiella, Citrobarter, Salmonella, Shigella, Klebsiella, Enterobacter, Hafnia, Serratia, Proteus, Erwinia, Jersinia. Род сальмонелл включает 65 групп (более 2000 сероваров). Международным номенклатурным комитетом род сальмонелл разделен на 4 подрода (см. табл. 9):
1. S. kauffmanni. Включает большую часть патогенных для человека сальмонелл, серологических групп А, В, С, Д, Е.
Таблица 9. Биохимическая дифференциация сальмонеллез.
|
Тест | подроды | ||||
| I | II | III | IV | citrobacter | |
| Дульцит Лактоза Салицин Желатин Малонат натрия Лизин ɣ-галоктозиодоза | + - - - + + - | + - - + -или х + + | - + или х (+) -или х + + + | - - + + -или х + - | Р Р Р - -или х - + |
Условные обозначения: + -положительная; – -отрицательная; Р – разная; (+)- поздняя, но всегда положительная; х – поздняя, но не постоянно положительная.
2. S. salamae отличается от первого подрода способностью разжижать желатин и ферментировать малонит натрия.
3. S. arizonae. Ферментирует лактозу, обнаруживается у птиц, рептилий, млекопитающих; в последние годы обнаруживается у человека при лихорадочных состояниях с явлениями диареи и гастроэнтерита.
4. S. houtenau. Отнесены атипичные в биохимическом отношении сальмонеллы.
Общие культурно-биохимические признаки представителей рода сальмонелл (за малым исключением) позволяют отличить их от других групп семейства энтеробактерий и сходных с ними групп (Edwardsiella и Citrobacter).
Для биохимической идентификации Citrobacter и четырех подродов сальмонелл в практике используют 5 тестов: наличие желатиназы, утилизация лизиата, лактозы, глицерина и декарбоксилирование лизина.
Кауфман подразделил род сальмонелл на четыре подрода в соответствии с их антигенной структурой (см. табл. 10).
Таблица 10. Антигенная структура сальмонелл.
|
Группа и вид (серовар) | Антигенная структура | ||
| Соматический антиген | Жгутиковый антиген | ||
| Специфическая фаза | Неспецифическая фаза | ||
| Группа А S. paratyphi A Группа В S. typhimurium S. abortus-equi S. abortus-ovis S.paratyphi B S. abortus-bovis Группа С S. cholerae-suis S. typhi-suis Группа Д S. enteritidis S. dublin S. rastoc S. gallinarum S. pullorum | 1, 2, 12 1, 4, 5, 12 4, 12 4, 12 1, 4, 5, 12 1, 4, 12, 27 6, 7 6, 7 1, 9, 12 1, 9, 12 9, 12 1, 9, 12 1, 9, 12 | а - с в в с с д,т д,р д,р,и, - | - 1, 2 е, п, х 1, 6 1, 2 е, п, х 1, 5 1, 5 - - - - - |
Биологические свойства. Бактерии семейства сальмонелл имеют следующие общие свойства: грамотрицательны, не образуют спор, лишены оксидазы, восстанавливают нитраты в нитриты, ферментируют глюкозу, хорошо растут на обычных средах, факультативные анаэробы.
Морфология. Это мелкие с закрученными концами палочки длиной 1–3, диаметром 0,5–0,8 мкм, как правило, подвижные, кроме S. gallinarum и S. pullorum. Неподвижные мутанты встречаются среди других видов. Капсул не образуют. Колонии 2–4 мм в диаметре. На МПА – прозрачные, нежные, голубоватые, на среде Эндо – розовые, прозрачные, на среде Плоскирева – бесцветные, на среде Левина – прозрачные с фиолетовым оттенком, на висмут-сульфитагаре – черные с металлическим блеском, под колонией среда чернеет.
Ферментативные свойства разнообразны не только у одного подрода, они могут варьировать в пределах одного и того же серовара. Сальмонеллы образуют сероводород и не образуют индола, не ферментируют лактозу и салицин, утилизируют цитрат, ферментируют глюкозу и маниит. В новейших научных исследованиях сальмонеллы дифференцируют по 26 биохимическим тестам.
Патогенность. Биологической особенностью семейства энтеробактерий является то, что они относятся к условно патогенным микроорганизмам. Для выбора стратегии борьбы с болезнями, которые они вызывают, важно понимать факт длительного бактерионосительства животных как до появления симптомов заболевания, так и после клинического выздоровления. Поэтому сальмонеллезы следует отнести к полиэтиологическим инфекциям. Например, в случае бактерионосительства свиноматки поросята получают определенную дозу возбудителя. Но, благодаря достаточному уровню иммунной защиты, заболевание не проявляется, а имеет лишь место сальмонеллоносительства, которое можно обнаружить серологическим исследованием сыворотки крови и бактериологическим исследованием фекалий или других экскретов.
При воздействии стресс-факторов (перегруппировка, нерациональное кормление, отсутствие выпасов, гельминтозы, прививки, охлаждение, перегрев и др.) развивается инфекционный процесс, завершающийся гибелью животного, переходом болезни в хроническую форму или выздоровлением. Последние два исхода могут сопровождаться многомесячным или пожизненным сальмонеллоносительством. Одной из причин рецидивов можно считать обнаруженный недавно факт незавершенного фагоцитоза сальмонелл макрофагами костного мозга. Такое животное представляет опасность для здорового поголовья, особенно молодняка. Из окружающей среды сальмонеллы чаще проникают в восприимчивый организм алиментарно. Если в инкубационный период сальмонеллы локализуются в фолликулах кишечника, желчном пузыре, костном мозге, то при стрессах развивается септическая форма.
Устойчивость.Длительно сохраняются и обладают высокой устойчивостью эндотоксины сальмонелл. Их токсическое действие не ослабевает в толще мяса при варке больших кусков. При температуре +65–70°С сальмонеллы выживают длительное время, не погибают в 8–10 % растворе уксусной кислоты в течении 18 часов. В почве, навозе, помете сальмонеллы сохраняются несколько лет и могут размножаться в отложениях из фекалий в стойлах для свиней, в жидких кормах, воде, в почвах, удобренных навозом. Они размножаются во всех пищевых продуктах при достаточной влажности и температуре (+7–45°С), рН от 4,1 до 9,0. Используемые для дезинфекции 3 %-й раствор гидроокиси натрия, хлорная известь, содержащая 2 %-й активный хлор, 20 %-ая взвесь свежегашеной извести, 2 %-й раствор формальдегида надежно обеззараживают помещения при экспозиции 1–1,5 ч. Обеззараживание инфицированной сальмонеллами почвы загонов и пастбищ проводят по методу, разработанному С.М. Губкиным (1953).
Токсигенность. Сальмоннеллы обладают эндо- и экзотоксинами. Эндотоксины вызывают геморрагическое воспаление кишечника и являются причиной диареи и других признаков. Экзотоксины относятся к группе нейротоксинов. Действие токсинов сопровождается диспепсией, энтероколитами, поражением центральной нервной системы при этом повышается температура тела, появляется одышка, нарушается координация движений, ослабевают рефлексы. В случаях нарастания интоксикации у животного появляются судороги.
Антигенная структура сальмонелл сложна. Они имеют несколько антигенов: О, Н, Vi, М и К. О – антиген термостабильный (выдерживает кипячение в течении 2, 5 часов), угнетается формалином, располагается на поверхности клетки и состоит из фосфолипидополисахаридных комплексов. Специфичность О – антигена в серологических реакциях обусловлена присутствием в нем определенных полиозидов, то есть сахаров дидезоксигексоз, располагающихся на концах полисахаридных цепочек. Серологические варианты сальмонелл по О- антигену обозначают арабскими цифрами.
Одним из компонентов соматического антигена является Vi-антиген, принадлежащий к К-антигенам. После открытия Vi-антигена (Феликс и Ритт, 1934) его назвали антигеном вирулентности. Но он не служит, как теперь доказано, прямым носителем вирулентности. Его присутствие на поверхности микробной клетки препятствует агглютинабельности бактерий в О-сыворотке, что затрудняет дифференциацию сальмонелл. Vi-антиген полимер, термолабилен.
Vi-антиген является лабильным веществом, он исчезает при выращивании микробов в питательных средах при добавлении к ним фенола, а так же при низкой (+20 оС) или высокой (+40 оС) температурах, полностью разрушается при кипячении и под действием фенола, частично изменяется от воздействия формалина и температуры +60 оС в течении 30 минут.
Жгутиковый Н-антиген неоднороден; он состоит из двух фаз: первой, или специфической фазы, агглютинирующейся специфической видовой сывороткой, и второй, или неспецифической фазы, агглютинирующейся не только видовой, но и групповой сывороткой. Сальмонеллезы, имеющие две фазы Н- антигена, называют двухфазными в отличии от монофазных, имеющих только специфический Н-антиген. Н-антиген термолабилен, устойчив к формалину, чувствителен к кислотам и алкоголю, по природе протеин.
Антигенная структура сальмонелл подвержена изменчивости. Их антигенные комплексы подвержены внезапным вариациям при переходе из S- в R-форму, а также в результате трансдукции, лизогенной конверсии и конъюгации.
Различают несколько видов диссоциации сальмонелл:
1) Н-О-вариации, т. е. переход от жгутиковой к безжгутиковой форме;
2) R; S-вариации, т. е. переход от гладкой к шероховатой форме. В изотоническом растворе хлористого натрия R- формы дают нестойкий агглютинат, а S-формы остаются во взвешенном состоянии.
3) V-W-вариации касаются только Vi-антигена. V-форма содержит Vi-антиген и является О-неагллютинабельной. W-форма не содержит Vi-антигена и считается О-агглютинабельной. Встречаются промежуточные формы.
В практике серологической дифференциации сальмонелл, несмотря на их вариабельность антигенной структуры, во внимание принимается лишь три основных антигена (О, Н, Vi).
Характеризуя свойства сальмонелл, нельзя не остановиться на их так называемой генетической пластичности, на связи последней у этих микроорганизмов с множественностью их сероваров, а на вопросе о том, в какой мере эта генетическая пластичность может отразиться на возможности точной их идентификации.
Сальмонеллы в последние годы часто избирались в качестве моделей для генетических исследований. Мы уже упоминали о естественной вариации антигенных структур бактерий. Известны так же вариации, возникшие под влиянием бактериофагов и других факторов. Выше было названо три механизма генетической рекомбинации, встречающихся у сальмонелл. Явление трансдукции у сальмонелл описано в 1952 г. Циндером и Леденбергом. При этом умеренный бактериофаг РТ22, воздействуя на различные серовары, мог осуществлять трансдукцию Н-антигена и других свойств. На основании этого авторы не исключают возможности такого рода изменений микроорганизма в естественных условиях.
При лизогенной конверсии гены бактериофага передают функцию как часть бактериальной клетки. Состояние лизогенности, вызванное конвертирующим фагом, ведет к изменению в О-антигенах. При этом вновь приобретенный О-антиген сохраняется до тех пор, пока микроб остается лизогенным.
С помощью конъюгации возникают гибриды с новыми антигенными свойствами. При конъюгации возможна передача плазмид и появление фактора резистентности (R-фактора) или нового свойства. Проблемой современности является широкое распространение полирезистентных к лекарственным веществам форм сальмонелл.
Из выше изложенного понятны проблемы и сложности идентификации сальмонелл, необходимость систематического определения сероваров выделенных культур, изучения их антибиотикорезистентности и ее преодоления.
Для серологической типизации выделяемых штаммов сальмонелл используют рецепторный анализ с применением специфических агглютинирующих сальмонеллезных сывороток как групповых, так и видовых.
Иммунитет носит антиинфекционный и антитоксический характер. Как правило, вначале возникает нестерильный иммунитет, который в дальнейшем может стать стерильным. Иммунитет часто возникает в результате скрытого переболевания. Такой иммунитет называют депрессионным. В создании иммунитета существенное значение имеет первая доза антигена. Чрезмерная доза вызывает угнетение иммунных сил организма, особенно у молодняка.
Малые дозы обычно нейтрализуются организмом и, следовательно, не вызывают выработки иммунитета. Оптимальной иммунизирующей дозой некоторые авторы считают 2 мл микробных тел. Для формирования стойкого иммунитета необходима определенная степень и продолжительность антигенного воздействия (персистенция живых бактерий в тканях). В связи с этим прививки в ранний постнатальный период не дают желаемого эффекта, как и сочетание иммунизации с применением антибиотикотерапии. Ведущим антигеном в иммуногенезе считается О-антиген. На первых стадиях формирования иммунитета образуются I2 M и I2 G. Под влиянием живых вакцин, начиная со 2-й недели, происходит образование антител и усиление фагоцитарной реакции, которые к 5–6-й неделе достигают своего максимума.
Патогенез. Длительность инкубационного периода зависит от метода инфицирования, дозы и вирулентности возбудителя и иммунного состояния организма. В естественных условиях продолжительность инкубационного периода у молодняка разных видов животных от 2–5 до 10–25 дней. При алиментарном пути заражения возбудитель быстро проникает в лимфатический аппарат кишечной стенки, а оттуда – в лимфо- и кровообращение. Пейеровы бляшки и солитарные фолликулы увеличиваются, отчетливо выступая под слизистой, образуя возвышения.
Б.И. Притулин (1963) в развитии патологического процесса при сальмонеллезе различает несколько фаз: адаптации микроорганизмов, регионарной инфекции, токсемии, гематогенной диссеминации (бактериемии), септицемии. А.И. Аверихин (1955) в опытах на свиньях установил, что при данной болезни патологические изменения развиваются под действием сальмонеллезного токсина. Сальмонеллы, проникающие в организм, попадают у птиц в яичники, из них проникают в яйца. При инкубировании таких яиц эмбрионы поражены сальмонеллезом и чаще всего погибают. В процессе длительного паразитирования в организме одного вида млекопитающих или птиц отдельные виды сальмонелл адаптированы в основном к этому виду. Основные варианты миграции патогенных видов сальмонелл среди млекопитающих и птиц представлены в табл. 11.
Диагностика. Диагноз устанавливают комплексно: на основании учета эпизоотологических данных, клинических признаков, патологоанатомических изменений, результатов прижизненных и посмертных бактериологических исследований и анализа серологических и аллергических исследований.
Таблица 11. Видовая специфичность сальмонелл.
| Восприимчивый вид | Salmonella | ||||||||
| dublin | choleraesuis | typhisuis | аbortus ovis | аbortus equi | gallinarum | typhimurium | enteritidis | paratyphi A | |
| Крупный рогатый скот | + | + + | + + | ||||||
| Свиньи | + | + + | + | + | |||||
| Овцы | + | + | |||||||
| Лошади | + + | + + | |||||||
| Птица | + + | + + | + + | ||||||
| Пушные звери | + + | + + | + + | ||||||
| Человек | + + | + + | + + | + | + | + | + | + | + + |
| У человека протекает как токсикоинфекция | |||||||||
Особое внимание следует уделять методам прижизненной диагностики, которые дают возможность быстро распознавать болезнь. Прижизненный диагноз можно установить выделением гемокультуры, бактериологическим исследованием фекалий, серологическим исследованием сыворотки крови и аллергической пробой.
Лабораторные методы. Выделение гемокультуры производят засевом 1–2 мл крови в пробирку с 20 %-м желчным бульоном в соотношении I:I–I:3 и выдерживанием 12–24 ч. в термостате (+37 °С). выросшие культуры высевают в чашки Петри на элективные среды Эндо, Левина и МПА. Выделенную культуру идентифицируют реакцией агглютинации. Рекомендуется за 15 мин. до взятия проб крови ввести животному подкожно 1 мл адреналина в разведении I:I000. следует учитывать факт бактериемии лишь в острый период заболевания (от 1 до 10 суток).
Бактериологическое исследование фекалий имеет важное диагностическое значение. Наиболее эффективной средой накопления является среда Кауфмана. Со сред накопления делают высевы на среду Эндо, Левина, Плоскирева. Использование бактагара Плоскирева позволяет выделить сальмонеллы без накопления. Серологическое исследование проводят с помощью реакции агглютинации, реакции непрямой гемагглютинации и реакции связывания комплемента. Агглютинины появляются у некоторых больных телят спустя 7–9 дней от начала заболевания. Через два месяца у 2/3 заболевших телят титры реакции агглютинации положительны. Чаще агглютинины обнаруживают после исчезновения острых симптомов болезни. Для диагностики пуллороза-тифа взрослых птиц используют кровокапельный метод РА с цветным антигеном. для серологической диагностики сальмонеллеза овец рекомендуют использовать реакцию непрямой гемагглютинации. В лунках полистироловых пластинок готовят разведения сыворотки крови, добавляют эритроцитарный диагностикум и через 2–2,5 ч. учитывать реакцию.
Посмертная диагностика предполагает квалифицированный отбор патологического материала, его консервацию и разнообразие методов идентификации выделенного возбудителя.
От трупа в лабораторию необходимо направить почки, печень с желчным пузырем, селезенку, легкое, лимфатические узлы и трубчатую кость. В летнее время материал консервируют 10–15 %-м раствором поваренной соли. Для высева чистой культуры используют элективные среды. Из подозрительных колоний готовят мазок, окрашивают по Граму, ставят реакцию агглютинации на предметном стекле с сывороткой. Затем проводят биохимическую типизацию на коротком ряду питательных сред. Для рецепторного анализа используют О- и Н-сыворотки. Идентификацию чистой культуры проводят также с помощью строго специфических бактериофагов.
Ряд исследователей использовали для экспресс-диагностики метод флюоресцирующих антител, фаготипирование и ИФА.
Сальмонеллез необходимо дифференцировать у телят от колибактериоза, диплококковой инфекции, аденовирусного энтерита, парагриппа; у поросят от чумы, колибактериоза, кокцидиоза; у птиц от колибактериоза, пастереллеза, аспергиллеза и кокцидиоза.
Использование вакцин для профилактики сальмонеллеза сопряжено с рядом проблем. В 1931 и 1932 гг. были получены первые формолвакцины. В 1981 г. к применению рекомендована первая аттенуированная живая вакцина. За рубежом испытаны живые вакцины для перорального применения (10 дней подряд с молоком по 5×1010 1×1011 микробных тел). Анализируя обширные сведения специальной литературы, можно утверждать о перспективности перорального применения живых вакцин. Проблемой остается дешевое их производство.
В нашей стране используют ассоциированную вакцину против сальмонеллеза, пастереллеза и диплококковой инфекции телят, формолвакцины и сухие живые вакцины для парентерального применения. Комбинированное применение гипериммунной сыворотки и вакцины не создает иммунитета достаточного напряжения. Вакцинацию животных можно проводить не ранее, чем через 15 дней после применения сыворотки. Титр антител снижает применение антибиотиков в период формирования иммунитета при вакцинации.
Сальмонеллезные токсикоинфекции человека и их профилактика. Пищевые токсикоинфекции нередко возникают при попадании в пищу различных микроорганизмов (сальмонелл, эшерихий, протея, энтерококков, клостридий, возбудителя ботулизма и др.). Наибольшее распространение и опасность представляют сальмонеллезные токсикоинфекции.
Еще в 1876 г. Болингер обратил внимание на связь между септическими заболеваниями животных и болезнями людей после употребления в пищу мяса больных животных. Бактериальную природу сальмонеллезных токсикоинфекций впервые обосновал Гернер в 1888 г. во время вспышки энтеритов во Франкенхаузене, охватившей 58 человек. Он выделил из мышц вынужденно убитой коровы и из селезенки умершего от энтерита человека (употреблявшего мясо в сыром виде) идентичные бактерии. В настоящее время накоплено достаточно большое количество наблюдений, указывающих на то, что все представители ряда сальмонелл потенциально патогенны для человека. Установлено, что все виды сальмонелл, вызывающие заболевания у сельскохозяйственных животных и птиц, способны персистировать в организме человека и вызывать токсикоинфекции. Чаще всего это полирезистентные к антибиотикам штаммы сальмонелл. Они вызывают тяжелые заболевания у детей первых месяцев жизни, возникают как внутрибольничные инфекции. У детей старшего возраста преобладают субклинические формы болезни. При употреблении в пищу молока и молочных продуктов, мяса, яиц, от животных и птиц сальмонеллоносителей, животных больных сальмонеллезом, бактерии заселяют желудочно-кишечный тракт, проникают в лимфатическую систему и кровь. В организме сальмонеллы гибнут, разрушаются, и образуется эндотоксин. Из переболевших около 2–3 % остаются носителями сальмонелл.
Кроме того, поддержанию и распространению инфекций способствуют многие млекопитающие (включая крыс и мышей), а также дикие птицы, рептилии, насекомые. Человек может заразиться также от домашних животных (собак, кошек, черепах, голубей и др.).
В большинстве развитых стран мира бессимптомному носительству сальмонелл у животных, которое приобретает все более важное значение в инфекционной патологии человека, уделяют самое серьезное внимание.
Эпидемиологическая обстановка по сальмонеллезам в нашей стране продолжает оставаться напряженной. Анализ вспышек показал, что случаи выделения сальмонелл от домашней птицы, в том числе кур, участились. При этом инфицированность кур определял не хозяин – адаптированные серовары сальмонелл, а S. enteritidis и др. указанные серовары клинических признаков болезни и падежа птицы не вызывают, что затрудняет оценку благополучия хозяйств по этой инфекции.
Подтверждена важная роль кормов в эпизоотологии сальмонеллеза животных. Обследования ряда комбикормовых заводов и утильцехов мясоперерабатывающих предприятий, заводов по производству мясокостной муки показало, что на этих предприятиях не проводят должным образом проверку сырья, нарушают технологию производства и условия хранения готовой продукции, не ведут постоянной борьбы с дикими птицами и грызунами. В результате этих нарушений зарегистрированы случаи обсеменения кормов сальмонеллами, которые были фактором передачи возбудителя.
В нашей стране следует повсеместно вводить в практику требования международного гигиенического кода по переработке птицы. Этот документ предусматривает, в частности, полное потрошение птицы, немедленное ее охлаждение до 4 °С и индивидуальную упаковку. Тушки, не предназначенные к быстрой реализации, следует замораживать не позже 72 ч. после охлаждения.
В нашей стране внедрены эффективные вакцины для профилактики сальмонелле за телят, вызываемого S. dublin, а также совместно с S.typhimurium для профилактики сальмонеллезов свиней, вызываемых S.cholerae-suis, для профилактики сальмонеллеза водоплавающей птицы (уток, гусей), вызываемого S.typhimurium. Все указанные серовары сальмонелл, вызывающие болезнь у животных, патогенны и для человека.
Следует также отметить, что выращивание животных, не инфицированных сальмонеллами, требует больших затрат, поскольку животное может быть инфицировано сальмонеллами из различных источников, включая корма и окружающую среду (пыль, подстилка, вода, навоз, птицы, грызуны, мухи, обслуживающий персонал). Поэтому подобных животных необходимо выращивать в соответственно сконструированных, недоступных для грызунов помещениях с надежной вентиляцией и фильтрацией воздуха, устройствами, обеззараживающими воду, чистой подстилкой; в них следует поддерживать высокий уровень ветеринарной санитарии и гигиены, иметь хорошо обученный персонал.
Особое место в этой системе занимает обеззараживание кормов. Наукой предложены надежные методы деконтаминации кормов от сальмонелл. В частности, в нашей стране известен способ обеззараживания кормов путем их грануляции при подаче в смесительную камеру острого пара под давлением не менее 3 атм, а также на установках УФ-облучения путем обработки органическими кислотами (муравьиной, уксусной, пропионовой) от 0,12 до 0,7 % в течение суток.
Последним и неотъемлемым направлением в профилактике в борьбе с сальмонеллезами человека являются значительное усиление санитарного контроля на объектах общественного питания, торговли и хранения пищевых продуктов, строжайшее соблюдение санитарных норм и правил, технологических режимов, особенно при термической обработке продуктов животного происхождения в условиях массового производства, а также широкая пропаганда и обучение правилам личной гигиены и профилактики пищевых отравлений, включая сальмонеллезы.
Патогенные клебсиеллы
В семейство Enterobacteriaceae, род Klebsiella входят бактерии, обладающие способностью образовывать капсулы, как в организме, так и на питательных средах. Название дано в честь немецкого бактериолога Э. Клебса.
Морфология. Клебсиеллы представляют собой толстые короткие палочки длиной 0,6–6 мкм и шириной 0,3–1,5 мкм, с закругленными концами, неподвижные, не образующие спор, располагающиеся чаще одиночно, попарно или короткими цепочками, обычно окруженные капсулой. Kl. pneumoniae и К1. ozaenae имеют пили (фимбрии). Содержание Г+Ц в ДНК нуклеоида 52–56 %.
Таблица 12. Дифференциация клебсиелл.
| Название бактерий | Ферментация | |||
| глюкозы | лактозы | дульцита | мочевины | |
| Kl. pneumoniae Kl. ozaenae Kl. rhinosсleromatis | КГ Кг ± - | К К - | К - - | + ± - |
Условные обозначения: К – кислота; КГ – кислота и газ; + ферментация мочевины; – отсутствие ферментации; ± отрицательный или положительный результат наблюдается не всегда.
Культивирование. Клебсиеллы – факультативные анаэробы, хорошо растут на простых питательных средах с рН 7,2 при температуре 35–37 °С, крайние границы 12–41 °С. На агаре образуют мутные слизистые и различные по структуре колонии, в бульоне – интенсивное помутнение. Под влиянием низкой температуры, частых пересевов, фага, химических веществ, желчи, антисыворотки они диссоциируют с образованием S- и R-форм.
Ферментативные свойства. Клебсиеллы не разжижают желатин, не продуцируют индол и сероводород.
Патогенность. Из экспериментальных животных наиболее восприимчивы белые мыши, которые при явлениях септицемии погибают через 24–48 ч. после парентерального заражения.
На вскрытии отмечают резкое воспаление и увеличение селезенки и печени. В мазках из органов и крови обнаруживается обилие капсульных бактерий. Патогенность клебсиелл связана с наличием капсулы: бактерии, утратившие способность к капсулообразованию, становятся непатогенными и при введении в организм животного быстро подвергаются фагоцитозу.
Устойчивость. При комнатной температуре культуры клебсиелл сохраняются неделями и месяцами. От нагревания при 65 °С они погибают в течение 1 ч. Чувствительны к действию растворов хлорамина, фенола, цитраля и других дезинфицирующих веществ.
Токсинообразование. Клебсиеллы пневмонии вырабатывают термостабильный экзотоксин, у остальных видов токсичность связана с действием эндотоксина.
Антигенная структура. Вклебсиеллах содержатся три различных антигена: капсульный (К-антиген), соматический гладкий (О-антиген) и деградированный О-антиген (R-антиген). Клебсиеллы классифицируются по К- и О-антигенам. В популяциях клебсиелл, содержащих К- и О-антигены, имеются серовары.
Иммунитет. При заболеваниях, вызванных патогенными клебсиеллами, иммунитет малонапряженный. В крови больных озеной и риносклеромой, обнаруживают агглютинины и комплементсвязывающие антитела, защитная роль которых незначительна.
Клебсиеллы пневмонии. У большинства штаммов имеются пили (реснички). Хорошо растут на плотных средах с образованием мутных слизистых колоний; выявлено несколько биоваров и сероваров. При заражении у морских свинок и белых мышей возникает септицемия. Возбудители обнаруживаются в крови и тканях; наиболее вирулентными являются серовары 1,2,3.
Клебсиеллы пневмонии у человека могут вызывать воспаление легких. Пневмония (бронхопневмония) протекает с поражением одной или нескольких долей легкого, иногда возникают сливные очаги и абсцессы легких. Они нередко обнаруживаются в носоглотке и кишечном тракте здоровых людей. В некоторых случаях бактерии пневмонии вызывают менингит, аппендицит, у детей – септицемию, пиемию, мастоидит, цистит и другие заболевания; встречаются в качестве возбудителей воспалительных процессов мочеполовой системы и при смешанной инфекции.
Клебсиеллы озены. Являются возбудителем хронического заболевания респираторного тракта. Поражают глотку, трахею, гортань, вызывают атрофию придаточных полостей и носовых раковин, выделение вязкого секрета, подсыхающего с образованием плотных корок, затрудняющих дыхание и издающих зловонный запах.
Клебсиеллы риносклеромы. Вызывают хронический гранулематозный или атрофический процесс в слизистой оболочке носа, глотки, гортани, трахеи, бронхов с образованием инфильтратов, заканчивающийся рубцеванием. Клебсиеллы дифференцируют по росту на агаре и другим признакам.
Клебсиеллы риносклеромы можно обнаружить в инфекционных гранулемах в виде коротких капсульных микробов. Они локализуются внутри и вне клетки.
Риносклерома – малоконтагиозная и хроническая болезнь.
Диагностика. Микроскопическое исследование мазков из мокроты (при пневмонии), слизи из носа (при озене), гранулематозной ткани (при риносклероме). При патогистологическом исследовании инфильтратов от больных риносклеромой находят в большом количестве своеобразные гигантские клетки Микулича, в желатиноподобном веществе которых содержатся капсульные бактерии. Материал собирают петлей или ватным тампоном с предварительным скарифицированием поверхности слизистой оболочки.
Выделение чистой культуры и ее идентификация по культуральным, биохимическим, фаголизабельным и серологическим признакам (при бактериологическом исследовании испражнений, мочи, мокроты и других материалов).
Постановка реакции связывания комплемента с сыворотками больных и соматическим антигеном. Эта реакция наиболее часто дает положительные результаты в разведении сывороток больных от 1 : 5 до 1 : 400; используют также реакцию агглютинации с бескапсульным штаммом.
Применяют вакцинотерапию. Вакцину готовят из капсульных штаммов бактерий, убитых нагреванием.
Патогенные иерсинии
В род Yersinia включены три вида бактерий (Y. pestis, Y. pseudotuberculosis, Y. enterocolitica).
В 1894 г. французский микробиолог А. Иерсен в Гонконге открыл возбудителя чумы, которому дано современное название – Yersinia pestis.
Морфология. Иерсинии в мазках из тканей имеют овоидную (яйцевидную) форму, размер 1–3 × 0,5–0,8 мкм. Есть подвижные и неподвижные спорообразующие формы. Окрашивается всеми обычными анилиновыми красителями биполярно, более интенсивно по полюсам, грамотрицательна. Содержание Г+Ц в ДНК нуклеоида 45,8–46,8 %.
Бактерии характеризуются выраженным полиморфизмом. В мазках из органов и в молодых культурах они имеют форму овоида, в культурах на плотных средах становится удлиненной, иногда нитевидной. При добавлении к агару хлорида натрия образует различные причудливые формы (шаровидные, колбовидные, нитевидные, зернистые), которые обычно называют инволюционными. Выявлено наличие фильтрующихся форм.
На ультратонких срезах видны капсула, трехслойная клеточная стенка, трехслойная цитоплазматическая мембрана; цитоплазма заполнена рибосомами, включениями мелкогранулярного строения, нуклеоид занимает центральную часть клетки.
Культивирование. Факультативный анаэроб, хорошо растет на обычных питательных средах при температуре 28–30 °С и рН 7–7,2. Темп роста замедленный, поэтому в питательные среды добавляют различные стимуляторы (кровь, сульфат натрия и др.).
На пластинках агара возбудитель чумы растет в виде блестящих, серовато-белых, прозрачных суховатых колоний с выпуклым мелкозернистым центром и плоскими волнистыми краями, напоминающими кружева. Со временем центр колоний приобретает коричневый оттенок, становится более грубым и менее прозрачным. Колонии, выращенные при 37 °С, маслянистые, легко суспендируются, иногда тянутся за петлей. На скошенном агаре в пробирке образуют сероватый, вязкий, нежный, прозрачный налет. В бульоне отмечают агглютинативный рост с поверхностной нежной пленкой, при малейшем движении падающей на дно в виде сталактитов и образующей рыхлый осадок.
Ерсиния псевдотуберкулеза – факультативный анаэроб, хорошо растет на обычных (МПА и МПБ) «голодных» питательных средах при рН 6,0–8,0 (оптимум 7,2–7,4) и температуре 28–30 °С. При пониженных температурах (4–22 °С) бактерия приобретает жгутиковый аппарат и становится подвижной, чем и отличается от возбудителя чумы. Может обитать и размножаться в холодных водоемах. На пластинках агара формирует круглые, выпуклые, прозрачные, серовато-желтые, маслянистые колонии с ровными краями, приподнятым мутноватым центром и плоской периферией с радиальной исчерченностью (S-форма). Нередко дает шероховатые колонии, не отличающиеся от типичных колоний чумного микроба. S-форма более вирулентна. На скошенном агаре вырастает в виде массивного сплошного серовато-желтого прозрачного налета с блестящей волнистой поверхностью и извилистыми краями. В бульоне дает равномерное помутнение, со временем жидкость просветляется и выпадает вязкий осадок, иногда отмечают пристеночный рост.
Ферментативные свойства. Ферментирует до кислоты без газа глюкозу, галактозу, мальтозу, рамнозу, глицерин, маннит, не расщепляет лактозу, сахарозу, в первые сутки сбраживает мочевину, индол не образует, выделяет аммиак, иногда сероводород, восстанавливает нитраты в нитриты. Желатину не разжижает.
Токсигенность. Иерсинии образуют термолабильный экзотоксин в виде двух форм (А и В) и «мышиный» токсин, а также обладает способностью вызывать гемолиз эритроцитов и растворять фибрин. «Мышиный» токсин получен в очищенном состоянии в виде активного препарата, содержащего азот, фосфор, серу и углеводы. Его токсичность чрезвычайно велика: на 1 мг азота токсина приходится 86 000 смертельных мышиных доз. Континентальные штаммы продуцируют уреазу.
Дата добавления: 2019-09-13; просмотров: 758; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!