Список рекомендуемой литературы к разделу II
1. Абелев Г.И. Основы иммунитета // Соросовский Образовательный журнал, 1996, № 5.
2. Бенджамини Э., Койко Р., Саншайн Д. Иммунология. – М.: Академия, 2008. – 368с.
3. Кисленко В.Н. Ветеринарная микробиология и иммунология: учебник / Под редакцией проф. В.Н. Кисленко. – 4-е изд., перераб. и доп. / В.Н. Кисленко, Н.М. Колычев, Р.Г. Госманов. – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2012. – 760 с.
4. Кузьмин В.Д. Эпизоотология с микробиологией. – М.: Академия, 2005. – 429 с.
5. Основы учения об инфекции и противомикробном иммунитете / Под общ. ред. Колычева Н.М. – Омск: Изд-во ОмГАУ, 2012. – 279 с.
6. Петров Р.В. Иммунология. – М.: Медицина, 1987. – 414 с.
7. Руководство по микробиологии и иммунологии / Под ред. Н.М. Колычева и В.Н. Кисленко. – Новосибирск: Арта, 2010. – 256 с.
8. Хаитов Р.М. Иммунология. – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2009. – 320 с.
Раздел III. ЧАСТНАЯ МИКРОБИОЛОГИЯ
Глава 10. ОСНОВЫ ДИАГНОСТИКИ ИНФЕКЦИОННЫХ БОЛЕЗНЕЙ И МЕТОДОВ ИДЕНТИФИКАЦИИ МИКРООРГАНИЗМОВ
10.
10.1. Принципы и методы микробиологической
диагностики инфекционных заболеваний
По данным ВОЗ удельный вес инфекций (в том числе, бактериальных) в общей структуре смертности населения в современном мире составляет примерно 25 %. Важность своевременной диагностики инфекционных заболеваний является фундаментом правильного их лечения и, как следствие, к снижению уровня смертности.
Методы бактериологического исследования активно применяются для детального обследования больных, установления этиологического фактора инфекционного процесса, назначения рациональной терапии и определения ее эффективности. Разнообразие клинического материала и своеобразие микрофлоры отдельных органов определяют особенности методов бактериологического исследования, которые требуют применения специальных приемов отбора проб, посевов на питательные среды и проведения анализов.
|
|
|
Бактериологическое исследование клинического материала состоит из нескольких этапов: отбор проб на исследование, посев на питательные среды, выделение чистой культуры, идентификация и дифференциация выделенных культур микроорганизмов, анализ результатов исследования (рис. 50).
При отборе проб для исследований необходимо помнить, что образцы следует отбирать как можно раньше либо с учетом ритма циркуляции возбудителя; материал следует отбирать в объеме, достаточном для всего комплекса исследований; образцы следует доставлять в лабораторию незамедлительно, при относительно кратковременной транспортировке (не более 5 суток) образцы сохраняют на льду, при более длительной – при температуре минус 50 °С.
Рис. 50. Основные этапы бактериологического исследования образцов
|
|
|
Микробиологическая диагностика в первую очередь необходима для определения причины инфекционных заболеваний. Методы лабораторной диагностики микроорганизмов можно разделить на пять основных категорий: микроскопические, бактериологические, биологические, иммунологические (серологические, аллергические), молекулярно-генетические (рис. 51).
Рис. 51. Основные методы лабораторной диагностики бактериальных инфекций
Микроскопические методы. К основным способам микроскопии относят световую микроскопию (с разновидностями – иммерсионная, темнопольная, фазово-контрастная, люминесцентная и др.) и электронную микроскопию. К методам микроскопии можно также отнести авторадиографию (изотопный метод выявления). Микроскопические методы включают приготовление мазков и препаратов для микроскопирования. В большинстве случаев результаты микроскопических исследований носят ориентировочный характер (например, определяют отношение возбудителей к окраске), так как многие микроорганизмы лишены морфологических и тинкториальных особенностей. Тем не менее, микроскопией материала можно определить некоторые морфологические признаки возбудителей (наличие ядер, жгутиков, внутриклеточных включений и т. д.), а также установить факт наличия или отсутствия микроорганизмов в присланных образцах.
|
|
|
Микробиологические методы. Микробиологические методы – «золотой стандарт» микробиологической диагностики, так как результаты микробиологических исследований позволяют точно установить факт наличия возбудителя в исследуемом материале. Идентификацию чистых культур (до вида микроорганизма) проводят с учетом морфологических, тинкториальных, культуральных, биохимических, токсигенных и антигенных свойств микроорганизма. Большинство исследований включает определение чувствительности к антимикробным препаратам у выделенного возбудителя. Для эпидемиологической оценки роли микроорганизма проводят внутривидовую идентификацию определением фаговаров, биоваров, резистентваров и т. д.
Биологические методы. Биологические методы направлены на определение наличия токсинов возбудителя в исследуемом материале и на обнаружение возбудителя (особенно при незначительном исходном содержании в исследуемом образце). Методы включают заражение лабораторных животных исследуемым материалом с последующим выделением чистой культуры патогена, либо установлением факта присутствия микробного токсина и его природы. Моделирование экспериментальных инфекций у чувствительных животных – важный инструмент изучения патогенеза заболевания и характера взаимодействий внутри системы микроорганизм-макроорганизм. Для проведения биологических проб используют только здоровых животных определенных массы тела и возраста. Инфекционный материал вводят внутрь: в дыхательные пути, внутрибрюшинно, внутривенно, внутримышечно, внутрикожно и подкожно, в переднюю камеру глаза, через трепанационное отверстие черепа, субокципитально (в большую цистерну головного мозга). У животных прижизненно забирают кровь, экссудат из брюшины, после гибели – кровь, кусочки различных органов, экссудаты из различных полостей.
|
|
|
Иммунологические методы (серологические, аллергологические). Серологические методы выявления специфических антител (АТ) и антигенов (АГ) возбудителя – важный инструмент в диагностике инфекционных заболеваний. Особую ценность они имеют в тех случаях, когда выделить возбудитель не представляется возможности. При этом необходимо выявить повышение титров АТ, в связи с чем исследуют парные образцы сыворотки, взятые в интервале 10–20 суток (иногда этот интервал может быть более длительным). АТ обычно появляются в крови на 1–2-ю неделю заболевания и циркулируют в организме относительно долго, что позволяет использовать их выявление для ретроспективных эпидемиологических исследований. Определение классов Ig четко характеризует этапы инфекционного процесса, а также может служить косвенным прогностическим критерием. Особое значение имеют методы выявления микробных АГ. В значимых количествах они появляются уже на самых ранних сроках, что делает их идентификацию важным инструментом экспресс-диагностики инфекционных заболеваний, а количественное их определение в динамике инфекционного процесса служит критерием эффективности проводимой антимикробной терапии. АГ многих возбудителей обладают сенсибилизирующим действием, что используют для диагностики инфекционных заболеваний, а также при проведении эпидемиологических исследований. Наибольшее распространение нашли кожно-аллергические пробы, включающие внутрикожное введение АГ (аллергена) с развитием реакции гиперчувствительности замедленного типа (ГЗТ). Кожные пробы нашли применение в диагностике таких заболеваний как сап, мелиодиоз, бруцеллез. Наиболее известна проба Манту, используемая как для диагностики туберкулеза, так и для оценки невосприимчивости организма к возбудителю.
Молекулярно-генетические методы. ДНК- и РНК-зонды, полимеразная цепная реакция (ПЦР) и др. являются высокоточными современными методами исследования, широко применяемыми для диагностики инфекционных болезней.
Дата добавления: 2019-09-13; просмотров: 183; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!