ИММУНОДИАГНОСТИЧЕСКИЕ РЕАКЦИИ
ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ
ВЫСШЕГО ПРОФЕССИОНАЛЬНОГО ОБРАЗОВАНИЯ
«БАШКИРСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ»
МИНИСТЕРСТВА ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
ИММУНОДИАГНОСТИЧЕСКИЕ РЕАКЦИИ
УЧЕБНОЕ ПОСОБИЕ
Уфа – 2014
УДК 57.083:616-078 (075.8)
ББК 53.1+53.47↑7
И 53
Рецензенты:
профессор кафедры микробиологии, вирусологии и иммунологии ГБОУ ВПО «Оренбургская государственная медицинская академия» МЗ РФ, д.м.н.Чайникова И.Н.
профессор кафедры микробиологии, вирусологии и иммунологии ГБОУ ВПО «Южно-Уральский государственный медицинский университет» МЗ РФ, д.м.н.Телешева Л.Ф.
И 53 Учебное пособие «Иммунодиагностические реакции» /сост.: Г.К.Давлетшина, З.Г.Габидуллин, А.А.Ахтариева, М.М.Туйгунов, А.К.Булгаков, Т.А.Савченко, Р.Ф. Хуснаризанова, Ю.З.Габидуллин, М.М.Алсынбаев - Уфа: Изд-во ГБОУ ВПО БГМУ Минздрава России, 2014. - 92 с.
Учебное пособие подготовлено в соответствии с требованиями ФГОС по специальностям «Лечебное дело» и «Педиатрия» для изучения дисциплины «Микробиология, вирусология» и учебным планом.
В пособии излагаются основные методы изучения гуморального, клеточного иммунитета, факторов естественной резистентности организма, принципы получения антигенов и антител. Изучение данной учебной дисциплины направлено на формирование, у обучающихся, следующих общекультурных (ОК) и профессиональных (ПК) компетенций – ОК-1, ПК-2,3,5,7,11,16,17,31,32.
|
|
|
Учебное пособие оснащено тестовыми заданиями, ситуационными задачами и ответами к ним.
Учебное пособие предназначено для студентов лечебного и педиатрического факультетов.
Рекомендовано в печать Координационным научно-методическим советом и утверждено решением Редакционно-издательского совета ГБОУ ВПО БГМУ Минздрава России.
УДК 57.083:616-078 (075.8)
ББК 53.1+53.47↑7
ГБОУ ВПО БГМУ Минздрава России, 2014
Учебно-методическое управление, 2014
Содержание
Список сокращений. 5
Введение. 7
ИММУНОДИАГНОСТИЧЕСКИЕ РЕАКЦИИ.. 10
РЕАКЦИЯ АГГЛЮТИНАЦИИ (РА) ИЛИ ПРЯМАЯ РА.. 11
Определение нормальных антител к брюшнотифозному антигену в РА.. 14
РА Видаля для серодиагностики брюшного тифа и паратифов. 15
Ориентировочная РА на стекле. 17
|
|
|
Реакция пассивной агглютинации (РПА) 17
РЕАКЦИЯ ПРЕЦИПИТАЦИИ.. 21
Реакцию кольцепреципитации. 21
Постановка РП по Асколи. 22
РЕАКЦИИ С УЧАСТИЕМ КОМПЛЕМЕНТА.. 23
Реакции лизиса: бактериолиза и лизиса. 23
Реакция гемолиза. 24
Реакция связывания комплемента (РСК) 25
РСК Борде -Жангу. 27
РСК Вассермана. 29
Реакция радиального гемолиза. 30
Реакция иммунного прилипания. 31
МЕЧЕНЫЕ СЕРОЛОГИЧЕСКИЕ РЕАКЦИИ.. 31
Реакция иммунофлюоресценции (РИФ) 32
Радиоиммунологический анализ (РИА) 34
Иммуноферментный анализ (ИФА) 36
Реакция иммуноблотинга (РИ) 39
Проточная цитометрия (ПЦ) 40
Иммунная электронная микроскопия (ИЭМ) 41
РЕАКЦИИ НЕЙТРАЛИЗАЦИИ (РН) 42
Реакция нейтрализации токсина антитоксической сывороткой in vivo. 4 3
РЕАКЦИЯ НЕЙТРАЛИЗАЦИИ ВИРУСОВ.. 45
ОПСОНО – ФАГОЦИТАРНАЯ РЕАКЦИЯ.. 47
ИММУННЫЙ СТАТУС.. 48
Оценка неспецической резистентности 49
Методы оценки клеточного иммунитета. 5 0
Методы оценки гуморального иммунитета . 52
КОЖНЫЕ АЛЛЕРГИЧЕСКИЕ ПРОБЫ …………………………………………………………...53
СИТУАЦИОННЫЕ ЗАДАЧИ………………………………………………. …………...……… ….55
|
|
|
ТЕСТОВЫЕ ЗАДАНИЯ.. 60
Приложение. Ответы к ситуационным задачам …………………………………………….73
Ответы к тестовым заданиям.……………………………………………….79.
РИСУНКИ.. 86
СПИСОК РЕКОМЕНДУЕМОЙ ЛИТЕРАТУРЫ... 89
Список сокращений
CD - кластеры (группы) дифференцировки
CR - Рецептор к комплименту
HLA - антигены лейкоцитов человека
Ig - иммуноглобулин
Т - лимфоцит
Tх 1,2,3 -Т-хелперы различных типов
АПК- антигенпрезинтирующая клетка
ВИЧ- вирус иммунодефицита человека
ГЗТ- гиперчувствительность замедленного типа
ГНТ- гиперчувствительность немедленного типа
ИБ - иммуноблоттинг
ИК- иммунный комплекс
ИЛ - интерлейкин
ИФА- иммуноферментный анализ
ИФН- интерферон
ИЭМ- иммунная электронная микроскопия
ЛПС- липополисахарид
МАК- мембраноатакующие комплексы
МФ- макрофаг
ПЦ- проточная цитометрия
РБТЛ- реакция бластной трансфармации
РИА- радиоиммунный анализ
РИП- реакция иммунного прилипания
РИФ- реакция иммуннофлюоресценции
РН- реакция нейтрализации
РОНГА- реакция обратной непрямой гемагглютинации
РП- реакция преципитации
РРГ- реакция радиального гемолиза
|
|
|
РСК- реакция связывания комплимента
РТГА- реакция торможения гемагглютинации
ЦИК- циркулирующий иммунный комплекс
ЦТЛ- цитотоксический Т- лимфоцит.
Введение
Иммунология – одна из важнейших медико-биологических дисциплин. Она изучает механизм защиты организма от генетически чужеродных (экзо- и эндогенных) веществ, в том числе от патогенных микроорганизмов. Дисциплина представлена следующими основными разделами: основы иммунологии, иммунодиагностика, иммунопатология и иммунотерапия. Особое место занимает иммунодиагностика иммунопатологических состояний, где используется принцип «антиген-антитело». Обнаружение в сыворотке или плазме крови больного антител к антигенам микроорганизмов или аутоантигенам (например, онкологическим маркерам) позволяет использовать его в диагностике болезней.
Цель учебного пособия – дать представление о методах иммунологических исследований и методологических подходах к оценке их результатов.
В пособии представлены современные методы иммунологической диагностики, применяемые в иммунологии и в самых разных областях биологии и медицины.
Приведены основные принципы и этапы постановки методов, часть которых может быть воспроизведена в рамках практических занятий. Теоретический материал иллюстрирован рисунками и схемами.
Важным моментом является наличие тестовых заданий для самоконтроля усвоения изучаемого учебного материала, ситуационных задач с эталонами ответов, что активирует познавательную деятельность студента.
Студент должен знать:
- факторы врожденного и приобретенного иммунитетов,
- регуляцию иммунной системы и принцип иммунного реагирования в патологии,
- свойства антигенов и антител.
Студент должен уметь:
- ориентироваться в важнейших методах иммунологических исследований, позволяющих оценить функциональное состояние иммунной системы организма, в способах постановки иммунологических реакций;
- проводить иммунологическую диагностику инфекционных заболеваний (серологическая идентификация возбудителя, оценка гуморального и клеточного иммунитета, иммунного статуса организма);
- интерпретировать результаты иммунологических исследований.
Изучение темы «Иммунодиагностические реакции» является разделом общей иммунологии, необходимым для усвоения студентами медицинских специальностей и формирования у студентов следующих общекультурных (ОК) и профессиональных (ПК) компетенций:
ОК – 1 - Способность и готовность использовать на практике методы медико-биологических наук в различных видах профессиональной и социальной деятельности.
ПК – 2 - Способность и готовность выявлять естественнонаучную сущность проблем, возникающих в ходе профессиональной деятельности
ПК – 3 - Способность и готовность формировать системный подход к анализу медицинской информации, опираясь на всеобъемлющие принципы доказательной медицины, основанной на поиске решений с использованием теоретических знаний и практических умений в целях совершенствования профессиональной деятельности
ПК – 5 - Способность и готовность проводить и интерпретировать результаты современных лабораторных исследований
ПК – 7 - Способность и готовность применять методы асептики и антисептики, проводить санитарную обработку лечебных и диагностических помещений медицинских организаций
ПК – 11 - Осуществлять профилактические мероприятия по предупреждению инфекционных болезней
ПК – 16 - Способность и готовность анализировать закономерности функционирования отдельных органов и систем, использовать знания биологических основ для современной диагностики заболеваний и патологических процессов
ПК – 17 - Способность и готовность выявлять у пациентов основные патологические симптомы и синдромы заболеваний, используя знания основ медико-биологических дисциплин с учетом законов течения патологии по органам, системам и организму в целом, анализировать закономерности функционирования различных органов и систем при различных заболеваниях и патологических процессах
ПК – 31 - Способность и готовность изучать научно-медицинскую информацию, отечественный и зарубежный опыт по тематике исследования
ПК – 32 - Способность и готовность к участию в освоении современных теоретических и экспериментальных методов исследования с целью создания новых перспективных средств
Предлагаемое учебное пособие «Иммунодиагностические реакции» отличается относительной простотой, краткостью и доступностью изложения большого по объему материала, оно хорошо проиллюстрировано и предназначено для самоподготовки студентов медицинских вузов при освоении основ постановки иммунодиагностических реакций и методологических подходов к оценке иммунного статуса.
ИММУНОДИАГНОСТИЧЕСКИЕ РЕАКЦИИ
Иммунодиагностические реакции (ИР) широко используются в лабораторной диагностике инфекций и болезней, возникающих в результате иммунодефицитов. Их применяют: 1) для выявления антител в сыворотке крови, т.е. серологической диагностики инфекционного заболевания; 2) для определения вида или серовара микроорганизма, т.е. антигенной идентификации его.
ИР выявляют образование комплекса АГ-АТ. При этом неизвестный компонент определяют по известному компоненту. ИР отличаются высокой чувствительностью (связывание АТ с АГ при ничтожно малых количествах) и специфичностью (определяется особенностью строения активного центра АТ и детерминант АГ). Они характеризуются стадийностью развития. Первая стадия специфическая, невидимая для глаз, характеризуется соединением детерминантной группы АГ с активным центром АТ. В результате образуется комплекс АГ-АТ, утративший растворимость в изотонических растворах. Вторая стадия – неспецифическая, видимая на глаз, причем характер проявления зависит от состояния АГ, АТ и условия среды, в котором происходит взаимодействие АГ и АТ.
При взаимодействии АТ с корпускулярными антигенами (бактерии, животные клетки, др. клетки) наступают видимые невооруженным глазом изменения (например, хлопья агглютината, лизис клеток). Если с АТ соединяются растворимые мелкодисперсные АГ, образование комплексов выявляют в результате предварительной адсорбции АГ (АТ) на корпускулярных веществах (эритроцитах, частичках угля и др.)
Скорость реакции зависит от:
- оптимального соотношения АГ и АТ.
- степени специфичности АГ и АТ.
- рН среды (7, 2 – 7,4).
- концентрации электролитов (0,85% натрия хлорида).
В зависимости от состояния АГ, АТ и особенностей среды, в которой взаимодействуют АГ и АТ, различают реакции агглютинации, преципитации, лизиса, комплемента, нейтрализации и др.
ИР подразделяются на простые (двухкомпонентные, участвуют только АГ, АТ) и сложные (трехкомпонентные и многокомпонентные, участвуют АГ, АТ и реагирующая система - сенсибилизированные эритроциты, культура клеток, кожа восприимчивого животного и др.).
В настоящее время широкое применение получили ИР, в которых участвуют меченные АГ и АТ (р. иммунофлюоресценции, радиоиммунный и иммуноферментный методы).
Дата добавления: 2019-01-14; просмотров: 709; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!