Общие требования при заборе и вырезке материала для гистологического исследования
При заборе материала для гистологического исследования секционного или же операционного и биопсийного материала не зависимо от целей исследования и последующей проводке в фиксаторах рекомендуется соблюдение следующих правил:
1) Из органов, имеющих просвет, нужно изготовить полный поперечный срез, проходящий через всю стенку, т.е. по окружности или разделив ее на 2 части при большом диаметре. После фиксации материал на деревянных блоках сажается на ребро.
2) При опухолях забирается весь материал, и берутся кусочки со всех участков опухолевого поля и окружающей её ткани. Весь материал просматривается одним исследователем, и не должен разделяться по кусочкам в разные лаборатории, как порой это происходит. Если необходима консультация другого специалиста, гистологический материал должен высылаться полностью, все кусочки.
3) При исследовании костной ткани, материал иссекается пилой в пределах неизмененной костной ткани, а затем доводится до нужного размера для последующей фиксации.
4) Из областей омертвления следует иссекать периферию, т.к. разложившаяся ткань чаще не представляет особого интереса. Берется несколько кусочков. (Исключение составляет судебно-медицинская экспертиза материала, при котором имеется своя специфика забора материала, что описано в соответствующих руководствах).
5) При исследовании рыхлой соединительной ткани, фасций, серозных оболочек, стенок кишечника, особенно в детском возрасте, изготавливаются «пленчатые препараты», предложенные Мёллендорффом. С этой целью отпрепарованную пленку или оболочку осторожно натягивают на обезжиренное покровное стекло и помещают в фиксатор.
|
|
|
6) При взятии материала в случаях инфекционных процессов необходимо соблюдать известные меры предостороженности и обязательно посылать его на вирусологическое и бактериологическое исследование с маркировкой в специальной стерильной посуде (банки, пробирки).
7) При вырезке операционного материала после макроскопического исследования и описания вырезаются кусочки, как с зон патологического процесса, так и на границе в пределах здоровой ткани. При необходимости оставшийся влажный материал может храниться в архиве.
8) Биопсийный материал (в том числе и эндоскопический, соскобы), чаще бывают небольших размеров или в виде мелких кусочков, поэтому гистологическому исследованию подвергается весь присланный материал.
9) До начало взятия материала для гистологического исследования необходимо заранее продумать о выборе фиксатора и возможных методиках окраски. Избегать высыхания материала в процессе хранении и транспортировки в гистологическую лабораторию.
|
|
|
10) Соблюдать правильную маркировку материала и её регистрацию. Не рекомендуется вырезать слишком большие и толстые кусочки, так как они плохо пропитываются фиксирующими веществами и в связи с этим могут подвергаться гниению.
11) Маркировка и регистрация материала проводится в журналах лаборантом-гистологом (исследователем) в строгом соответствии с общепринятыми требованиями и целью исследования.
Обязательно четко записывается фамилия врача (исследователя), дата взятия материала и выдача ответа, краткие данные клиники, полное описание гистологического исследования, обозначается методика окраски материала и заключение. При проведении эксперимента должны быть указаны сроки, вид, номер опыта и другие данные в зависимости от цели и задач исследования.
ФИКСАЦИЯ МАТЕРИАЛА ДЛЯ ГИСТОЛОГИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ
Фиксация (фиксус – по латыни обозначает – «прочный», неизменный или закрепление) это консервирование материала и является важным этапом в гистологической технике. Фиксация применяется для сохранения тканей и органов в таком состоянии, которые были они к моменту смерти. Однако при фиксации материала происходят сложные физико-химические изменения тканей. Среди них существенное значение имеет изменение белкового компонента, ферментативных процессов. Выбор фиксатора должен выбираться в зависимости от поставленных задач исследования. Механизм действия фиксации заключается в том, что коллоидная структура исчезает в первую очередь, из-за коагуляции белков, таким образом, останавливаются все энзиматические процессы, приводящие к аутолизу и разрушению нормальной структуры тканей. В современных условиях появилась возможность исследовать ультраструктуру тканей, гистохимические процессы, иммуноморфологию в связи с этим используются различные виды фиксаторов. В качестве фиксаторов необходимо применять вещества не вызывающие грубых нарушений структуры, не сморщивающие материал или лишь незначительной степени. При этом следует помнить, что любая фиксация в разной мере вызывает изменения структуры и объем исследуемого материала, поэтому правильный подбор фиксирующей смеси предопределяет качество гистологической оценки. С целью изучения ультраструктурных изменений или состояние ферментных систем изготавливаются замораживающиеся срезы, т.е. фиксация путем высушивания на холоду (freezing-drying) или более сложные фиксирующие смеси. Однако во всех случаях необходимо придерживаться общих правил фиксации материала.
|
|
|
Дата добавления: 2018-11-24; просмотров: 2379; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!