Методы выделения чистых культур анаэробов.
1. Метод Цейсслера. Исследуемый материал сеют штрихами по поверхности плотной среды. Создают анаэробные условия. И инкубируют при 37 градусах 24-72ч. Изолированные колонии анаэробов пересевают на среду контроля стерильности или среду Китта-Тароцци.
2. Метод Вейнберга. Несколько капель исследуемого материал вносят в пробирку с 4-5мл изотонического раствора. Перемешивают запаянным капилляром переносят в пробирку с охлажденным до 45-50 градусов сахарным агаром, разлитым высоким столбиком. После перемешивания этим же капилляром засевают еще две пробирки с сахарным агаром и быстро охлаждают под струей воды. Выросшие в глубине колонии пересевают на СКС или среду Китта-Тароцци.
3. Метод Перетца. Готовят разведение материала, как указано выше. Содержимое пробирки с соответствующим разведением выливают в чашку Петри, на дне которой на двух палочках лежит стеклянная пластина 6х6см. среду заливают так, что бы она заполнила пространство между пластиной и дном чашки. При появлении роста пластинку поднимают и чистые колонии пересевают.
Определение чувствительности бактерий к антибиотикам диско-диффузионным методом. Расшифровывание антибиотикограммы.
Для использования необходимо использовать стандартные питательные среды. Стандартные диски с антибиотиками используются только до истечения срока годности. После вскрытия флакон с дисками можно хранить в течение недели в рефрижераторе при 10 градусах.
|
|
|
На поверхность подсушенной питательной среды в чашке Петри наносят 1мл исследуемой культуры, равномерно распределяют путем покачивания, избыток удаляют пипеткой. Плотные субстраты (мокрота, кал, рвота) должны быть предварительно гомогенизированы, мочу и экссудат засевают из осадка после центрифугирования. Материал наносят на чашку ватным тампоном. После выделения чистой культуры исследование проводят уже с ней. После посева среду подмушивают при комнатной температуре 10-15 минут. Диски с антибиотиками накладывают пинцетом на равно расстоянии друг от друга и на 2см от края чашки (на одну чашку не более 6 дисков). Чашку сразу ставят в термостат вверх дном и инкубируют при 35-37 градусах в течение 18-20 часов.
Для учета результатов чашки помещают на темную матовую поверхность и освещают под углом 45 градусов. Допускается учет в проходящем свете. С помощью линейки определяет диаметр зон задержки роста, включая сами диски, с точность до 1мм. Не следует обращать внимания на очень мелкие колонии в пределах зоны торможения роста. Оценку проводят по таблицам в соответствии с используемой средой и видом возбудителя.
Методы дезинфекции, правила дезинфекции в бактериологической лаборатории
|
|
|
В зависимости от характера действующего агента различают физический и химический способы дезинфекции.
Физический способ сводится к механической очистке объектов (орошению, мытью, чистке, встряхиванию и выколачиванию, влажной уборке, вентиляций помещений). Он не позволяет достигнуть полного обеззараживания обрабатываемых объектов, однако его применение приводит к значительному уменьшению числа патогенных микроорганизмов во внешней среде.
В микробиологической практике широкое применение нашли способы химической дезинфекции (рук и рабочего места, отработанного патологического материала, градуированных и пастеровских пипеток, стеклянных шпателей, стекол).
Дезинфицирующие средства предназначены для уничтожения возбудителей во внешней среде (помещениях, предметах ухода за больными, выделениях и одежде больных). Они должны:
1. Хорошо растворяться в воде
2. В короткие сроки проявлять бактерицидное действие
3. Не утрачивать обеззараживающих свойств при наличии органических примесей в среде, подлежащей обработке
4. Не оказывать токсического действия на людей и животных
5. Достаточно долго сохранять бактерицидные свойства при хранении в сухом виде или растворе
|
|
|
6. Быть дешевыми и удобными при транспортировке
Антисептческие средства применяются для воздействия на микробы, контаминирующие поверхности кожных покровов, слизистых оболочек и соприкасающихся с ними тканей.
Галогеносодержащие соединения: хлорная известь, хлорамин, раствор Люголя, спиртовой раствор йода.
Соединения тяжелых металлов: сулема, серебра нитрат, цинка сульфат, цинка окись, ксероформ, дерматол
ПАВ: пероксид водорода, калия перманганат.
Спирты: спирт этиловый.
Альдегиды: формальдегид. Циминаль
Фенолы: карболовая кислота, лизол, деготь, ихтиол
Красители: зеленка, синька
Дата добавления: 2018-09-20; просмотров: 487; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!