Правила забора слизи из зева и носа
Производятся при ангине, дифтерии и других инфекциях. Тампон для взятия мазков должен быть заранее простерилизован в лаборатории. Мазок из зева берут натощак или не ранее 2 часов после полоскания, питься, или еды под контролем глаза, не касаясь тампоном слизистых оболочек рта, языка, зубов. Корень языка придавливают книзу и кпереди шпателем, держа его левой рукой, а правой осторожно вводят в ротовую полость тампон и осторожно снимают налет или слизь на границе пораженного участка и здоровой ткани, где количество возбудителей больше, чем в других местах.
Перед взятием слизи из носа предварительно необходимо очистить нос, удалить корки. Тампон вводят поочередно в обе ноздри, плотно прикасаясь к стенкам, перегородке носа и плотно прижимая крылья носа к тампону. Полученный материал с тампона немедленно засевается на плотные питательные среды и одновременно наносится на предметное стекло, подсушивается и направляется в лабораторию для микроскопического исследования.
При подозрении на дифтерию материал засевают на кровяно-теллуритовый агар, предварительно подогретый до комнатной температуры. При посеве материал со всех сторон тампона втирают в среду на участке площадью 2х1см, а затем этим жен тампоном засевают круговыми движениями, втирая в общую поверхность среды. Засеянные чашки инкубируют при 37 градусах на 24-48 часа. При отсутствии возможности доставить материал в лабораторию в течение 3 часов с момента взятия пробы рекомендуется засевать материал на чашки с питательной средой непосредственно у постели больного или пробирки с транспортной средой помещают в термостат и затем доставляют в лабораторию. Через 24 часа инкубации с транспортной среды проводитсч пересев на КТА, поэтомк срок исследования увеличивается на одни сутки. После инкубации проводится выделение чистой культуры. Определяется род и вид. Кроме того, обязательно определяется токсигенность возбудителя дифтерии.
|
|
|
При подозрении на другую инфекцию мазок из зева берется параллельно двумя стерильными тампонами. Один помещают в пробирку с сахарным бульоном, другой используют для приготовления мазка. После инкубации через 24 часа проводится пересев с сахарного бульона на питательные среды (кровяной агар, шоколадный агар, ЖСА, Эндо, Сабуро). Чем больше набор селективных питательных сред используется для посева материала, тем больше вероятность выделения и идентификации микроорганизмов, вырвавших болезнь. После идентификации до рода и вида необходимо определить чувствительность к антибиотикам.
Правила забора и посева ликвора
Производится на 20% сывороточный агар или же на среду обогащения – 0,1% полужидкий агар. Среды должны быть свежими: срок хранения их в холодильнике не более суток. Ликвор необходимо собирать в стерильную пробирку и немедленно доставлять в лабораторию на исследование в водяной бане при 37 градусах. Ликвор центрифугируют, берут 2-3 капли осадка жидкости, взятой со дна пробирки, засевают на повехность подогретого сывороточного агара в чашку Петри. Готовится мазок для бактериоскопического исследования, а оставшийся ликвор в пробирке заливается 5мл стерильного полужидеого 0,1% агара с добавлением сыворотки и помещается в термостат для накопления микробных клеток (так называемое «обогащение»). Предварительный результат посева, получается через 1-2 дня, а окончательный – через 3-4 дня, при выделении чистой культуры менингококка с помощью метода обогащения – через 7-8 дней.
|
|
|
Правила приготовления и окрашивания микропрепаратов, методы окраски
Окраска по Граму. Методика:
1) окрасить мазок генцианвиолетом ( 2 минуты,через фильтровальную бумагу);
2) бумагу удалить, оставшуюся краску слить;
3) окрасить мазок раствором Люголя (1 минута);
4) раствор Люголя слить и нанести несколько капель чистого 96% спирта (30-40 секунд, осторожно покачивать стекло);
|
|
|
5) тщательно смыть спирт водой;
6) окрасить водным фуксином (2 минуты);
7) промыть водой и высушить.
Грам-положительные бактерии окрашиваются в темно-фиолетовый цвет, Грам-отрицательные – в красный
Окраска кислотоустойчивых бактерий. Кислотоустойчивые микроорганизмы обладают выраженной к неорганическим кислотам, спиртам, щелочам. Это связано с наличием в клеточной стенке и мембране сравнительно большого количества липидов. Бактерии этой группы очень плохо окрашиваются обычными способами, поэтому используют концентрированные растворы с подогревом. При последующей кратковременной обработке кислотой клетки, воспринявшие краску, не обесцвечиваются. Это позволяет отличить кислотоустойчивые бактерии. Их окрашивают по методу Циля-Нильсена, который разработан с учетом все указанных особенностей
Окраска по Цилю-Нильсену. Методика:
1) нанести несколько капель карболового фуксина на фиксированный мазок. Покрытый фильтровальной бумагой, и подогреть до появления паров (3-5 минут);
2) бумагу снять, мазок охладить и обесцветить 3% серной кислотой или 3% солянокислым спиртом (3-4 секунды);
3) тщательно промыть водой;
|
|
|
4) окрасить дефферовской синькой (3-5 минут);
5) промыть водой и высушить.
Окаска спор. Зрелая спора с трудом поддается окрашиванию из-за низкой проницаемости стенки. При окраске по Граму спорообразующей культуры краска воспринимается только вегетативной частью микроба, а спора остается бесцветной. Проницаемость ее клетки резко увеличивается после обработки горячей соляной кислотой или при испольщовании концентрированного раствора краски в подогревом. Восприняв краску, спора при последующей обработке кислотой не обесцвечивается, в то время как вегетативные клетки немедленно отдают краску.
Метод Ожешко.
1) нанести несколько капель 0,5% соляной кислоты на нефиксированный мазок и нагреть до появления паров (2-3 минуты);
2) слить кислоту, промыть водой, высушить;
3) зафиксировать в пламени;
4) окрасить по методу Циля-Нильсена (при этом споры окрашиваются в красный цвет, а вегетативные формы – в синий). Часто для окраски спор используют только метод Циля-Нильсена.
Дата добавления: 2018-09-20; просмотров: 880; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!