ИССЛЕДОВАНИЕ МОРФОЛОГИИ ЭРИТРОЦИТОВ
Помимо показателей концентрации гемоглобина и общего числа эритроцитов, важная информация о состоянии эритропоэза может быть получена при исследовании морфологии эритроцитов. Исследование проводится в световом микроскопе в окрашенных мазках крови (реже в нативных препаратах). Для приготовления мазков используют промытые и обезжиренные предметные стекла. Мазки крови готовят так, как это описано в разделе “Взятие крови”, после чего их высушивают на воздухе. Мазки фиксируют в растворе метилового спирта или растворе эозинметиленового синего (по Маю-Грюнвальду), высушивают на воздухе и окрашивают. Чаще всего применяется окраска азурэозином по Романовскому-Гимзе или Нохту.Высохшие и фиксированные мазки помещают в специальную кювету с раствором краски или горизонтально на “рельсы” или мостики из стеклянных палочек, соединенных резиновыми трубочками, которые устанавливают на лотки. На мазки наливают высокий слой (3–4 мл на мазок) раствора красителя и оставляют на 20–45 минут, после чего краску сливают и мазки высушивают на воздухе. Морфологию эритроцитов изучают с помощью иммерсионной системы микроскопа. Вначале предметное стекло с окрашенным и высушенным мазком крови помещают на столик микроскопа и под малым увеличением находят край мазка. В этом месте на мазок наносят каплю иммерсионного масла и переводят иммерсионный объектив в вертикальное положение так, чтобы объектив погрузился в каплю масла. Осторожно вращая вначале макровинт, а затем микровинт добиваются четкой видимости препарата и приступают к исследованию морфологии эритроцитов. Патологические изменения в морфологии эритроцитов заключаются в появлении клеток различной формы (пойкилоцитоз), размера (анизоцитоз), окраски (анизохромия) и с различными внутриклеточными включениями.
|
|
|
Тельца Жолли — это круглые фиолетово-красные включения в эритроцитах, представляющие собой своеобразные остатки (“осколки”) ядер. В большинстве случаев они встречаются при анемиях, обусловленных дефицитом витамина В12 и фолиевой кислоты, а также после удаления селезенки.
Кольца Кебота — это кольцевидные включения в эритроцитах. Так же, как и тельца Жолли, являются остатками ядерной субстанции эритроцитов. Они встречаются при тяжелом течении В12-фолиеводефицитных анемий, при полицитемии и при отравлениях солями тяжелых металлов.
Тельца Гейнца–Эрлиха свидетельствуют о деструкции гемоглобина, ведущей к повреждению мембраны эритроцита, что сопровождается усиленным их гемолизом в селезенке. В небольшом количестве они присутствуют при тяжелых токсических поражениях нитроглицерином, нитратами и нитритами, сульфаниламидами, анилином и другими веществами. Значительное количество телец Гейнца-Эрлиха в эритроцитах встречается при гемолитических кризах у пациентов с наследственными дефицитом глюкозо-6- фруктозодегидрогеназы эритроцитов, что ведет к образованию нестабильного гемоглобина и является одной из частых причин наследственных гемолитических анемий.
|
|
|
Измерение диаметра эритроцитов
Измерение диаметра эритроцитов проводят с помощью прямого микроскопического или электронно-автоматического методов.
При прямом микроскопическом методе диаметр эритроцитов измеряют в окрашенном мазке крови с помощью окуляр-микрометра, в котором имеется специальная шкала с известной ценой деления (1,5 мкм). Измеряют диаметр не менее 100 эритроцитов и подсчитывают количество эритроцитов с одинаковым размером.
В современных гематологических анализаторах производится автоматический подсчет эритроцитов разного диаметра в 1 мкл крови. Работа таких приборов основана на разных принципах. В наиболее распространенных устройствах кровь пропускают через капилляр и фиксируют величину изменения сопротивления, которая зависит от размера клетки.
|
|
|
У здорового человека нормоциты (эритроциты диаметром 7,5 мкм) составляют 68%, микроциты (диметр меньше 7,0 мкм) – 15% и макроциты (диаметр больше 7,9 мкм) – 17%.
Результаты микроскопического или автоматического определения диаметра эритроцитов лучше представлять в более наглядной форме — в виде так называемой эритрометрической кривой (кривой Прайса-Джонса) или гистограммы распределения различных размеров эритроцитов. По оси абсцисс откладывают значения диаметра эритроцитов в мкм, а по оси ординат — количество клеток данного диаметра. У здорового человека пик эритроцитометрической кривой приходится на диаметр 7,5 мкм.
При микроцитарныханемиях эритроцитометрическая кривая сдвинута влево, в сторону меньшего диаметра эритроцитов, при макроцитарныханемиях – вправо, в сторону клеток большего диаметра. В обоих случаях кривая имеет более пологую форму и более широкое, чем в норме, основание, что отражает наличие анизоцитоза эритроцитов.
ПОДСЧЕТ ЦВЕТОВОГО ПОКАЗАТЕЛЯ
Цветовой показатель (фарб-индекс) характеризует среднее содержание гемоглобина в одном эритроците. Для вычисления цветового показателя пользуются следующей формулой:
где ХHb —найденное количество гемоглобина,
|
|
|
NHb — нормальное количество гемоглобина,
Xэр — найденное количество эритроцитов,
Nэр — нормальное количество эритроцитов.
Если принять, что в норме в 1 л крови содержится 167 г гемоглобина и 5´1012 эритроцитов, то подставляя эти значения в формулу, получим:
Если учесть, что найденное количество эритроцитов (Хэр) обычно выражается числом миллионов клеток, умноженным на 1012, то цветовой показатель по упрощенной методике можно определить как:
цветовой показатель = 3 х Hb(г/л) / три первые цифры числа эритроцитов (в млн.).
Интерпретация результатов
У здоровых людей цветовой показатель находится в пределах 0,8–1. Цветовой показатель количественно, хотя и очень ориентировочно, отражает некую усредненную интенсивность окраски эритроцитов. Поэтому его используют для деления анемий на гипохромные, нормохромные и гиперхромные.
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ГЕМАТОКРИТА
Для расчета некоторых других индексов эритроцитов необходимо определение общего объема эритроцитов в цельной крови (гематокрита). Показатель гематокрита дает представление о соотношении между объемом плазмы и форменных элементов крови (в первую очередь эритроцитов). Гематокрит определяют методом микроцентрифугирования или автоматически на современных гематологических анализаторах.
Микроцентрифугирование. Кровь из пальца или венозную кровь набирают в специальные гематокритные капилляры, предварительно обработанные антикоагулянтом (гепарином или ЭДТА). Капилляры укупоривают пастой или закрывают резиновым колпачком и центрифугируют 5 минут при 8000 об/мин. После этого по специальной шкале отмечают, какую часть градуированного капилляра в процентах составляют эритроциты. Для определения гематокрита можно использовать и другие режимы центрифугирования (например, 30–40 минут при 3000 об/мин или 60–90 минут при 1 500 об/мин). Наиболее точным и удобным является автоматическое определение гематокрита на гематологических автоматах различной конструкции. Чаще используются кондуктометрический и центрифугический способ.
Интерпретация результатов
У здорового человека гематокрит венозной и капиллярной крови составляет 40–48% (или 0,40–0,48 мкл) у мужчин и 36–42% (0,36–0,42 мкл) у женщин. Показатель гематокрита дает представление о степени гемоконцентрации. Повышение гематокрита наблюдается:
1. при обезвоживании организма — дегидратации (неукротимая рвота, диарея, чрезмерное потоотделение);
2. при патологических состояниях, сопровождающихся уменьшением ОЦП (массивные ожоги, шок, перитонит и др.);
3. при первичных и вторичных эритроцитозах (эритремия, хронические заболевания легких с дыхательной недостаточностью, пребывание на больших высотах, новообразования почек с усиленным образованием эритропоэтинов, поликистоз почек и др.).
Снижение гематокрита наблюдается:
1. при гипергидратации организма (введение в сосудистое русло больших количеств жидкости, перед схождением отеков и т. п.);
2. при состояниях, сопровождающихся увеличением ОЦП (вторая половина беременности, гиперпротеинемия и др.);
3. при анемиях.
В современных гематологических счетчиках и анализаторах показатель гематокрита чаще всего рассчитывается на основании результатов определения количества эритроцитов (RBC) и их среднего объема (MCV).
Дата добавления: 2018-08-06; просмотров: 563; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!