Методы определения содержания гемоглобина
В прошлом большое распространение получил простой метод колориметрического определения одного из производных гемоглобина — солянокислого гематина, образующегося при добавлении к крови соляной кислоты (метод Сали). Данный метод заключается в том, что цвет особым способом обработанной крови сравнивается в так называемом колориметре с цветом стандартной жидкости или окрашенного стекла. Наиболее простым по устройству и в то же время достаточно точным колориметром является гемометр Сали. Этот прибор состоит из деревянного штатива, окрашенного в черный цвет, или сделанного из черной пластмассы. В штативе имеются 3 вертикальных цилиндрических прореза. В боковых прорезах находятся 2 запаянные с обоих концов стеклянные трубочки, в которых содержится стандартный раствор (1% раствор солянокислого гематина, образующегося из гемоглобина путем прибавления к крови десятикратного объема децинормального раствора НСІ). В некоторых гемометрах вместо пробирок с солянокислым гематином имеются цилиндрические стеклянные палочки соответствующей буро-желтой окраски. В средний прорез гемометра вставлена открытая сверху пустая стеклянная пробирка того же калибра, что и боковые трубочки с делениями от 10 до 140 (считая снизу вверх). Эта пробирка предназначена для исследуемой крови. Так как при продолжительном стоянии частички солянокислого гематина могут оседать на дно трубочек, отчего стандартная жидкость просветляется, при каждом определении содержимое трубочек следует взболтать. Для того чтобы осаждение солянокислого гематина происходило не так легко, в некоторых гемометрах содержится суспензия его не в воде, а в глицерине. Солянокислый гематин разлагается под влиянием света. Поэтому гемометр должен в промежутках между исследованиями храниться в темноте. При замене стандартного раствора окрашенными стеклянными палочками необходимость этих предосторожностей, конечно, отпадает. Для удобства рассматривания на задней стенке штатива за трубочками прикреплена пластинка из молочного стекла, которая рассеивает свет. При гемометре имеется специальная пипетка для набора крови.Основным методом определения концентрации гемоглобина является унифицированный цианметгемоглобиновый метод. Его принцип сводится к следующему: железосинеродистым калием (красной кровяной солью) гемоглобин окисляют в метгемоглобин, который с ацетонциангидрином образует окрашенный цианметгемоглобин. Через 20 минут концентрацию последнего определяют на фотоэлектроколориметре (ФЭК). Материалом исследования служит смесь 5,0 мл трансформирующего раствора, содержащего указанные реактивы (железосинеродистый калий и ацетонангидрид), с 0,02 мл крови. Интенсивность окраски измеряют на ФЭКе и затем рассчитывают концентрацию гемоглобина по калибровочному графику. Метод позволяет суммарно определить все разновидности гемоглобина, за исключением сульфгемоглобина. Цианметгемоглобиновый метод лежит в основе определения концентрации гемоглобина в большинстве современных автоанализаторов.
|
|
|
|
|
|
Интерпретация результатов
Содержание гемоглобина крови определяется в г/л. Нормальная концентрация Hb в крови у взрослых мужчин составляет 130–160 г/л, у женщин — 115–145 г/л. При оценке уровня гемоглобина следует помнить, что суточные вариации содержания гемоглобина в периферической крови достигают 15% с максимумом по утрам. У жителей северных регионов и высокогорных районов уровень Hb нередко оказывается выше приведенных значений на 10 г/л. Наконец, у пожилых людей (старше 65 лет) нижняя граница нормальных значений этого показателя достигает 122 г/л у мужчин и 110 г/л у женщин. Это требует более внимательного и вдумчивого отношения к оценке уровня гемоглобина, особенно если его значения находятся в пределах нижней или верхней границы нормы. Во всех случаях, когда концентрация гемоглобина оказывается ниже 120 г/л, показано углубленное гематологическое обследование пациента с определением количества эритроцитов (RBC), цветового показателя (Цп), среднего объема эритроцитов (MCV), среднего содержания (MCH) и концентрации (MCHC) гемоглобина в эритроците и других показателей. В тех случаях, когда содержание гемоглобина достигает 155–160 г/л, необходимо исключать наличие первичных и вторичных эритроцитозов.Снижение содержания гемоглобина является характерным признаком анемий различной этиологии. Повышение концентрации гемоглобина наблюдается при эритремии (полицитемии) и симптоматических реактивных эритроцитозах. Следует помнить также, что при сгущении крови (дегидратация организма при неукротимой рвоте, полиурии, диарее) может возникнуть относительное увеличение концентрации гемоглобина.
|
|
|
ПОДСЧЕТ ЭРИТРОЦИТОВ
Эритроциты составляют основную массу форменных элементов крови. Зрелые эритроциты человека лишены ядра, имеют двояковогнутую форму, что увеличивает поверхность соприкосновения гемоглобина с плазмой и облегчает процесс переноса кислорода и углекислоты. Мембрана эритроцитов представляет собой двойной слой липидных и белковых компонентов и обладает различной проницаемостью для анионов и катионов. Последнее обстоятельство оказывается важным для участия эритроцитов в регуляции ионного равновесия плазмы. Эритроциты могут адсорбировать на своей поверхности большое количество различных компонентов плазмы (аминокислоты, липиды, токсины, антигены). Около 1/3 буферных свойств крови приходится на долю эритроцитов, что предохраняет реакцию крови от сдвигов в сторону ацидоза или алкалоза.
Дата добавления: 2018-08-06; просмотров: 580; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!