І. Определение группы крови с помощью моноклональных реагентов (цоликлонив) анти-А и анти-В
Материалы:
• моноклональные реагенты (цоликлоны) анти-А (розового цвета), анти-В (синего цвета) по 5мл во флаконах.
• маркированные пипетки («анти-А», «анти-В» и т.д.)
• белая фарфоровая пластинка
• кровь больного (взята из антикоагулянтом)
Условия проведения исследований:
• Определение группы крови проводится в помещении с достаточным освещением при температуре от 15 ° С до 25 ° С.
• Необходимо работать в перчатках.
• Необходимо проверить срок годности реагентов.
• Не следует пользоваться моноклональными реагентами, если они имеют нерастворимый осадок или помутнение.
• Для каждого реагента используют отдельную промаркированную пипетку.
• Моноклональные реагенты не следует хранить открытыми.
Техника определения группы крови с помощью цоликлонив антигенов А и В:
1 Нанести на планшет или на белую фарфоровую пластинку под соответствующими надписями «Анти - А» и «Анти - В» по одной капле (100 мкл) цоликлона анти-А и анти-В.
2. Рядом с каплями антител нанести по одной капле (50 мкл) исследуемой крови (соотношение кровь: реагент - 1:10)
- в случае определения группы крови, взятой с пальца или взятой без консерванта, необходимо обеспечить достаточно большое количество эритроцитов, то есть брать первые капли с пальца (без сильного выдавливания) или свободные эритроциты из осадка крови, которая свернулась (без чрезмерного количества сыворотки).
|
|
|
3. Реагенты и кровь тщательно смешать чистой, сухой, стеклянной палочкой на пластине.
4. Наблюдать за ходом реакции при легком покачивании пластины или планшета в течение 5 минут (через возможность более позднего появления агглютинации с эритроцитами, содержащими слабые разновидности антигенов А или В).
Оценка результатов:
Положительный результат - выражается в агглютинации (склеивании) эритроцитов.
Агглютинацию можно наблюдать невооруженным глазом в виде мелких красных агрегатов, которые быстро сливаются, образуют большие хлопья или один большой аглютинат.
Отрицательной результат - капля остается равномерно окрашенной в красный цвет, аглютинаты в ней не наблюдаются.
• Кровь относится к группе 0 (I), если отсутствует (-) агглютинация с
цоликлонамы анти-А и анти-В.
• Кровь принадлежит к группе А (II), если агглютинация (+)
наблюдается с цоликлоном анти-А.
• Кровь принадлежит к группе В (III), если агглютинация (+)
наблюдается с цоликлоном анти-В.
• Кровь принадлежит к группе АВ (IV), если агглютинация (+)
наблюдается с цоликлоном анти-А, анти-В и анти-АВ.
Табл. 1 Трактовка результатов реакции
Реакция эритроцитов, которые исследуются, с моноклональными реагентами (цоликлонамы)
|
|
|
Анти - А Анти - В Контроль Анти - АВ
0 (I) - - -
А (II) -
В (III) -
АВ (IV)
| Группа исследуемой крови | Реакция эритроцитов, которые исследуются, с моноклональными реагентами (цоликлонами) | ||
| Анти - А | Анти – В | Контроль Анти - АВ | |
| 0(І) | - | - | - |
| А (II) | + | - | + |
| В (III) | - | + | + |
| АВ (IV) | + | + | + |
Вопросы
1. что с чем агглютинирует: где Аг, где Ат?
Дата добавления: 2015-12-19; просмотров: 27; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!