Мобильные генетические элементы



Обнаружены как в составе хромосом, так и в плазмидах. Представляют собой короткие нуклеотидные последовательности. Не несут никаких структурных генов и содержат 2 гена: ген синтеза транспозазы (обеспечивает вырезание фрагмента из хромосомы и встраивание его в другой локус) и ген синтеза репрессора, который регулирует весь процесс перемещения IS-элементов (У бактерий разных видов и прокариот и эукариот, могут перемещаться и по хромосомам, и между ними).

Транспозоны имеют структурные гены, интегроны содержат ген, кодирующий устойчивость к антибиотикам.

Значение мобильных элементов.

 Перемещаясь по ДНК клетки или между ДНК разных клеток, они вызывают:

- инактивацию генов тех участков ДНК, куда они, переместившись, встраиваются;

- повреждения генетического материала;

 - встраивание плазмиды в хромосому;

 - распространение гена в популяции бактерий

Изменчивость бактерий

Бывает генотипическая и фенотипическая. Генотипическая проявляется в модификациях (изменение свойств клетки под влиянием внешней среды). Могут быть длительными и кратковременными. Модификации касаются большинства клеток популяции.

 

Генотипическая – это мутации и рекомбинации.

Мутации могут быть спонтанными и индуцированными.

Изменчивость у бактерий происходит как по вертикали, так и погоризонтали.

Рекомбинации - это взаимодействие между двумя геномами, обладающими различными генотипами, которое приводит к образованию генома, сочетающего гены донора и реципиента. В процессе рекомбинации бактерий условно делят на клетки-доноры, которые передают генетический материал, и клетки-реципиенты, которые его принимают. Рекомбинация у бактерий рассматриваются как аналоги полового размножения. У бактерий рекомбинации происходят только в одном направлении.

Особенности:

- отсутствует мейоз. Образуется не зигота, а меразигота.

 - всегда направлена от донора к реципиенту.

- количество генетического материала у рекомбинанта всегда больше одного. Рекомбинант содержит всю генетическую информацию реципиента и часть генетической информации донора.

У эукариот механизм рекомбинации один – мейоз; у бактерий различают три вида рекомбинаций:

1) трансформация- это обмен генетической информации с помощью чистой ДНК. Может передаться только небольшой фрагмент, который должен быть комплиментарен в определенном участке ДНК реципиента.

2) трансдукция – этот способ переноса генетической информации с помощью фагов.

 3) конъюгация – это способ передачи генетической информации, когда между двумя бактериями образуются цитоплазмические мостики, по которым осуществляется переход генетической информации. При конъюгации передаются как плазмиды, так и различные фрагменты хромосом. При конъюгации в клетку-реципиент может перейти почти весь геном. При конъюгации донор обозначается как мужская особь из за наличия f-пили.

Плазмиды меньше хромосом, следовательно реплицируются быстрее, следовательно в клетке их становится много, что способствует эпидемическому распространению лекарственной устойчивости.

В настоящее время разработано множество генетических методов диагностики инфекционных и не только заболеваний.

1.Секвенирование генома – определение последовательности пар нуклеотидов ДНК. Применяется для определения вида и внутривидовой дифференцировки.

2.ПЦР используется для обнаружения генов или соответствующих нуклеотидных последовательностей, кодирующих либо видовую принадлежность, либо выработку основного фактора вирулентности. Метод ПЦР основан на принципе комплементарности и позволяет увеличивать (амплифицировать) количество исследуемого образца ДНК.ПЦР относится к экспресдиагностике (продолжительность 4-6 часов) Этот метод обладает чрезвычайно высокой чувствительностью и теоретически позволяет обнаружить в исследуемом материале даже единичные молекулы ДНК. Компоненты ПЦР: искомая ДНК, праймеры (синтетические олигонуклеотиды, состоящие из 15-30 нуклеотидов, комплементарных сайтам на матрице ДНК), ТАГ-полимераза, дезоксирибонуклеотид-5фосфат для достраивания утраченного основания по принципу комплементарности, область высокой чувствительности и позволяет обнаружить молекулы ДНК. Каждый цикл ПЦР состоит из 3 стадий:

1) 90-95 градусов – денатурация матричной ДНК, образование 2 цепей

2) Отжиг праймера. Вносятся праймеры «генетические разведчики». Если праймер нашел комплементарные участки, то он присоединяется и начинает действовать ТАГ-полимераза и удлиняет участки. Длительность – 3 минуты.

3) Элонгация

Разновидности ПЦР:

 - ПЦР в режиме реального времени; даёт возможность определить количество фрагментов ДНК находящегося в материале, т.е. проводить количественный анализ;

- мультиплексная ПЦР – преимущество заключается в том, что в реакционную смесь можно вводить 2 – 4 и более пары праймеров. Они характерны для различных возбудителей.

 - обратнотранскрипционная ПЦР – позволяет осуществить копирование РНК возбудителей.

Используется для диагностики особо опасных инфекций, при хронических инфекциях, для обнаружения некультивируемых форм бактерий.ПЦР проводится не только для выявления возбудителя, но и при последствиях онкологических заболеваний, пересадке органов и тканей.

3.ДНК – чипы.


Дата добавления: 2019-08-31; просмотров: 254; Мы поможем в написании вашей работы!

Поделиться с друзьями:






Мы поможем в написании ваших работ!