Опыт №1. Влияние желчи на кровообращение в брыжейке лягушки.
Обездвиженную лягушку помещают брюшком вниз рядом с круглым отверстием так, чтобы оно располагалось справа от отверстия. На правой стороне брюшка делают послойно продольный разрез. Осторожно, чтобы не нарушить кровообращение, извлекают брыжейку тонкого кишечника и расправляют ее над круглым отверстием и фиксируют булавками. Под малым увеличением (об.8Х) наблюдают нормальную циркуляцию крови брыжейки. Следует обратить внимание на микроциркуляцию крови и скорость кровотока.
Пастеровской пипеткой из желчного пузыря лягушки извлекают желчь и наносят 2-3 капли на выбранный участок брыжейки и продолжают наблюдение за нарушением микроциркуляции. Обратить внимание на изменение скорости кровотока и величины просвета сосудов.
Опыт №2. Действие желчи на сердечную деятельность.
Обездвиженную лягушку, прикрепляют на дощечку брюшком вверх, широко обнажают сердце, снимая перикард. Подсчитывают исходное число сердечных сокращений в минуту. 2-3 капли желчи нанося на сердце. Подсчитывают число сердечных сокращений в минуту. Подсчет проводят в течение 15 минут. Сравнивают данные, полученные в эксперименте.
Опыт №3. Исследование сыворотки крови и мочи собаки с механической желтухой.
В сыворотки крови определяют количество прямого билирубина (билирубина диглюкуронида). В моче определяют наличие желчных кислот (качественная реакция) и желчных пигментов (качественная реакция)
|
|
|
Определение билирубина в сыворотки крови.
а) качественная прямая реакция на билирубин: к одному мл сыворотки крови добавить 0.25 мл свежеприготовленной диазосмеси. При положительной реакции на наличие в сыворотке крови билирубина диглюкуронида, появляется малиново-розовое окрашивание раствора.
б) количественное определение прямого билирубина. Для исследования берется 1 мл сыворотки крови. Исследуемая сыворотка разводится физиологическим раствором. Разведение берут от 1:2 до 1:1024, согласно схеме (см. таблицу)
| NN пробирок | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 |
| Физиологический раствор в мл | 1 | 1 | 1 | 1 | 1 | 1 | 1 | 1 | 1 | 1 |
| Сыворотка крови в мл | 1 | ® | ® | ® | ® | ® | ® | ® | ® | ® |
| Диазосмесь в мл | 0,25 | 0,25 | 0,25 | 0,25 | 0,25 | 0,25 | 0,25 | 0,25 | 0,25 | 0,25 |
| Конечное разведение сыворотки | 1:2 | 1:4 | 1:8 | 1:16 | 1:32 | 1:64 | 1:128 | 1:256 | 1:512 | 1:1024 |
Примечание. Стрелки в таблице указывают, что 1 мл жидкости из предыдущей пробирки после тщательного перемешивания переносится в следующую пробирку. Из 10 пробирки 1 мл жидкости выливается.
В каждую пробирку добавляют 0.25 мл диазосмеси. Находят последнюю пробирку, где еще можно уловить следы слабо-розового окрашивания. Содержание билирубина диглюкуронида выражают в мг. Наименьшее количество билирубина способное давать слабо-розовое окрашивание с диазосмесью – 0.00156 мг. Умножив эту величину на разведение пробирки, получают содержание билирубина. Так, например, последняя пробирка, где еще заметно окрашивание – 5. Умножая 0.00156 мг на 32 (величина разведения в 5 пробирке), получаем 0.04992 мг. Для выражения содержания билирубина в мг% полученную величину умножаем на 100. 0.04992 мг х 100= 4.992 мг%.
|
|
|
Определение желчных кислот и желчных пигментов в моче.
а) качественная реакция на желчные пигменты мочи. Желчные пигменты переходят в мочу при содержании билирубина глюкуронида в крови более 1мг%. В пробирку наливают 1 -2 мл исследуемой мочи. Осторожно, по стенке наливают раствор Люголя. В случае положительной реакции на границе жидкостей появляется темно-зеленое кольцо.
б) полуколичественная реакция на желчные кислоты в моче. Для исследования берут мочу собаки с механической желтухой, мочу здоровой собаки и дистиллированную воду. Реакция основана на свойствах желчных кислот понижать поверхностное натяжение.
Путем подсчета свободнопадающих капель из сталагмометра последовательно определяют величину поверхностного натяжения дистиллированной воды, нормальной мочи и патологической мочи. Подсчет капель трех жидкостей обязательно производится на одном и том же сталагмометре.
|
|
|
Методика. Исследуемая жидкость насасывается в сталагмометр до верхней метки. Сталагмометр укрепляется вертикально в штативе Бунзена. Подсчитывают количество свободнопадающих капель. Счет ведется до тех пор, пока жидкость не достигает нижней метки сталагмометра.
Определяют сталагмометрический коэффициент нормальной и исследуемой мочи: отношение числа свободнопадающих капель мочи к числу свободнопадающих капель воды. Сталагмометрический коэффициент нормальной мочи близок к 1,0.
Дата добавления: 2019-03-09; просмотров: 445; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!