Специальные методы исследования кала на простейшие кишечника
Применяются для выделения мелких (3-5 мкм) и плохо различимых даже при большом увеличении микроскопа простейших (криптоспоридии и некоторые формы бластоциста), а также для проведения дифференциальной диагностики четырехядерных цист энтамеб, то есть для видовой идентификации дизентерийной амебы.
К специальным методам исследования на наличие простейших кишечника относятся методы влажного мазка с физиологическим раствором, раствором Люголя или метиленовым синим; методы приготовления постоянно окрашенных препаратов (трихромовый метод, модифицированный метод окраски по Цилю-Нильсену).
Метод приготовления влажного мазка нативного кала с физиологическим раствором, растворами Люголя и метиленового синего
Исследование свежего кала применяется для дифференциальной диагностики простейших и, в особенности, четырехядерных цист и трофозоитов амеб. Диагностика до вида может быть осуществлена по типичному движению живых паразитов. Но практически трудно осуществить доставку в лабораторию свежего кала в течение 30-40 мин. Более длительное время транспортирования приводит к потере подвижности и дегенерации трофозоитов всех видов амеб, жгутиковых и ресничных. В таком случае, применяется окрашивание растворами Люголя и метиленового синего.
Необходимые реактивы и оборудование
Обезжиренные предметные и покровные стекла (24 24 мм)
|
|
Стеклянные палочки или деревянный шпатель
Физиологический раствор
Раствор Люголя 2%-й
Метиленовый синий раствор по прописи
Микроскоп
Подготовка к исследованию
1) Предварительно нанести на предметные стекла 1-2 капли физиологического раствора, раствора Люголя и метиленового синего.
2) Из пробы кала выбрать обычную порцию и порцию с патологическими признаками (слизь, кровь), смешать с каплей подготовленных на предметном стекле растворов, накрыть покровным стеклом.
3) Препарат должен быть почти прозрачным, светопроницаемой плотности, чтобы "можно было видеть газетный шрифт".
4) Микроскопировать при увеличении: окуляр 10, объектив 10, а затем окуляр 10, объектив 40. При необходимости можно осторожно использовать водную иммерсию и увеличение: окуляр 10, объектив 100.
Результаты исследования
В неокрашенных препаратах простейшие отличаются от фекального детрита светопреломлением, ядра живых амеб не видны.
Метиленовый синий и йод обнаруживают внутреннюю структуру клеток: строение оболочек, цитоплазмы, наличие гликогена, хроматоидных телец, число ядер и морфологию ядерных структур (прилож.5). Окраска метиленовым синим позволяет также дифференцировать простейших от других клеток, встречающихся в кале: лейкоцитов, макрофагов, клеток эпителия.
|
|
Если удается прижизненная диагностика в теплом физиологическом растворе, оценивают характер движения трофозоитов (прилож.5).
Дата добавления: 2019-02-12; просмотров: 415; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!