Методы переваривания в искусственном желудочном соке
Классический метод переваривания по Березанцеву Ю.А.
Подготовка к исследованию
1) Мышечную ткань измельчают.
2) Готовят раствор искусственного желудочного сока: вода дистиллированная 1000 мл, концентрированная соляная кислота 7 мл, пепсин кристаллический 15 г. Пепсин добавляют в последнюю очередь.
3) Желудочный сок наливают в химический стакан, помещают в него измельченные пробы мышечной ткани в соотношении 10:1.
4) Тщательно размешивают.
5) Сосуд помещают в термостат при температуре 39 °С на 16-18 ч (периодически помешивают стеклянной палочкой или с помощью магнитной мешалки).
6) После окончания переваривания всю массу выливают в аппарат Бермана на сито из мельничного газа (N 26) или центрифугируют в тканях или пробирках. Через 15-20 мин личинки оседают на дне сосуда.
7) Надосадочную жидкость отсасывают пипеткой с резиновой грушей, а осадок микроскопируют в чашках Петри с использованием стереоскопического микроскопа.
Ускоренный метод переваривания по Владимировой П.А.
Подготовка к исследованию
1) Измельченные пробы мышечной ткани помещают в химический стакан с искусственным желудочным соком в соотношении 1:25.
2) Выдерживают смесь в термостате при температуре 42-47 °С в течение 3,5-4,0 ч при периодическом помешивании.
3) После отстаивания в течение 15-20 мин надосадочную жидкость осторожно сливают.
4) Осадок помещают на предметное стекло или в чашку Петри и исследуют под малым увеличением стереоскопического микроскопа.
|
|
|
Результат исследования
Юные трихинеллы (личинки) имеют характерный вид спирально закрученных образований, инкапсулированные в мышечных тканях. Капсула имеет лимонообразную форму, размером (0,25-0,66 
0,21-0,42) мм, содержит одну мышечную трихинеллу, реже 2-3.
Лабораторная диагностика филяриозов
Филяриозы - это гельминтозы, возбудители которых относятся к нематодам, характеризуются трансмиссивным путем передачи. Наибольшее распространение имеют филяриозы лимфатической системы - вухериоз и бругиоз, поражающие кожу и ткани и среды глаза - онхоцеркоз, лоаоз, дирофиляриоз.
В России регистрируется местный дирофиляриоз, остальные виды филяриозов являются завозными из стран тропического пояса.
Лабораторный диагноз филяриозов устанавливается по обнаружению микрофилярий в крови либо биоптатах кожи, в тканях и средах глаза.
Микрофилярии накапливаются и длительно циркулируют в периферических кровеносных сосудах или мигрируют в поверхностных слоях кожи. При онхоцеркозе они могут проникать также в оболочки и среду глаза. Длительность жизни личинок (микрофилярий) в организме человека составляет от нескольких месяцев до 2-5 лет.
|
|
|
В организме человека микрофилярии не растут, морфологически не изменяются и имеют четко выраженные видовые признаки (прилож.6).
Важное диагностическое значение имеет также тот факт, что для микрофилярий характерен определенный ритм их присутствия в периферических кровеносных сосудах с четко выраженным пиком микрофиляриемии: только днем, только ночью или в течение суток равномерно.
Отбор проб крови
При подозрении на лимфатические филяриозы исследуют кровь из пальца или венозную кровь. Кровь из пальца берется обязательно в ночное время (после 19.00 ч). Для выявления микрофилярий Loa loa отбор крови производится в дневное время.
В венозной крови микрофилярии присутствуют в течение суток равномерно, поэтому производить забор крови в ночное время не требуется. Объем проб крови из пальца или вены указывается в описании методов исследования.
Лабораторная диагностика онхоцеркоза
При подозрении на онхоцеркоз исследуют биоптат кожи.
Приготовление биоптатов кожи
1) Эпидермис срезается с пораженного участка кожи диаметром 2-3 мм: кончиком иглы приподнимают эпидермис кожи и лезвием бритвы или острым глазным скальпелем бескровно, соблюдая правила асептики. Делают одновременно несколько срезов, главным образом с тех участков, на которых заметны изменения кожи и отмечается зуд (чаще в области гребешков подвздошной кости, боковых поверхностей грудной клетки).
|
|
|
2) Срезы эпидермиса помещают в стерильную чашку Петри с физиологическим раствором и доставляются в лабораторию для исследований.
3) Микроскопию лучше проводить с МБС при увеличении: окуляры 12,5. Срезы для исследований помещают на предметные стекла, для этого сначала рисуют на них карандашом по стеклу 3-4 ячейки диаметром 1 см и затем заполняют их водой или физиологическим раствором. В каждую ячейку помещают 1-2 биоптата кожи. Во избежание высыхания препараты хранят на влажных ватных тампонах в чашке Петри, сверху закрытой второй чашкой. В таких условиях личинки сохраняют подвижность в течение двух и более суток.
4) Микроонхоцерки обладают фототропизмом, в связи с чем для улучшения их выхода из биоптатов кожи в физиологический раствор перед микроскопией препараты содержат в темноте в течение 1-2 ч.
Для обнаружения живых микрофилярий в биоптатах кожи используют два метода:
метод исследования необогащенного нативного препарата;
метод исследования обогащенного препарата.
Методы применяются при диагностике онхоцеркоза и кожного мансонеллеза (стрептоцеркоза).
Дата добавления: 2019-02-12; просмотров: 1024; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!