В любом случае по каналу связи вместо самой речи передают так или иначе выделенные и квантованные параметры предсказания, интервал и усиление ОТ, параметры возбуждения. 17 страница
<1> Один из таких случаев рассмотрен в аналитическом обзоре экспертных заключений, содержащемся в работе: Перепечина И.О. Разработка проблемы судебно-медицинской генетической идентификации. // "Черные дыры" в российском законодательстве. 2002. N 4. С. 208 - 258.
Нарушением является несоблюдение требований, которые определены ст. 204 УПК РФ и ст. 86 ГПК РФ, к заключению эксперта, в части описания содержания и результатов исследований, а также обоснования экспертных выводов. В заключениях нередко весьма неполно приводятся фактические данные, позволяющие судить о правильности выбора и использования методов и технических средств, обоснованности полученных генетических профилей, правильности математических расчетов и сделанных выводов, что лишает экспертизу ее объективного базиса. Хотя сам по себе этот дефект не становится причиной ошибочного результата, опасность его в том, что он может камуфлировать ошибку.
9.2. Методические ошибки, ведущие к неверному определению
идентификационных генетических признаков
Методические ошибки заключаются в выборе экспертом не оптимальной для данного случая методики исследования либо нарушении правильно выбранной методики или общих принципов, принятых для данного вида исследования.
Идентификационные генетические признаки выявляются в виде антигенных характеристик (при использовании иммунологических методов) либо в виде профилей ДНК <1>. Случаи неправильного их определения встречаются в основном при исследовании объектов с места происшествия, реже - при тестировании сравнительных образцов.
|
|
|
--------------------------------
<1> Профиль ДНК отображает (в сигнальной форме, а также в виде буквенно-цифровых характеристик) исследуемые участки (локусы) ДНК соответствующего лица.
Неправильное определение профиля ДНК в экспертизе обычно приводит к ошибочному исключению возможности происхождения объекта от проходящего по делу лица, что может направить расследование по ложному пути, а также лишить систему доказательств важного звена. Противоположная ситуация - случайное совпадение неправильно определенного профиля ДНК с профилем ДНК проходящего по делу лица - в экспертизе маловероятна, особенно при большом количестве исследованных локусов. Другое дело - поиск по базе данных, в этом случае ошибочное совпадение с одним из содержащихся в ней профилей ДНК вполне возможно. Оно может иметь серьезные последствия, вплоть до осуждения невиновного. Неблагоприятные последствия будут и в случае ложноотрицательного результата, когда, несмотря на присутствие в базе данных профиля лица, оставившего следы, совпадения интересующего профиля с базой данных не произойдет и преступник выявлен не будет. Это также может направить следствие по пути поиска мнимого преступника - родственника действительного, так как ошибка ДНК-типирования обычно приводит к получению профиля, лишь незначительно отличающегося от истинного. Переориентация же на поиск родственника может не только отнять для отработки вариантов много времени, но и привести к ошибочному совпадению с образцом не причастного к преступлению лица. Серьезные последствия для расследования уголовных дел имеют и ошибки при использовании традиционных методов исследования.
|
|
|
Одно из встречающихся нарушений общего порядка исследования связано с тем, что не были проведены в полном объеме необходимые контрольные тесты либо они были выполнены таким образом, что не обеспечили должного контроля достоверности результатов исследования (например, проведены с другой панелью образцов). Без контрольных тестов результаты лишены достоверности, а выводы - обоснованности.
Ошибки в определении профиля ДНК могут быть обусловлены неверной идентификацией аллелей <1>, аллельным "выпадением", ошибочной интерпретацией выявленного аллельного сигнала как артефактного либо, наоборот, принятием артефакта за аллель. Интерпретация может быть проведена неправильно, если не соблюдено важное правило - тщательный анализ каждого выявленного сигнала (пика) на предмет дифференциации аллельных фрагментов ДНК от артефактных. Затруднения могут возникнуть при анализе низкоуровневых пиков, находящихся в пограничном диапазоне величины, условно принятой в качестве пороговой. Артефакты могут быть обусловлены амплификацией и электрофорезом. При STR-анализе, приоритетной криминалистической технологии, среди встречающихся артефактных фрагментов, обусловленных амплификацией, важное значение для интерпретации имеют статтеры. Они отличаются от аллелей на целую повторяющуюся единицу и поэтому могут имитировать аллельные сигналы <2>. Определенное значение для интерпретации имеют и другие артефакты <3>. Ряд артефактных фрагментов может возникать при электрофорезе.
|
|
|
--------------------------------
<1> В судебном ДНК-анализе аллель является основным идентификационным признаком, единицей информации.
<2> Хотя существуют признаки, позволяющие дифференцировать статтеры и аллельные фрагменты, в сложных случаях статтеры потенциально могут служить причиной ошибочного установления гетерозиготного состояния у гомозиготы, а также "смешанного" характера образца, в действительности содержащего ДНК лишь одного индивидуума.
|
|
|
<3> Среди этих фрагментов - "N+1"-фрагменты, обусловленные дополнительной активностью Taq-полимеразы (в экспертизах сочетание "N"-фрагментов и "N+1"-фрагментов должно быть отдифференцировано от сочетания двух аллелей, различающихся по длине на 1 п. н.о., например аллелей 9.3 и 10 локуса TH01), артефакты, возникающие за счет неспецифического присоединения праймеров ("неспецифические артефакты").
Затруднять исследование и потенциально вести к ошибкам могут следующие факторы.
1. Малые количества исследуемого биологического материала. Недостаточное количество имеющегося в распоряжении эксперта биологического материала может негативно отразиться на результатах. При использовании иммунологических методов это может стать причиной невыявления соответствующего антигена, особенно в случае наличия его слабой формы, и привести к неправильному установлению групповой принадлежности объекта <1>.
--------------------------------
<1> Например, невыявление слабой формы антигена A (A и других, еще более слабых вариантов) в объекте с групповой принадлежностью AB может вести к ошибочному установлению группы крови B, а невыявление его в объекте группы A - к установлению группы O.
Недостаточное количество ДНК может быть связано как с изначально малым содержанием ДНК в ряде объектов (например, в волосах, моче, следах рук), так и с малым количеством самого объекта, если даже относительное содержание в нем ДНК достаточно велико. С помощью современных методов ПЦР-анализа успешное типирование в ряде случаев возможно даже при использовании всего 100 - 150 пг ДНК. Исследование сверхмалых количеств ДНК исключительно актуально для практики, поскольку это расширяет круг объектов типирования, однако оно сопряжено с методическими проблемами. Если количество ДНК слишком мало, ее профиль может либо не определиться вообще, либо будут получены сигналы низкой интенсивности. В последнем случае может возникнуть описанная выше проблема дифференциации аллельных пиков от артефактных, что приобретает особую остроту в случае аллельного дисбаланса или смешанного характера объекта. Все это затрудняет интерпретацию и может служить причиной ошибок.
2. Деградация ДНК. В следах ДНК подвергается деградации, т.е. фрагментированию, что обусловлено воздействием различных деструктивных факторов внешней среды <1>. Деградация существенно затрудняет типирование ДНК, поскольку вызывает снижение интенсивности сигнала вплоть до его исчезновения, а также ведет к появлению трудно интерпретируемых артефактов. Влияя в большей степени на возможность детектирования более длинных последовательностей ДНК, деградация может стать причиной "выпадения" аллеля в гетерозиготном профиле, симулируя тем самым гомозиготность. Потенциальная возможность такого явления усложняет интерпретацию, поскольку в случае несовпадения профилей ДНК приходится решать, чем это обусловлено - данным явлением или происхождением ДНК от разных индивидуумов. При деградации сигналы в некоторых локусах могут вообще отсутствовать. Профили, в которых наблюдается аллельное и (или) локусное "выпадение", называются парциальными, или частичными. Такие профили более сложны для интерпретации.
--------------------------------
<1> Деградации может способствовать использование некоторых технико-криминалистических средств, например, применение УФ-излучения при осмотре места происшествия.
Уменьшение в процессе деградации высоты некоторых пиков может сделать сложной дифференциацию их от артефактных сигналов либо привести к их полному исчезновению, в то время как другие аллельные пики мультилокусного профиля того же самого образца могут выявляться. При исследовании "смешанных" следов (см. ниже) может возникнуть вопрос, не перестали ли из-за деградации детектироваться в некоторых локусах те или иные аллели тех или иных лиц (контрибьюторов). Поскольку надежные основания для достоверного вывода о том, все ли аллели были выявлены или нет, отсутствуют, это оставляет возможность альтернативных вариантов интерпретации. Еще одной проблемой является то, что компоненты смеси могут быть деградированы в разной степени, в силу их разной природы, либо разного времени их нахождения в следах. Это сообщает интерпретации еще больший субъективизм.
3. Наличие ингибиторов. Ингибирование ПЦР происходит за счет инактивации некоторыми веществами фермента Taq-полимеразы, используемого для данной реакции, и может вести к получению сигнала низкой интенсивности либо к его отсутствию. Ингибиторы могут содержаться как в самом биологическом объекте (в крови - гем, в волосах - меланин), так и в предмете-носителе (например, красители в джинсовой ткани) <1>.
--------------------------------
<1> Очистка ДНК во многих случаях позволяет освободить пробу от присутствия ингибиторов, однако ее эффективность не всегда может оказаться достаточной. Кроме того, как и любая дополнительная процедура, она не только удлиняет исследование и может вести к потерям ДНК, но и повышает риск контаминации.
Вещества, содержащиеся в предмете-носителе, могут также вызывать неспецифические реакции группоспецифических сывороток с контрольными участками предмета-носителя. Одним из самых "коварных" в этом плане предметов-носителей является уже упомянутая джинсовая ткань, содержащая краситель индиго синий. Влияние предмета-носителя требует применения определенных методических подходов и затрудняет интерпретацию результатов.
4. "Смешанный" характер объекта. Объектами экспертизы нередко являются следы, содержащие биологический материал разных индивидуумов либо биологический материал одного индивидуума разной природы (например, кровь и выделения, разные виды выделений). Такие следы называются "смешанными". Наиболее часто "смешанные" объекты встречаются в экспертизах, назначаемых по половым преступлениям (сперма одного или нескольких лиц в смеси с вагинальными выделениями, кровью жертвы).
"Смешанный" характер объекта существенно затрудняет интерпретацию результатов, в особенности при использовании традиционных, иммунологических методов. При их применении не представляется возможным определить (если только не используется метод иммунофлюоресценции, позволяющий наблюдать результаты иммунологической реакции на клеточном уровне), за счет какого компонента смеси произошло связывание с той или иной группоспецифической сывороткой. Поэтому при исследовании смесей спермы и вагинальных выделений (или крови) жертвы выявляется совокупная антигенная характеристика, что обычно не позволяет однозначно установить группу крови донора спермы. Ошибкой является, если группа крови жертвы не учитывается и выявляемый общий антигенный профиль отождествляют с групповой принадлежностью спермы. Это приводит к завышению идентификационной значимости данных <1>.
--------------------------------
<1> Больше всего вариантов имеет место в случае, если группа крови жертвы по системе АВО - АВ (такая же антигенная характеристика выявляется и в "смешанных" следах): при этом групповая принадлежность спермы может быть любой. Если эксперт ошибочно сделает вывод о том, что сперма в следах произошла от лица с группой крови АВ, да еще усилит свой вывод указанием частоты встречаемости этой группы крови в популяции (8% среди европеоидов), то в случае, если по делу будет проходить обвиняемый с такой же группой крови, суд может использовать это в числе доказательств в пользу его виновности. На самом деле никакой информации в отношении групповой принадлежности донора спермы эти результаты не дали.
Интерпретация "смешанных" объектов представляет собой весьма сложную
задачу и в ДНК-анализе, ведь исходно часто не известен ни сам факт наличия
смеси, ни число лиц, ДНК которых содержится в объекте. "Смешанный" характер
профиля ДНК не всегда очевиден. Профиль ДНК одного лица имеет в каждом
локусе не более двух аллелей, поэтому если в локусе выявляется большее
количество пиков, это позволяет предположить наличие смеси. Однако
экстра-пики за счет артефактов могут выявляться и в индивидуальном профиле.
В то же время "смешанный" характер профиля может камуфлироваться наличием в
генотипах общих аллелей <1>.
--------------------------------
<1> Так, вероятность выявления при исследовании смеси ДНК двух
индивидуумов двухаллельного профиля в каждом из шести STR-локусов
-5
составляет 2,5 x 10 . См.: Gill P., Sparkes R., Kimpton C. Development of
guidelines to designate alleles using an STR multiplex system // Forensic
Science International. 1997. Vol. 89. P. 185 - 197.
Наибольшую проблему для исследования представляют смеси биологического материала одной и той же природы, например, крови двух или более лиц. Для определения профилей разных контрибьюторов может быть использована корреляция высоты пиков с количеством ДНК, что позволяет в ряде случаев отнести аллели за счет профилей ДНК определенных лиц. Однако, поскольку на высоту пика влияют и другие факторы помимо количества ДНК, это не всегда легко сделать. Сложности, например, могут возникнуть в случае аллельного дисбаланса. Успешно используются для интерпретации специально разработанные для анализа "смешанных" следов компьютерные программы.
Методика "дифференциального лизиса" позволяет отделить ДНК спермы от ДНК иной природы (крови, вагинальных выделений) и получить "чистые" профили соответствующей ДНК. Процедура обычно весьма эффективна, однако полностью разделить материал удается не всегда. Ошибки могут возникать, если игнорируется возможность того, что фракции, полученные после "дифференциального лизиса", могут иметь достаточно сложный состав и содержать ДНК разных лиц. Неверный результат может также быть обусловлен тем, что при интерпретации не учитывается возможность неодинаковой подверженности к деградации разных компонентов смеси, следствием чего может явиться преимущественная амплификация одних компонентов смеси по отношению к другим либо неодинаковая способность ДНК к амплификации по разным локусам. В смешанных объектах еще более сложно, чем в заведомо изолированных образцах, дифференцировать аллельные сигналы от сигналов, обусловленных артефактами. Все это может вести к ошибочным выводам о генотипах лиц, ДНК которых содержится в следах.
"Смешанный" характер профиля ДНК может быть обусловлен не только исходным присутствием в следах биологического материала разного происхождения, но и случайным загрязнением объекта чужеродной ДНК - контаминацией (contamination - англ. загрязнение). В случае, когда собственный профиль ДНК объекта не выявляется, контаминация может приводить к выявлению не присущего объекту профиля ДНК и служить причиной идентификационной ошибки.
Контаминация может произойти на различных этапах манипуляций с объектами, начиная с места происшествия, если при изъятии не соблюдаются меры предосторожности, предохраняющие объекты от загрязнения их ДНК изымающего лица или других объектов (использование резиновых перчаток, шапочек, масок, протирка инструментов спиртом после работы с каждым объектом и т.д.). Загрязнение также может произойти при помещении объектов в одну и ту же упаковку <1>; в морге при небрежном обращении с одеждой, снятой с трупа. В экспертной лаборатории контаминация может произойти при манипуляциях по время осмотра поступивших на исследование предметов и в особенности при анализе ДНК.
--------------------------------
<1> Иногда возможность контаминации следует уже из описания того, как упакованы объекты. Так, в одном из заключений было указано, что брюки обвиняемого, изъятые у него дома, были доставлены в лабораторию упакованными вместе с обнаруженными на месте происшествия предметами одежды жертвы, пропитанными ее кровью.
Предотвращение контаминации достигается строгим выполнением всех требований, предъявляемых к организации и проведению ПЦР-анализа. Особенно опасна контаминация амплифицированной ДНК, поэтому помещения, где с ней работают, должны быть отделены от зоны, где исследуется геномная ДНК. К контаминации приводят нарушение предписанных методикой правил зонирования помещений, неправильное устройство вентиляции, использование в разных зонах одних и тех же дозаторов, небрежная лабораторная работа и т.д. Индикатором контаминации является обнаружение профиля ДНК в специально предусмотренном отрицательном контроле - в так называемой пустой пробе, в которую заведомо не вносится ДНК, а также "смешанного", не присущего матрице профиля в положительном контроле. Такой результат свидетельствует о сбое в исследовании, поэтому результаты исследования всей панели образцов признаются недостоверными, и оно должно быть проведено повторно.
Одним из возможных причин контаминации в лаборатории является загрязнение исследуемого объекта генетическим материалом работавшего с ним сотрудника. Этот вариант наименее опасен, так как он не приводит к ошибочному обвинению проходящего по делу лица. Кроме того, он наиболее прост для выявления, поскольку персонал лаборатории тестирован, и доказать артефактное происхождение выявленного профиля ДНК не представляет сложностей.
В прессе сообщалось о проходившем во Флориде процессе по делу Кейси Энтони, обвинявшейся в убийстве своей 2-летней дочери Кейли. Скелетированные останки ребенка в декабре 2008 г. были обнаружены в лесном массиве недалеко от дома, где Кейли жила с матерью. Важным аргументом защиты являлось выявление на находившемся на черепе скотче профиля ДНК неизвестного лица. Выяснилось, однако, что это профиль ДНК лаборанта, работавшего с объектом <1>.
--------------------------------
<1> Hightower Kyle. Defense Focuses on DNA in Anthony Trial. Хаффингтон Пост. 16 июня 2011 г. // http:// www.huffingtonpost.com/ huff-wires/ 20110616/ us-casey-anthony-trial.
Большую опасность представляет контаминация объекта, относящегося к событию преступления, генетическим материалом сравнительного образца, так как в случае, если она не распознана, это может привести к ошибочной идентификации и, возможно, к судебной ошибке. Риск контаминации создается, если объекты с места происшествия и сравнительные образцы исследуются в одном и том же помещении одновременно, в особенности в одной и той же панели образцов. Недопустимо одновременное исследование объектов, содержащих малое количество ДНК (волосы, микроследы крови, выделений), и сравнительных образцов, содержащих большие количества ДНК. Они должны исследоваться в разных помещениях.
Дата добавления: 2019-02-12; просмотров: 137; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!