В любом случае по каналу связи вместо самой речи передают так или иначе выделенные и квантованные параметры предсказания, интервал и усиление ОТ, параметры возбуждения. 18 страница
Также опасна для исхода дела контаминация следов, происхождение которых неизвестно, генетическим материалом объектов, очевидно относящихся к событию преступления. Так, если объекты, изъятые из дома подозреваемого, будут случайно загрязнены ДНК следов крови жертвы, изъятых с места убийства, результаты ДНК-анализа станут серьезным доводом в пользу его виновности.
Все большее значение для практики приобретает контаминация, которая ведет к получению ошибочного совпадения с базой генетических данных в случаях, когда до получения положительного ответа на запрос базы данных идентифицированное лицо подозреваемым не являлось (в англоязычной литературе такие совпадения носят название "cold hits" - "холодные совпадения"). Описано значительное число таких ошибок. Так, в одной из лабораторий объекты экспертизы, оставшиеся после изнасилования, произошедшего несколько лет назад, были контаминированы ДНК лица, ранее тестированного для базы данных. Было установлено, что в период, когда выполнялась эта экспертиза, образец ДНК данного лица использовался другим экспертом в другой панели образцов в качестве контрольного. От обвинения идентифицированного спасло то, что тогда, когда произошло изнасилование, он был еще совсем ребенком <1>.
--------------------------------
<1> См.: Thompson W.C. Tarnish on the "Gold Standard"...
Однако счастливый конец при контаминации бывает далеко не всегда. В 2002 г. в лаборатории Мичиганской полиции была проведена экспертиза по делу об убийстве Джейн Миксер, которое произошло в 1969 г. На одежде убитой была обнаружена ДНК двух мужчин, профили которых при проверке по базе данных совпали с профилями ДНК неких Гэри Лейтермана и Джона Руэлса. Они сразу стали подозреваемыми. Никакой связи ни между данными лицами и убитой <1>, ни между ними самими выявлено не было. Зато было выяснено, что образцы ДНК этих лиц, проходящих по совершенно другим делам, тестировались в лаборатории в тот же день, когда исследовались и следы по делу Миксер. Несмотря на такие явно настораживающие совпадения и очевидные противоречия в деле, в 2005 г. Лейтерман был осужден <2>.
|
|
|
--------------------------------
<1> Что касается Руэлса, то вообще выяснилось, что в то время, когда была убита Миксер, ему было всего четыре года и он жил с родителями в другом городе. Для объяснения того, каким образом кровь юного Руэлса могла оказаться на месте происшествия, была выдвинута версия о том, что он страдал носовыми кровотечениями и его кровь каким-то образом попала на Миксер.
<2> См.: Thompson W.C. The potential for error in Forensic DNA Testing (and How that complicates the use of DNA Databases for Criminal Identification). 2008. August 12 // http:// www.councilforresponsiblegenetics.org/ pageDocuments/ H4T5EOYUZI.pdf.
|
|
|
В последнее время в литературе появляются все новые свидетельства того, что контаминация - проблема не единичных экспертных исследований, такие случаи происходят регулярно, причем даже в лучших ДНК-лабораториях <1>. В случае если условия проведения исследования создают потенциальный риск контаминации, это может являться основанием для того, чтобы поставить под сомнение достоверность идентификации. Для этого необходимо тщательно изучить все этапы технологии, проследив, как именно проводилось исследование интересующих объектов, а также установить, были ли случаи контаминации в этой лаборатории раньше. Для получения необходимой информации может быть целесообразно помимо изучения материалов допросить персонал лаборатории. Собранная совокупность данных не всегда позволяет заключить, что объекты действительно были контаминированы, однако из них можно получить информацию о том, что есть реальные основания для того, чтобы считать, что это могло быть. В определенном контексте это может иметь большое значение для объяснения результатов ДНК-анализа. В судебной практике есть прецеденты, когда результаты такого анализа данных были учтены при вынесении приговора по уголовному делу. Приведем пример.
|
|
|
--------------------------------
<1> См.: Thompson W.C. Tarnish on the "Gold Standard".
В 1997 г. в Австралии при странных обстоятельствах исчез малолетний Джейдин Лески. Шесть месяцев спустя был обнаружен его труп с признаками насильственной смерти. Подозрение пало на знакомого матери, с которым был оставлен мальчик в день исчезновения, однако на испачканной кровью одежде погибшего была выявлена ДНК неизвестной женщины. Обвиняемый был оправдан. В 2003 г. было получено совпадение по 7 локусам с профилем ДНК из базы данных, принадлежавшим молодой женщине с нарушениями психики. Вероятность случайного совпадения составила 1 на 227 млн. Однако женщина жила за сотни миль от места преступления, в деревне, которую никогда не покидала. Это обстоятельство побудило провести тщательное изучение материалов, относящихся к исследованию ДНК. Было установлено, что ДНК этой женщины, проходившей в качестве потерпевшей по случаю изнасилования, исследовалась в той же лаборатории в то же самое время, что и одежда мальчика. Таким образом, появилась версия о контаминации, хотя сотрудники лаборатории категорически отрицали ее возможность.
|
|
|
Итак, контаминация или случайное совпадение? После типирования еще нескольких локусов, так, что в общей сложности их число составило 15, а вероятность случайного совпадения достигла 1 на 100 трлн., сомнений уже не осталось. В отсутствие установленной связи между обвиняемой и погибшим результаты ДНК-анализа, приведшие к совпадению с базой данных, были отнесены за счет контаминации объектов исследования в лаборатории. Это и было указано в приговоре по данному уголовному делу <1>. У.К. Томсон, участвовавший в данном деле в качестве независимого эксперта, указал, что он может документально подтвердить десятки случаев контаминации в других лабораториях, произошедшей при тех же условиях <2>. Очевидно, что в подобных случаях правильное решение вопроса возможно только при оценке различных иных доказательств по делу, а не только данных ДНК-анализа.
--------------------------------
<1> Inquest into the death of Jaidin Raymond Leskie. Coroner's case N 007/98. 2006. July 31 // http://www.bioforensics.com/articles/Leskie_decision.pdf.
<2> Thompson W.C. Victoria State Coroner's inquest into death of Jaidin Leskie...
Разновидностью контаминации считают также загрязнение объектов микрофлорой. В ДНК-анализе это не создает проблему для интерпретации, так как профиль ДНК микроорганизмов при использовании соответствующих идентификационных систем не детектируется. Однако при исследовании традиционных генетических маркеров эксперты сталкиваются с проблемой, связанной с выявлением в следах антигенов микрофлоры, искажающих результаты установления групповой принадлежности, в особенности при применении высокочувствительной реакции абсорбции-элюции (РАЭ). Такие искажения, не будучи предотвращены использованием необходимых методических подходов и пригодных для исследования таких объектов иммунореагентов, явились причиной экспертных ошибок, имевших трагические последствия для исхода целого ряда уголовных дел, в том числе получивших большой резонанс <1>. Наличие у микроорганизмов серологической активности обусловливает в ряде случаев кажущееся несовпадение антигенных характеристик крови и выделений одного и того же человека. Некоторые авторы, не учитывая природу этого явления, объясняли случаи такого несоответствия существованием так называемого "парадоксального выделительства", ошибочно полагая, что выделениям отдельных лиц могут быть свойственны антигены, не присутствующие в их крови. Безосновательность этого представления была доказана результатами многочисленных исследований отечественных и зарубежных авторов. Тем не менее заблуждения относительно не существующего в природе парадоксального выделительства время от времени вновь появляются в юридической литературе.
--------------------------------
<1> Хорошо известны последствия экспертных ошибок, допущенных в ставших известными делах ряда серийных убийц. Неправильное установление в следах групповой принадлежности спермы имело своим следствием ошибочный вывод об исключении возможности ее происхождения от лиц, от которых она в действительности произошла. Результаты экспертиз были основанием для снятия с этих лиц подозрений. Последствия этого известны. Так, в деле Чикатило ими стали осуждение не причастных к совершенным им преступлениям лиц; в деле Манджикова - бессмысленное тестирование десятков тысяч населения на предмет поиска лица с ошибочно установленной при первичной экспертизе группой крови и, вследствие потери времени, - нападение преступника на следующую жертву.
Объект может также содержать примесь гетерогенного биологического материала какого-либо животного. При антигенной дифференциации по системе АВО это может явиться причиной экспертной ошибки, так как животные содержат те же антигены, что и человек. Поэтому в случае, если примесь крови животного к крови человека окажется не диагностированной, группа крови человека может быть установлена неверно. В ДНК-анализе подобная проблема отсутствует, поскольку положительный результат ПЦР может быть получен лишь с ДНК человека <1>.
--------------------------------
<1> Для ПЦР применяются лишь специфичные для ДНК человека праймеры, не гибридизующиеся с ДНК иного происхождения.
Перечисленные трудности не исчерпывают всего спектра методических проблем, с которыми сталкиваются эксперты при исследовании объектов биологического происхождения. Следует подчеркнуть, что существование этих сложностей не означает их непреодолимость. Разработаны подходы к решению самых разных проблем, и в руках опытного, квалифицированного эксперта получаемые результаты достоверны. Речь идет лишь о том, что существуют проблемные моменты, которые, в отсутствие к ним должного внимания со стороны эксперта, могут привести к ошибкам. Эти "узкие места" экспертизы, оставляющие в определенных случаях место для субъективизма и разницы во мнениях, должны также стать предметом дальнейших исследований.
9.3. Ошибки вследствие мутаций
В идентификационных исследованиях важно учитывать возможность мутаций, при которых происходят изменения генетического материала. Это также может иметь значение для оценки результатов.
При генеративных мутациях (затрагивающих половые клетки) мутантный аллель передается последующим поколениям, присутствуя во всех типах их тканей. Такие мутации актуальны для экспертизы установления родства, в частности для экспертизы спорного отцовства. Согласно Приказу Минздравсоцразвития России N 346н <1> "для обоснованного вывода о безусловном исключении отцовства, материнства аллели ребенка, не свойственные ни одному из указанных родителей, должны быть зарегистрированы как минимум в двух несцепленных локусах" (п. 84.12.4) <2>. Однако опубликованы данные, свидетельствующие о возможности выявления мутаций не только в одном, но и в двух локусах, вследствие чего достоверное исключение отцовства констатируется, как правило, при исключении отцовства не менее чем по трем локусам, а исключение по двум локусам оценивается как сомнительный результат. В литературе приведены также статистические данные относительно частоты мутаций одновременно в трех локусах (1:4,5 млн.) <3>.
--------------------------------
<1> Приказ Минздравсоцразвития России от 12 мая 2010 г. N 346н "Об утверждении Порядка организации и производства судебно-медицинских экспертиз в государственных судебно-экспертных учреждениях Российской Федерации".
<2> Этот пункт без изменения перешел из утратившего силу Приказа Минздрава России от 24 апреля 2003 г. N 161 "Об утверждении Инструкции по организации и производству экспертных исследований в бюро судебно-медицинской экспертизы". Критический анализ данного положения был дан в статье: Перепечина И.О., Животовский Л.А. Оценка идентификационного значения генетических данных при судебно-медицинском установлении отцовства (материнства) // Сб. науч. трудов "Криминалистические средства и методы в раскрытии и расследовании преступлений". Ч. III. ЭКЦ МВД РФ. М., 2004. С. 23 - 26.
<3> Jacewicz R., Berent J., Dobosz T., Kowalczyk E. Non-exclusion paternity case with a triple genetic incompatibility // Int. Society of forensic genetics. 9 - 13 September. 2003. Bordeaux - Arcachon. D-32.
При соматических мутациях, не затрагивающих половые клетки, мутантный аллель другим поколениям не передается.
Мутации в STR-локусах носят различный характер, в зависимости от которого они могут влиять на STR-профиль (потенциально создавая этим риск ошибочной интерпретации), а могут не влиять. Обычно они представляют собой вставку или делецию (выпадение) целой повторяющейся единицы, что детектируется. При точковых мутациях события происходят на уровне нуклеотидного основания, некоторые из таких мутаций влияют на STR-профиль.
Вставка и делеция основания приводят к изменению длины региона с короткой повторяющейся последовательностью или амплифицируемого фланкирующего региона и поэтому влияют на STR-профиль. Мутация в виде замены основания (если только она не затрагивает праймер-связывающий регион) на длину последовательности ДНК, а следовательно, на STR-профиль, не влияет. Мутация в праймер-связывающей последовательности фланкирующего региона может влиять на результаты типирования: если вследствие мутации в этой области отжиг праймера станет невозможным, аллель амплифицироваться не будет, и это приведет к его "выпадению" (нуль-аллель); если же мутация лишь частично препятствует отжигу, снижая эффективность амплификации, это приведет к уменьшению интенсивности сигнала, но не к его полному исчезновению.
Точковые мутации могут приводить к дискордантности - расхождению в результатах генотипирования, полученных с использованием разных систем праймеров, например, в мультилокусных системах для STR-анализа разных производителей, обусловливая тем самым различия в результатах при использовании в разных экспертизах разных наборов реагентов <1>.
--------------------------------
<1> Орехов В.А., Поляков А.В., Никулин М.В. и др. Анализ полиморфизмов в окружении STR-маркеров: преодоление дискордантности результатов генотипирования. Доклад на VII Всероссийской научно-практической конференции с международным участием "Молекулярная диагностика - 2010". Москва, 25 ноября 2010 г.
Встречаются также такие аномалии, как дупликации (удвоения), которые могут происходить как на хромосомном, так и на генном уровнях. Некоторые из них могут детектироваться. Дупликация, несущая мутацию в коровом повторяющемся регионе STR-локуса, может влиять на число тандемных повторов, приводя к выявлению трехаллельного профиля с сигналами одинаковой интенсивности. При судебном ДНК-анализе зафиксированы десятки трехаллельных профилей в STR-локусах, многие из которых встретились в локусах TPOX, FGA, CF1PO. Если дупликация не несет мутацию, в гетерозиготном профиле будет наблюдаться только два аллеля <1>. В редких случаях дополнительные фрагменты ДНК могут быть обусловлены наличием у донора ДНК хромосомных аномалий, таких как хромосомные транслокации, трисомии и др. Из исключительно редких генетических явлений можно также упомянуть химеры, которые потенциально могут привести к получению профилей ДНК с избыточными аллельными вариантами. Иногда в кровяном русле дизиготных близнецов во внутриутробном периоде образуются сосудистые анастомозы, в результате чего происходит перенос от одного близнеца другому эритроцитов и эритропоэтических клеток. Благодаря состоянию иммунологической толерантности иммунологического конфликта не происходит. В подобных случаях индивидууму свойственны как бы две группы крови, два профиля ДНК <2>.
--------------------------------
<1> Li R. Forensic Biology. CRC Press, 2008. P. 299.
<2> Прокоп О., Гелер В. Группы крови человека. М., 1991; Castella V., Lesta M., Mangin P. One person with two DNA profiles: a (nother) case of mosaicism or chimerism. Int. J. Legal Med., 2009. V. 123. N. 5. P. 427 - 430.
Интерпретацию результатов анализа митохондриальной ДНК может усложнять явление так называемой гетероплазмии, под которой понимается наличие двух и более субпопуляций (типов) митохондриальных геномов в одной митохондрии, клетке, ткани, органе или у индивидуума; гетероплазмия проявляется наличием двух и более митотипов в одном и том же типе ткани либо разных митотипов в разных тканях индивидуума <1>. Причиной гетероплазмии являются мутации, уровень которых в гипервариабельных регионах (HV-I и HV-II) митохондриальной ДНК в 5 - 10 раз выше, чем в ядерной ДНК. Гетероплазмия может возникать как в момент оплодотворения, в гаметах, так и в течение жизни индивидуума в качестве соматической мутации. Разные ткани подвержены гетероплазмии по-разному; чаще всего она встречается в волосах. Правильная оценка выявляемых в последовательностях митохондриальной ДНК различий имеет большое значение для интерпретации экспертных данных. Например, выявление гетероплазмии в волосе, изъятом с места происшествия, при отсутствии ее в образце подозреваемого не может не создать проблему при оценке данных. При неправильной интерпретации гетероплазмия может быть причиной ошибочного исключения индивидуума как источника происхождения объекта. Однако, с другой стороны, если гетероплазмия присутствует одновременно и в экспертном объекте, и в представленном для сравнения образце, она может повысить идентификационную значимость полученных результатов.
--------------------------------
<1> Budowle B., Allard M.W., Wilson M.R., Chakraborty R. Forensic and mitochondrial DNA: application, debates and foundations // Annu. Rev. Genom. Hum. Genet., 2003. V. 4. P. 199.
9.4. Технические ошибки
Причиной неверных результатов может стать техническая ошибка из-за перепутывания объектов исследования вследствие их неправильной маркировки, внесения в пробирку ДНК другого лица, ошибок при внесении данных в компьютер. Такие ошибки обусловлены пресловутым "человеческим фактором". Автоматизация снижает риск технических ошибок пропорционально степени исключения ручного труда из процедуры, не сводя его, однако, к нулю, так как даже при практически полной роботизации ошибка может произойти на этапе исходной постановки проб. Перепутывание объектов может произойти еще до того, как объекты поступят в экспертную лабораторию - на этапе изъятия следов с места происшествия, получения сравнительных образцов. Практике такие случаи известны. Так, в зарубежной прессе сообщалось о перепутывании полицией образцов, взятых в связи с делом Совела, обвинявшегося в 11 убийствах (Кливленд, США) <1>.
--------------------------------
<1> DNA left untested in case linked to Ohio killings // Хаффингтон Пост 17 июня 2011 г.; http:// www.huffingtonpost.com/ huff-wires/ 20110617/ us-cleveland-bodies-found-rape.
С тем чтобы не пропустить техническую ошибку, в лаборатории должна быть налажена надежная система контроля за результатами исследования, причем внимание должно быть уделено не только правильности выполнения исследования, но и правильности его оформления. Минимизировать риск ошибки позволяет дублирование исследования, особенно если это осуществляется разными экспертами.
В 2002 г. было сообщено о технической ошибке, которая произошла в лаборатории полиции Лас Вегаса <1>. У Лазаро Сотолюссона и Джозефа Копполы, находившихся в одной камере, были взяты на анализ образцы ДНК. Исследование было проведено правильно, однако при внесении полученных профилей ДНК в компьютер лаборант перепутал фамилии, указав профиль ДНК Сотолюссона под фамилией Копполы, а профиль ДНК Коппола - под фамилией Сотолюссона. При проведении компьютерного поиска на предмет совпадения с базой данных по нераскрытым преступлениям профиль, ошибочно обозначенный как профиль ДНК Сотолюссона, совпал с профилем ДНК, полученным в связи с двумя нераскрытыми половыми преступлениями в отношении несовершеннолетних, совершенными в 1998 и 1999 гг. Вероятность случайного совпадения составила 1:600 млрд.
Дата добавления: 2019-02-12; просмотров: 151; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!