Определение белков, содержащих ароматические аминокислотные кольцами при помощи Ксантопротеиновой реакции



Принцип метода: при добавлении к раствору белка концентрированной азотной кислоты белок выпадает в осадок, который при нагревании растворяется и жидкость окрашивается в желтый цвет.

Оборудование: пробирки, штатив для пробирок, спиртовая горелка, спички.

Материалы для исследования и реактивы: молоко, HNO3.

Последовательность определения: в колбу отмеривают 20 мл исследуемого молока, 1-2 капли HNO3 и тщательно перемешивают. Затем осторожно нагревают содержимое в пробирке при помощи спиртовой горелки. При нагревании раствор и выпавший белый осадок или муть от свернувшегося белка окрашиваются в ярко-желтый цвет при наличии ароматических аминокислот. Обычно процесс идет при нагревании, но если концентрация белка достаточна высока, то можно обойтись и без него. [2]

 

 

Определение органолептических свойств молока

Исследуемое молоко Внешний вид Цвет Запах Вкусовые качества
Домашнее коровье Однородная жидкость, осадок, загрязнения и примеси отсутствуют Белое Нет Сладкое
Домашнее козье Однородная жидкость, наличие небольшого осадка, загрязнения и примеси отсутствуют Белое с желтоватым оттенком Кисловатый Слабо выраженный кисловатый привкус
Козье промышленного производства «Село Зеленое» Однородная жидкость, осадок, загрязнения и примеси отсутствуют Белое с желтоватым оттенком Кисловатый Сильно выраженный кисловатый привкус
Коровье «Село Зеленое» Однородная жидкость, осадок, загрязнения и примеси отсутствуют Белое Нет Сладкое
«Варвара Краса» Однородная жидкость, осадок, загрязнения и примеси отсутствуют Белое Нет Сладкое

Для выявления органолептических свойств исследуемых проб молока мы определили внешний вид молока, его цвет, запах и вкусовые качества. Результаты вы можете увидеть в таблице ниже:

 

 

Определение качества молока

Определение белка в молоке методом формольного титрования

Так как у нас был 10% раствор формалина, а не 40 %, то мы рассчитали по данной пропорции объем формалина, который нам потребуется прилить к молоку:

40% - 10 мл

10% - х мл

Х= 40 мл

Также вместо NaOH мы взяли KOH, так как указанного в методике NaOH в сухом веществе для приготовления раствора заданной концентрации у нас не оказалось. Изучив методику данного эксперимента из несколько источников, нам удалось выяснить, что для титрования подойдет любая щелочь. [15]

1) В колбу вместимостью 100 мл отмерили 20 мл домашнего козьего молока, 10-12 капель 2% - ного раствора фенолфталеина и титровали 0,1 Н раствора КOH до появления розовой окраски соответствующей цвету эталона. Затем внесли пипеткой 40 мл нейтрализованного 10% -ного формалина и вновь протитровали 0,1 н раствором КOH до окраски эталона. Суммарное количество щелочи пошедшее на титрование – 37 мл. Массовая доля белка в молоке = 37 мл*0,959 = 35,483 мл (Приложение 7) 

2) В колбу вместимостью 100 мл отмерили 20 мл козьего молока промышленного производства, 10-12 капель 2% - ного раствора фенолфталеина и титровали 0,1 Н раствора КOH до появления розовой окраски соответствующей цвету эталона. Затем внесли пипеткой 40 мл нейтрализованного 10% -ного формалина и вновь протитровали 0,1 н раствором КOH до окраски эталона. Суммарное количество щелочи пошедшее на титрование – 19 мл. Массовая доля белка в молоке = 19 мл*0,959 = 18,221 мл (Приложение 8) 

3) В колбу вместимостью 100 мл отмерили 20 мл домашнего коровьего молока, 10-12 капель 2% - ного раствора фенолфталеина и титровали 0,1 Н раствора КOH до появления Затем внесли пипеткой 40 мл нейтрализованного 10% -ного формалина и вновь протитровали 0,1 н раствором KOH до окраски эталона. Суммарное количество щелочи пошедшее на титрование – 22 мл. Массовая доля белка в молоке = 22 мл*0,959 = 21,098 мл (Приложение9) 

4) В колбу вместимостью 100 мл отмерили 20 мл коровьего молока «Село Зеленое», 10-12 капель 2% - ного раствора фенолфталеина и титровали 0,1 Н раствора КOH до появления розовой окраски соответствующей цвету эталона. Затем внесли пипеткой 40 мл нейтрализованного 10% -ного формалина и вновь протитровали 0,1 н раствором КOH до окраски эталона. Суммарное количество щелочи пошедшее на титрование – 6 мл. Массовая доля белка в молоке = 6 мл*0,959 = 5,754 мл (Приложение 10) 

5) В колбу вместимостью 100 мл отмерили 20 мл молока «Варвара Краса», 10-12 капель 2% - ного раствора фенолфталеина и титровали 0,1 Н раствора КOH до появления розовой окраски соответствующей цвету эталона.  Затем внесли пипеткой 40 мл нейтрализованного 10% -ного формалина и вновь протитровали 0,1 н раствором КOH до окраски эталона. Суммарное количество щелочи пошедшее на титрование – 12 мл. Массовая доля белка в молоке = 12 мл*0,959 = 11,508 мл (Приложение 11) 

 


Дата добавления: 2018-11-24; просмотров: 312; Мы поможем в написании вашей работы!

Поделиться с друзьями:






Мы поможем в написании ваших работ!