Б) Количественное определение белка
Ход работы:
1) В 5 пробирок вносят по 2 мл дистиллированной воды. В первую приливают 2 мл мочи, перемешивают и переносят 2 мл полученной смеси во вторую пробирку и т.д. Из пятой пробирки берут 2 мл смеси и отбрасывают, таким образом, получают пробы мочи с разведением в 2, 4, 8, 16 и 32 раза.
2) В другие 5 пробирок наливают по 1 мл реактива Ларионовой. Затем осторожно, по стенке наслаивают такое же количество мочи. Отмечают, в какой пробирке между 2-ой и 3-ей минутами появилось белковое кольцо.
3) Чтобы вычислить содержание белка в исследуемой моче, необходимо 0,033 г/л умножить на степень разведения в этой пробирке.
Результат анализа:
Опыт №2.Обнаружение сахара в моче.
В моче здорового человека глюкоза присутствует в виде следов. Выделение с мочой больших количеств глюкозы (глюкозурия) обусловлено либо повышением содержания сахара в крови, либо пропускной способностью почек. Стойкое повышение сахара в моче наблюдается при диабете (в тяжелых случаях доходит до 80-100 г/л). Гликозурия, обусловленная нарушением пропускной способностью почек, называется почечной и наблюдается при введении в организм больших количеств алкоголя, опиума, адреналина, окиси углерода (II), хлороформа и др. в-в. Для обнаружения сахара в моче пользуются пробами Троммера или Фелинга.
Ход работы:К 5-6 каплям реактива Фелинга добавляют 5-6 капель исследуемой мочи, жидкость перемешивают и нагревают до начала кипения (не кипятить!). В присутствии глюкозы выпадает желтый осадок гидрата закиси меди или красный осадок закиси меди. (Возможно изменение цвета без осадка).
|
|
|
Результат анализа:
Опыт №3. Обнаружение кетоновых тел в моче.
К кетоновым телам относятся ацетон, ацетоуксусная кислота, оксимасляная кислота. В норме с мочой выделяется 0,05 г за сутки кетоновых тел. Повышение выделения кетоновых тел из организма (кетонурия) наблюдается при острых лихорадочных процессах (у детей при скарлатине и кори), при диабете, раке, цинге, голодании, при расстройствах пищеварения.
Ход работы:Проба Легаля: К 10 каплям мочи добавляют 1-2 капли 5 % раствора нитропруссида натрия и 3-4 капли 10 % раствора NaOH. Появляется оранжево-красное окрашивание. Добавляют 5-6 капель концентрированной уксусной кислоты; в присутствии ацетоновых тел возникает вишнево-оранжевое окрашивание.
Результат анализа:
Опыт №4. Обнаружение кровяных пигментов.
При нарушении целостности кровеносных сосудов мочевых путей появляется в моче кровь (гематурия). При тяжелых инфекционных заболеваниях, отравлениях и ожогах происходит разрушение эритроцитов, переход гемоглобина в плазму, а затем появление его в моче (гемоглобинурия). Моча при этом бывает окрашена в красный или кофейно-бурый цвет. В случаях гематурии и гемоглобинурии в моче содержится белок.
|
|
|
Ход работы:В пробирку наливают 10 капель мочи, кипятят и охлаждают. Добавляют равный объем раствора бензидина и несколько капель 3 % перекиси водорода. При наличии кровяных пигментов моча окрашивается в синий или зеленый цвет.
Результат анализа:
Опыт №5. Обнаружение желчных пигментов.
Желчные пигменты – билирубин, биливердин и др. появляются в моче при желтухе. Моча, содержащая желчные пигменты, имеет желтовато-коричневый или зеленый цвет (характерный признак желтухи).
Ход работы:В пробирку наливают 3-5 мл мочи и осторожно наслаивают 0,1 % спиртовой раствор йода. При наличии билирубина на границе между объемами жидкостей образуется зеленое кольцо. При наличии в моче крови проба также положительна.
Результат анализа:
Вывод:
Дата: Подпись преподавателя:
ПРАКТИЧЕСКОЕ ЗАНЯТИЕ
Контрольная работа Биохимия органов и тканей
Вопросы для подготовки к занятию:
- Молекулярные механизмы детоксикационной функции печени
- Молекулярные механизмы трансформации лекарственных веществ
- Биохимические механизмы патогенеза печеночной недостаточности и печеночной комы. Биохимические методы диагностики поражений печени
- Моча, общие свойства. Химический состав мочи
- Патологические компоненты мочи. Клинико-диагностическое значение биохимического анализа мочи
- Биохимические механизмы возникновения и проведения нервного импульса. Молекулярные механизмы синаптической передачи
- Нейромедиаторы: ацетилхолин, катехоламины, серотонин, ГАМК. Синтез и катаболизм в нервной ткани, функции
- Энергетический обмен в мышцах. Источники АТФ, роль креатинфосфата, креатинфосфокиназы. Биохимия мышечного утомления
- Клетки соединительной ткани, особенности метаболизма. Химический
состав межклеточного вещества - Коллаген, эластин – особенности обмена, роль аскорбиновой кислоты
- Белково-углеводные комплексы соединительной ткани.
Протеогликаны, гликопротеины - особенности синтеза и распада, роль
в организме - Структурная организация межклеточного матрикса.
ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА 16
|
|
|
Дата добавления: 2018-05-12; просмотров: 455; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!