Тема: Обмен простых белков. Общие пути обмена аминокислот
Задания для подготовки к занятию:
1. Напишите формулами реакции трансаминирования между следующими парами аминокислот и a-кетокислот:
А) Глу + Пируват ®
Б) Глу + Оксалоацетат ®
2. Напишите названия продуктов, образующихся в реакциях:
А)
Б)
3. Напишите полное название ферментов по обратной реакции:
А)
Б)
4. Назовите вид дезаминирования аминокислот:
| А. Ала | 1. Прямое окислительное |
| Б. Гис | 2. Прямое неокислительное |
| В. Тре | 3. Непрямое |
| Г. Глу | |
| Д. Фен |
5. Напишите названия коферментов и соответствующих витаминов, необходимых для осуществления реакций непрямого дезаминирования:
А)
Б)
6. Чем определяется центральная роль глутаминовой кислоты в промежуточном обмене аминокислот?
7. Назовите конечные продукты азотистого обмена, которые выводятся из организма:
8. Назовите процессы – источники аммиака в организме:
9. На каких клетках прежде всего сказывается токсическое действие аммиака? Каковы механизмы токсического действия аммиака?
10. Перечислите способы обезвреживания аммиака в организме:
в мозге:
в мышцах:
в печени:
в почках:
11. Напишите суммарное уравнение синтеза мочевины. Сколько моль АТФ требуется для синтеза 1 моль мочевины. Напишите реакции, идущие с затратой энергии (АТФ), укажите ферменты.
12. Проследите путь азота аминогруппы аланина в мочевину, составив схему:
Ала ® 1 ® 2 ® 3 ® Мочевина
1.
2.
3.
13. При нарушениях орнитинового цикла в крови повышается содержание:
|
|
|
А. Аланина
Б. Орнитина
В. Глутамата (глутаминовой кислоты)
Г. Глутамина (амида глутаминовой кислоты)
Д. Аммиака
ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА № 11
Тема: Количественное определение активности аланинаминотрансферазы (АлАТ) в сыворотке крови
Цель: Изучить активность аланинаминотрансферазы (АлАТ) в сыворотке крови, ее значение для диагностики гепатита.
Принцип метода: Аминотрансферазы или трансаминазы катализируют межмолекулярный перенос аминогруппы с амнокислот на кетокислоты. Коферментом трансаминаз является фосфопиридоксаль, который служит непосредственным переносчиком аминогрупп с аминокислоты на кетокислоту. АлАТ катализирует реакцию переаминирования между аланином и a-кетоглутаровой кислотой:
| α-кетоглутарат | Аланин | Глутамат | пируват |
По количеству образовавшейся пировиноградной кислоты можно судить об активности фермента. Количество пировиноградной кислоты определяется колориметрическим путем по цветной реакции с 2,4-динитрофенилгидразином, при которой развивается красно-бурое окрашивание:
| Пируват | 2,4-ДНФГ | 2,4-ДНФ-гидразон пирувата |
Повышение активности АлАТ наблюдается при заболеваниях печени, а повышение активности АсАТ – при патологии сердечной мышцы.
|
|
|
Активность АлАТ в норме составляет 28 – 190 нмоль/с×л
Схема постановки опыта
| Контрольная проба | Опытная проба | |
| Реагент 1 (АлАТ, субстрат), мл | 0,25 | 0,25 |
| Дистиллированная вода, мл | 0,05 | – |
| Сыворотка, мл | – | 0,05 |
| Перемешать и инкубировать 30 мин | ||
| Реагент 2 (динитрофенилгидразин), мл | 0,25 | 0,25 |
| Перемешать и оставить при комнатной температуре на 20 мин | ||
| NaOH (С = 0,4 моль/л), мл | 2,5 | 2,5 |
Перемешать и через 10 минут измерить оптическую плотность пробы против контрольной пробы при длине волны 540 нм, кювета с толщиной слоя 5 мм. Активность АлАТ в опытной пробе определить по калибровочному графику в нмоль/с×л.
Результат анализа:
Вывод:
Дата: Подпись преподавателя:
ЛАБОРАТОРНОЕ ЗАНЯТИЕ 5
Дата добавления: 2018-05-12; просмотров: 561; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!