Схема окраски препаратов, принятая в Государственном онкологическом институте имени П. А. Герцена.
Отобранный для окраски препарат-мазок после неполного подсыхания на воздухе погружается в фиксатор, составленный из равных объемных частей
абсолютного этилового спирта и эфира, на 15 минут. Фиксированный препарат окрашивается по приводимой ниже схеме.Примерная схема обработки цитологического материала по данным института им П.А.Герцена.
1.спирт этиловый 70% 10-15 мин
2. спирт этиловый 50% 10-15 мин
3.вода дистиллиров. 10-15 мин
4.гематоксилин по Эрлиху 10-15 мин
5.соляная кислота 0,5% водный раствор 1 сек.
6.вода дистиллиров. 1 мин
7.вода дистиллиров,с добавление щелочи 1 мин
8. вода дистиллиров. 1 мин
9.спирт этиловый 50% 2 мин
10. спирт этиловый 70% 2 мин
11. спирт этиловый 80% 2 мин
12. спирт этиловый 95% 2 мин
13.эозин 0,5% спиртовый 2 мин
14. спирт этиловый 95% 2 мин
15. спирт этиловый 95% 2 мин
16. спирт этиловый 95% 2 мин
1). В каждый сосуд одновременно может быть погружено несколько стекол при условии несоприкосновения нанесенного на них материала.
2). Препараты задерживаются в сосудах на указанное время только там, где оно обозначено, в остальных лишь прополаскиваются качательными движениями. При необходимости можно задержать препарат в 96° спирте перед окраской эозином и после нее. Из последнего сосуда препарат должен выходить без остатков излишнего эозина (узнается по бесцветности стекающих с препарата капель спирта). Спирт должен меняться по мере насыщения его краской или при ослаблении его крепости в результате заноса вместе с препаратом воды. Вода меняется ежедневно. Краска гематоксилин периодически профильтровывается через бумажный фильтр и по мере надобности дополняется из запасного раствора.
|
|
|
3).Для подщелачивания воды служит насыщенный раствор углекислого лития или аммиак из расчета 3 капли на 100 мл воды.
4) Приготовление краски гематоксилин по Эрлиху. В широкогорлую склянку помещают: гематоксилина 2 г, абсолютного спирта 100 мл, глицерина 100 мл, дистиллированной воды 100 мл, ледяной уксусной кислоты 10 мл; смешивают, после чего прибавляют толченые калийные квасцы в избытке (примерно 3 г). Горло склянки закрывают марлей, склянку оставляют на свету до созревания краски (примерно 14 дней) при частом взбалтывании. Созревший раствор имеет ароматичный некислый запах и красно-фиолетовый цвет. Созревший гематоксилин закрывают плотной пробкой и держат в шкафу. Для работы служит профильтрованный раствор созревшего гематоксилина.
Схема окраски препаратов, принятая в Киевском рентгено-радиологическом и онкологическом институте (по прописи Л. К. Куницы).
После фиксации препарат промыть 95° этиловым спиртом и затем дистиллированной водой. Красить гематоксилином в течение 3—8 минут, промыть дистиллированной водой, обработать 0,5% водным раствором соляной кислоты в течение 2—4 минут. Промыть дистиллированной водой. Опустить на минуту в дистиллированную воду, подщелоченную 3 каплями насыщенного раствора углекислого лития, промыть дистиллированной водой. Обезводить мазок в 95° этиловом спирте, наливая спирт пипеткой на препарат. Красить в краске № 1 оранжевая в течение минуты, наливая ее на препарат. Промыть 95° спиртом. Красить составной краской № 2 в течение
|
|
|
минуты. Промыть спиртом, красить в краске № 3 в течение 1—2 минут. Промыть спиртом и промокнуть препарат фильтровальной бумагой. Погрузить в ксилол или толуол для просветления. Покрыть препарат канадским бальзамом и накрыть покровным стеклом.
Дата добавления: 2015-12-17; просмотров: 9; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!