Окраска ДНК и РНК метиловым зеленым пиронином по Браше.
Метиловый Зеленый (Methyl Green) основной краситель, используемый для окрашивания хроматина и - совместно с пиронином - для дифференцированного окрашивания молекул РНК и ДНК, которые соответственно приобретают красный и зеленый цвета. Относится к трифенилметановым красителям, синоним - двойная цинковая соль.
Уксуснокислый раствор метилового зеленого используется в биологии для быстрой окраски ядер простейших. В виде 1% водного раствора - краситель для одревесневших оболочек.
В иммунологии нашел широкое применение для подкраски препаратов в НСТ-тесте для контрастирования образовавшегося формазана в нейтрофилах и моноцитах.
Результат: структуры, содержащие ДНК, окрашиваются в голубовато-зеленый цвет, а содержащие РНК – в красный.
Контроль: предварительная обработка срезов рибонуклеазой или дезоксирибонуклеазой; в зависимости от фермента остаются неокрашенными участки, в которых локализуются РНК или ДНК.
Ткань печени (окраска метиловый зеленый-пиронин).
Наиболее распространенные методики обработки цитологического материала в специализированных лабораториях:
Из описанных в литературе методов окраски препаратов приводятся те, которые прошли испытание на большом материале во время практической работы,получили наибольшее признание в крупных лабораториях лечебных учреждений онкологического профиля.
Все объекты слизистого характера или с примесью слизи, как-то: мокрота, смыв («аспират») содержимого бронхов, выделения влагалища, отделяемое с шейки матки,цервикального канала и содержимое полости матки, отделяемое пищевода, красят гематоксилин-эозином (существует несколько модификаций).
|
|
|
Смывную жидкость с желудка, прямой кишки тоже красят гематоксилин-эозином, так как присутствие физиологического раствора в жидкости ухудшает результат окраски при употреблении азур-эозиновых смесей и часто делает невозможным цитологическое исследование.Материал, полученный при пункции, следует красить азур-эозиновой смесью (существует несколько модификаций) и только в случае, если пунктат имеет слизевидный характер (некоторые виды опухолей), для него следует сделать исключение и окрасить гематоксилин-эозином. Кроме того, материал, полученный из очагов некроза, должен быть распределен по стеклам с таким расчетом, чтобы иметь возможность 1—2 препарата окрасить и гематоксилин-эозином.Если получен обильный пунктат, следует приготовить запасные препараты для окраски другими способами и. в частности, для дополнительногобактериоскопического исследования. Когда имеется мало материала и приготовлен только один препарат, окрашенный азур-эозиновой смесью, а требуется дополнить данные цитологического исследования поиском туберкулезных бацилл, проводят обесцвечивание этого препарата в 2% спиртовом растворе соляной кислоты и далее красят по Циль-Нильсену. Выделения из соска молочной железы красят по способу окраски пунктатов, так же красят отпечатки с поверхности опухоли.
|
|
|
Дата добавления: 2015-12-17; просмотров: 67; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!