Специфическая индикация микроорганизмов и бактериальных токсинов

Организация и порядок проведения специфической индикации

Специфическая индикация представляет собой комплекс специальных лабораторных и организационных мероприятий, проводимых медицинской и ветеринарной службами для подтверждения факта применения БО или аварийного обсе­менения БА окружающей среды, а также определения (иден­тификации) при этом видов и поражающих свойств этих агентов.

Основу специфической индикации составляют лаборатор­ные методы экспресс-анализа, которыми в настоящее время являются:

- прямой метод флуоресцирующих антител (МФА) с контрастированием неспецифического свечения альбумином, меченным производными родамина;

- реакция непрямой гемагглютинации (РНГА) с эритро­цитарными иммуноглобулиновыми диагностикумами (МФА и РНГА - не единственные методы в экспресс-анализе, т. к. имеются и другие, достаточно перспективные методы микробиологического анализа, в том числе иммуноферментный, радиоиммунный и др. Однако эти методы еще нуждаются в доработке и их применение при индикации БА взамен обязательных (т.е. МФА и РНГА) пока преждевременно. До их официального утверждения их можно использовать в ходе анализа проб лишь в качестве дополнительных тестов параллельно с основными методами).

В зависимости от заданной специфичности диагностиче­ских препаратов МФА и РНГА позволяют определить род, группу, вид бактерий, риккетсий, вирусов, грибов и токсинов по таким характерным признакам, как антигенные свойства, морфология и локализация возбудителя в культурах клеток, в органах и тканях животных. В большинстве случаев эти свойства возбудителей могут быть выявлены с помощью МФА и РНГА в течение нескольких часов, а в результате предварительного обогащения - через 1-2 сут. Применяют­ся эти методы для специфической индикации в лабораториях медицинской и ветеринарной служб по единой схеме, пред­усматривающей два взаимодополняющих этапа исследова­ния:

- непосредственный анализ нативных материалов проб, для исследования с помощью экспресс-мето­дов;

- доставка;

- исследование этими же методами материалов тех же проб после их предварительного биологического обогащения.

 

Принципиальная схема анализа проб

 

 

Единая схема специфической индикации БА предполага­ет выявление и идентификацию в полном объеме различных видов бактерий, риккетсий, вирусов, хламидий, грибов и бак­териальных токсинов. Практически возможность выявления тех или иных видов микроорганизмов определяется наличи­ем в лаборатории соответствующих диагностических препа­ратов (люминесцирующих иммуноглобулинов, эритроцитар­ных иммуноглобулиновых диагностикумов и др.) и условий для проведения анализа как нативных проб, так и материа­лов после биологического обогащения на питательных сре­дах, в культуре клеток и других биологических системах.

При отсутствии условий для специфической индикации БА в полном объеме проводится исследование материалов в сокращенном объеме, предусматривающем экспресс-анализ доставленной пробы без ее биологического обогащения, т. е. исследования образца только на первом этапе схемы инди­кации.

Принято считать, что результаты специфической индика­ции, проводимой в полном объеме, выдаются в соответствии с этапами исследования в два срока: первый ответ - пред­варительный (или предупредительный) выдается при поло­жительном результате анализа после первого этапа исследо­вания через 2-3, максимум спустя 3-5 ч после начала ин­дикации. Предварительный отрицательный ответ - не вы­дается. Второй ответ окончательный. Он выдается через 48-72 ч после окончания второго этапа анализа. При поло­жительном окончательном ответе сообщается о наличии и видах в пробах БА. В отрицательном - указывается, на ка­ком сроке он выдан.

Результаты индикации, проводимой в сокращенном объ­еме, ограничивается, как правило, только предварительным положительным ответом. Окончательный ответ обычно не выдается. Сообщается лишь о продолжении исследований в лаборатории вышестоящего звена медицинской (ветеринар­ной) службы, где будет проведен полный объем индикации пробы. Организуют специфическую индикацию в Вооружен­ных Силах начальники медицинской (ветеринарной) служ­бы, а осуществляют ее микробиологические лаборатории са­нитарно-эпидемиологических учреждений военных округов и различных звеньев медицинской службы действующей ар­мии. К проведению специфической индикации БА могут прив­лекаться также отдельные лаборатории инфекционных и не­которых других госпиталей фронта и военных округов.

Микробиологические лаборатории санитарно-эпидемиоло­гических отрядов армии, фронта, военных округов и флотов, как правило, проводят индикацию БС в полном объеме, т. е. в два этапа.

СЭЛ дивизии, подвижные лаборатории, ОСЭР, а также гарнизонные лаборатории округов и им равные лаборатор­ные подразделения, имеющие ограниченные штатно-органи­зационные возможности, участвуют в сборе и сортировке проб и обеспечивают их пересылку соответственно в СЭО военных округов или армии и фронта для проведения инди­кации в полном объеме. Одновременно с этим они обязаны осуществлять индикацию проб в сокращенном объеме, т.е. проводить экспресс-анализ на первом этапе исследования пробы без ее биологического обогащения.

Объем индикационных исследований, равно как и их це­левая направленность, устанавливаются начальником меди­цинской службы объединения. Одновременно с этим опреде­ляется и порядок пересылки пробы в соответствующие сани­тарно-эпидемиологические учреждения, где анализ этих проб может быть продолжен по единой схеме в полном объеме.

Изменения объема исследований в зависимости от кон­кретной обстановки могут касаться как перечня подлежа­щих выявлению видов БА, так и этапов анализа проб. На­пример, в армейских и фронтовых лабораториях исследова­ния могут при необходимости ограничиться выявлением в пробах только контагиозных инфекций или возбудителей с коротким инкубационным периодом и т. п. В то же время при усилении силами и средствами войсковые и им равные лабораторные подразделения армии, фронта или военных округов могут расширить объем индикации и, кроме иссле­дования нативных материалов проб воздуха и содержимого ББП, обязательных для анализа по схеме в сокращенном объеме, они могут:

- проводить индикацию возбудителей контагиозных и природно-очаговых бактериальных инфекций в различных ма­териалах проб до и после их биологического обогащения;

- исследовать в полном объеме пробы на наличие в них ботулинического или других токсинов.

Анализ материалов, доставленных от больных людей и животных с отметкой о предполагаемом диагнозе, проводят целенаправленно экспрессными и (или) классическими мик­робиологическими методами исследования; во всех осталь­ных случаях материалы от больных подлежат исследованию по единой схеме специфической индикации БА.

При необходимости окончательного подтверждения отри­цательных результатов индикации БА, а также во всех слу­чаях, вызывающих сомнение или требующих контрольной проверки и выделения возбудителя в чистой культуре, проба подлежит дальнейшему исследованию с помощью общепри­нятых методов полного (классического) микробиологическо­го анализа в специализированных (бактериологических, ви­русологических или других) отделениях СЭО фронта и воен­ных округов или в соответствующих НИИ гражданского здравоохранения,

Организация специфической индикации в мирное, и осо­бенно в военное, время предусматривает строгое соблюдение принципа преемственности в работе лабораторий, который предполагает:

- единые способы отбора проб, а также единую схему и методы анализа;

- общую унифицированную (сквозную) нумерацию и обозначение материалов проб в зависимости от стадии их обработки и исследования;

- обязательную для лабораторий, проводящих специфи­ческую индикацию БА в сокращенном объеме, пересылку в кратчайшие сроки около 2/3 каждой пробы в вышестоящие учреждения, обеспечивающие исследование проб в полном объеме в соответствии с единой схемой;

- усиление лабораторий войскового звена и им равных, вынужденных проводить индикацию в полном объеме за счет дополнительных сил и средств;

- замену лабораторий, подлежащих передислокации вслед за войсками, новыми подразделениями с передачей им проб для продолжения индикации;

- организацию обязательной, четкой взаимной информа­ции между лабораториями различных звеньев медицинской и ветеринарной служб о ходе и результатах индикации.

При соблюдении принципа преемственности в работе ла­бораторий исчезает вынужденная необходимость в повторе­нии исследований, выполненных на более ранних этапах ана­лиза.

Специфическая индикация любых биологических агентов, проводимая в соответствии с единой схемой экспресс-анализа в два вышеперечисленных этапа, всегда предусматривает следующий порядок исследования:

- прием, сортировку и регистрацию проб;

- подготовку проб к исследованию и их первичную об­работку;

- концентрирование (при необходимости) возбудителей в пробе с помощью физических или иммуносорбционных спо­собов;

- исследование нативных материалов, пробы с помощью экспресс-методов анализа;

- биологическое обогащение пробы на питательных сре­дах в организме белых мышей и в культуре клеток;

- постановку биопробы на ботулинический и другие ток­сины;

- исследование с помощью экспресс-методов биологи­чески обогащенных материалов пробы.

Отбор и транспортировка проб

Квалифицированные отбор и транспортировка проб во многом определяют успешность проведения специфической индикации в объектах внешней среды и в материалах от лю­дей и животных.

Пробы отбирают при положительном результате неспе­цифической индикации или при внезапном появлении у лю­дей и животных острых инфекционных заболеваний.

Отбору подлежат:

- пробы воздуха в приземном слое атмосферы и в поме­щениях негерметичных объектов;

- осколки, оболочки и содержимое биологических бое­припасов;

- налеты порошкообразных веществ, капли жидкости и другие подозрительные объекты на боевой технике и местно­сти в непосредственной близости от предполагаемого места разрыва боеприпасов;

- смывы с открытых поверхностей вооружения и боевой техники или любых других предметов, находившихся при движении аэрозольного облака в непосредственной близости от источника его генерации;

- пробы воды из открытых водоемов, колодцев, подозри­тельной на заражение;

- насекомые и клещи, а также трупы животных (грызу­нов), внезапно появившиеся в расположении войск вблизи обнаруженных контейнеров;

- смывы со слизистых оболочек носа и носоглотки, а так­же кожных покровов людей, находившихся без защиты в зо­не распространения биологического аэрозоля;

- кровь, выделения и испражнения и другие материалы от внезапно заболевших лиц, а также кусочки внутренних органов и тканей трутов людей, погибших от инфекционных заболеваний;

- материалы от заболевших животных и их трупов. В первую очередь, как наиболее представительные, отби­рают пробы воздуха приземных слоев атмосферы, осколки боеприпасов и смывы со слизистых оболочек и кожи людей в зоне биологического аэрозоля без средств защиты.

Пробы пищевых продуктов и фуража берут только при прямом подозрении на заражение.

Отбор проб для специфической индикации проводится с помощью табельных средств химической и бактериологиче­ской (биологической) разведки. Для отбора проб воздуха ис­пользуют автоматический сигнализатор примесей (АСП), пробы из объектов внешней среды отбирают, используя ком­плект отбора проб (КПО-1), войсковой прибор химической разведки (ВПХР) и медицинский прибор химической развед­ки (МПХР). Медицинская служба оснащена медицинским комплектом отбора и пересылки проб (МКОП), состоящим из четырех секций-наборов для взятия материалов от за­раженных и больных людей; из объектов внешней среды; пи­щевых продуктов и воды, а также для сбора кровососущих членистоногих-переносчиков.

Пробы воздуха отбирают с помощью сепараторов-пробо­отборников аэрозолей. Сепаратор-пробоотборник вводится в действие автоматически после срабатывания прибора неспе­цифической индикации, ведущего анализ воздуха в следящем режиме. По завершении цикла отбора пробы сепаратор из­влекают из прибора, закрывают заглушкой, помещают в пла­стиковый мешок и доставляют в термоконтейнере в санитар­но-эпидемиологическую лабораторию.

Мелкие осколки и оболочки боеприпасов с порошкообраз­ным налетом или каплями жидкости собирают пинцетом и укладывают в пластиковые мешочки или баночки, имеющие­ся в КПО-1 и МПХР или в мягкие емкости с широкой горло­виной из состава МКОП.

Порошкообразный налет и капли жидкости, содержащие­ся на крупных осколках и почве вокруг осколков, осторожно собирают влажным, тщательно отжатым тампоном и поме­щают его в пробирку с небольшим объемом изотонического раствора хлорида натрия.

Отбор проб с открытых поверхностей вооружения и тех­ники, палуб и надстроек кораблей, со стен зданий и других сооружений, расположенных перпендикулярно движению аэрозольного облака, проводят путем смывов. Для этого влажным тампоном на стержне, вмонтированном в пробирку из МПХР и МКОП, протирают поверхности, на которых об­наружены капли жидкости или порошкообразный налет. Затем тампон помещают обратно в пробирку.

При отсутствии капель или порошкообразных налетов смывы производят с поверхности площадью не менее 100см².

Образцы растительности срезают скальпелем или ножни­цами, имеющимися во всех наборах для отбора проб. Сре­занные листья, траву переносят пинцетом в пластиковый ме­шочек, который затем герметизируют.

Отбор проб воды проводят:

- из шахтных колодцев после тщательного перемешива­ния в них воды;

- из открытых водоемов (пруд, озеро, река) - с поверх­ности и придонного слоя у берега.

Образцы воды (0,5-1 л) либо сразу помещают в пласти­ковые мешки с завинчивающейся горловиной из МКОП или в любую стерильную подручную тару (бутылки, флаконы), либо фильтруют непосредственно на месте взятия пробы че­рез фильтры с помощью входящих в МКОП устройств. В этом случае фильтры помещают в пластиковый мешок и герметизируют.

Сбор переносчиков в местах падения контейнеров произ­водят с помощью марлевого сачка, флажка-полотенца и пин­цета.

Летающих насекомых вылавливают марлевым сачком или с помощью липкой бумаги. Комаров собирают с помощью эксгаустера, имеющегося в МКОП. Для этого воронкой экс­гаустера накрывают сидящего комара и затем с помощью баллона всасывают его в емкость. При отсутствии эксгаусте­ра комаров собирают непосредственно в пробирку, прикры­вая ею севшего на человека комара, или отлавливают мар­левым сачком,

Слепней вылавливают в местах падения контейнеров мар­левым сачком. Пойманных слепней пересаживают в пробир­ки с небольшим комочком ваты, смоченной водой.

Блох вылавливают на открытой местности энтомологиче­ским сачком; в жилых помещениях собирают на липкую бу­магу или в кюветы с водой; из нор добывают с помощью ре­зинового шланга, обшитого фланелью; с трупов грызунов вычесывают, предварительно выдерживая их в парах хлоро­форма для наркотизации насекомых.

С кожных покровов человека и животных клещей снима­ют пинцетом с резиновыми кольцами на концах. С расти­тельности их собирают, протаскивая фланелевый флажок. Собранных переносчиков помещают в полиэтиленовые про­бирки с увлажненными полосками фильтровальной бумаги.

Для отлова грызунов используют табельные и подручные средства (ловушки, капканы и т. д.). Собранные трупы гры­зунов упаковывают в полиэтиленовые мешочки.

Продукты питания (фураж) подлежат исследованию только при прямом подозрении на их бактериальную зара­женность. При отборе проб обращают внимание на наличие порошкообразных веществ, капель жидкости, а также це­лость упаковки.

Взятие проб из незакрытых герметично емкостей (бочек, ящиков) следует производить небольшими порциями (по 50-100г) из поверхностных слоев продуктов независимо от их консистенции, т.е. как жидких и полужидких, так и сы­пучих (зерно, мука, сахар) и твердых (хлеб, жиры, овощи).

От больных (инфицированных) людей для исследования берут смывы со слизистых оболочек и кожных покровов, кровь, содержимое лимфатических узлов (бубонов), отделяе­мое язв, мокроту, испражнения, рвотные массы, промывные воды и т. д. Все материалы отбирают в стерильную посуду.

Мазки из носа, носоглотки, с кожных покровов берут влажным тампоном. Одновременно изотоническим раствором хлорида натрия тщательно ополаскивают носоглотку.

Кровь берут шприцем из локтевой вены (10 мл) в сте­рильную пробирку. Для предупреждения свертывания крови добавляют гепарин из расчета 0,01 мг на 1 мл крови. Непо­средственно у постели больного готовят 3-4 мазка крови на предметных стеклах.

Содержимое бубона берут шприцем. Содержимое папул и пустул берут после прокалывания их иглой. Одновременно готовят мазки.

Испражнения собирают в свежевымытые подкладные суд­на. Затем материал ложечкой переносят в пробирку.

В качестве трупного материала выбирают для исследова­ния участки органов с признаками поражения (кусочки моз­га, легких, печени, селезенки), а также кровь.

Аналогичные материалы берут от пораженных животных и их трупов.

Упакованные в полиэтиленовые пробирки, пакеты и ме­шочки материалы размещают в пластиковом мешке, плотно завязывают и пересылают в лабораторию. Поскольку резуль­таты специфической индикаций во многом зависят от своев­ременного начала анализа, сроки поставки проб в лабораторию должны быть минимальными: не превышать 1,5-2,5 ч от момента взятия материала. Для сохранения в пробе воз­будителей заболеваний в жизнеспособном состоянии все соб­ранные материалы следует транспортировать в термоконтей­нерах, обеспечивающих поддержание температуры не выше 0-4° С.

Пробы направляют в лабораторию вместе с направлени­ем, в котором указывают: куда и кому направляются пробы (проба), что они (она) собой представляют; время взятия проб и их количество в общей таре; желательный объем ис­следований (в сокращенном или полном объеме индикации); адрес, по которому следует сообщить результаты специфиче­ской индикации. Представляют также данные о месте взятия проб (район расположения войск, населенный пункт); время и способ применения биологических средств; основание для отбора проб; результаты обследования района на отравляю­щие вещества.

Во избежание инфицирования отбор и доставку проб в лаборатории личный состав должен проводить в противога­зах и защитной одежде в строгом соответствии с правилами, предписанными для работы с материалом, зараженным воз­будителями особо опасных инфекций.

 

---

Дата добавления: 2021-11-30; просмотров: 29; Мы поможем в написании вашей работы!

Поделиться с друзьями:

---

---

Мы поможем в написании ваших работ!