Лабораторная диагностика морганелл
По современной классификации бактерии рода Morganella представлены единственным видом Morganella morganii . Естественным местом их обитания является кишечный тракт человека, млекопитающих животных, рептилий. В подавляющем большинстве случаев морганеллы обладают патогенными свойствами и наряду с другими представителями семейства Enterobacteriaceae вызывают кишечные и септические заболевания у человека, молодняка сельскохозяйственных животных, служат возбудителями вторичных оппортунистических инфекций и часто выделяются при бактериемии, инфекциях дыхательных путей, мочевых путей, из раневых повреждений.
Из сельскохозяйственных животных патогенность морганелл убедительно доказана в отношении телят и поросят. Имеются сообщения о выделении патогенных культур морганелл из внутренних органов павших птиц. Парентеральное введение морганелл белым мышам, крысам, хомякам, морским свинкам, кроликам, котятам вызывает гибель перечисленных животных вследствие развития у них сепсиса.
У молодняка сельскохозяйственных животных болезнь часто протекает в форме смешанной инфекции, когда в период массовых заболеваний с симптомокомплексом диареи наряду с морганеллой выделяют других представителей энтеробактерий, корона-, ротавирусы, псевдомонасы, клостридии и др. Наряду с этим известны случаи, когда кишечную инфекцию или сепсис вызывают одни морганеллы без участия других микроорганизмов.
|
|
|
Лабораторная диагностика морганелл основана на результатах бактериологического и серологического исследований.
Бактериологическое исследование включает в себя обнаружение возбудителя в исходном материале методом световой микроскопии, выделение чистой культуры и идентификацию возбудителя по культурально-морфологическим, ферментативным, серологическим и патогенным свойствам.
Бактериологическое исследование
Материал для исследования. Свежие трупы мелких животных целиком, голова, трубчатая кость, доля печени с желчным пузырем, селезенка, почка, сердце, перевязанное лигатурой вблизи аорты, брыжеечные лимфоузлы, отрезок пораженного участка кишечника, перевязанный с двух сторон лигатурой.
Для прижизненной диагностики в лабораторию направляют фекалии, которые должны быть доставлены в нее в течение 3-4 часов после взятия материала. В противном случае пробы фекалий консервируют стерильным 30%-ным водным раствором глицерина в соотношении 1:2.
Микроскопическое исследование исходного материала. Из поступившего материала готовят мазки-отпечатки, окрашивают по Граму и микроскопируют. Морганеллы являются грамотрицательными, прямыми палочками с закругленными концами. Диаметр клеток 0,6-0,9 мкм, длина 1,5-3,0 мкм.
|
|
|
Выделение и идентификация культур морганелл
Культивирование. Морганеллы являются факультативными анаэробами, обладающими и дыхательными и бродильными типами метаболизма. Хемоорганотрофы. Размножаются при температурах от 12 до 43° С. Оптимальная температура роста 37° С, рН 7,0-7,4. К питательным средам неприхотливы и хорошо растут на всех простых средах.
Пробы фекалий или содержимое кишечника суспендируют в соотношении 1:20-1:30 в стерильном физиологическом растворе. Приготовленные суспензии отстаивают 10-15 мин при комнатной температуре для осаждения крупных частиц и делают высевы надосадочной жидкости на среды Эндо, Плоскирева или висмут-сульфит агар. Из другого патологического материала делают высевы в МПБ, на МПА, агар Эндо, Плоскирева или висмут-сульфит агар. Посевы инкубируют 18-24 часа при 37-38° С. По истечении указанного срока посевы просматривают, на каждой из чашек отбирают по 1-2 колонии, характерных для морганелл, и отсевают их на скошенный МПА в пробирках. При наличии роста только в МПБ и обнаружении в культуре грамотрицательных с закругленными концами палочек, не образующих спор и капсул, культуру пересевают на упомянутые выше селективно-дифференциальные среды, с которых в дальнейшем производят отбор типичных колоний для дальнейшего изучения биологических свойств выделенных культур. В случае роста характерных для морганелл колоний в посевах из нескольких органов и тканей пересев делают с культур, полученных не менее чем из двух из них.
|
|
|
Характер роста морганелл на питательных средах. На плотных питательных средах (МПА, агаре Хоттингера) в течение 18-24 часов образуются округлые с ровными краями, выпуклые, с гладкой блестящей поверхностью, серовато-белые колонии диаметром 1-3 мм. На агаре Плоскирева колонии росинчатые, полупрозрачные, голубовато-серого цвета, ко 2—3-м суткам культивирования они приобретают серовато-белый цвет. На висмут-сульфит агаре колонии морганелл округлые, с ровным краем, гладкие, блестящие, более плоские, чем на МПА, имеют зеленовато-оливковый цвет. При многократных пересевах характерные S-формы колоний морганелл могут переходить в шероховатые R-формы из-за диссоциации культур.
В МПБ, бульоне Хоттингера, пептонной воде рост морганелл проявляется в виде равномерного помутнения среды с образованием легко разбивающегося при встряхивании осадка.
|
|
|
Морфология клеток морганелл в культуре. В мазках из культур морганеллы обнаруживают в виде грамотрицательных, прямых палочек с закругленными концами. Диаметр клеток 0,6-0,9 мкм, длина 1,5-3,0 мкм. Подвижны за счет перетрихиально расположенных жгутиков. Спор и капсул не образуют. В поле зрения располагаются одиночно, реже — попарно.
Идентификация морганелл по ферментативным признакам. Выделенные чистые культуры микроорганизмов с характерными для морганелл культурными, морфологическими и тинкториальными свойствами относят к роду Мorganella и виду M.morganii на основании изучения их ферментативных свойств (табл. 94).
Морганеллы образуют индол, не образуют сероводород, проба с метиловым красным положительная, реакция Фогеса-Проскауэра отрицательная, на агаре Симмонса с цитратом не растут, по лизиндекарбоксилазе и аргининдигидролазе отрицательные, дезаминируют фенилаланин и триптофан, декарбоксилируют орнитин, гидролизуют мочевину. Способны к росту в присутствии KCN. Из Сахаров и многоатомных спиртов катаболизируют с образованием кислоты и газа (иногда с задержкой его образования) только D-глюкозу и D-маннозу.
Если на этапе идентификации установлено, что M.morganii выделены из селезенки, крови сердца, костного мозга, головного мозга (не менее чем из двух любых перечисленных материалов), то эти микроорганизмы относят к патогенным, их этиологическую роль в заболевании считают установленной без изучения серологических свойств и постановки биопробы. В других случаях проводят дальнейшие исследования с целью определения патогенных свойств морганелл.
К факторам патогенности морганелл относят эндотоксин, действие которого не является специфичным и аналогично действию эндотоксинов других представителей энтеробактерий. Оно проявляется в отношении центральной нервной системы и кишечника (преимущественно толстого его отдела). Свойства образуемого морганеллами термолабильного экзотоксина изучены недостаточно. Большая часть патогенных штаммов морганелл продуцирует гемолизины, вызывающие лизис эритроцитов разных видов животных и человека. Проявлению патогенных свойств способствует и карбоксилазная активность этих бактерий.
Культуру выделенных морганелл относят к патогенной в случае установления ее принадлежности к одной из серогрупп, наиболее часто вызывающих заболевание у молодняка животных, или при положительном результате биопробы.
Дата добавления: 2020-04-25; просмотров: 204; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!