Реакция на ароматические аминокислоты
Для обнаружения в инсулине ароматических аминокислот (фенилаланин, тирозин, триптофан) используют ксантопротеиновую реакцию.
Проведение анализа
К 5 каплям 1 % раствора инсулина вносят 2 капли конц.HNO3, осторожно нагревают и наблюдают за появлением желтого окрашивания. При отсутствии желтого цвета добавляют еще 1‑2 капли конц.HNO3. Далее добавляют избыток 30 % раствора NаОН и наблюдают изменение окраски на оранжевую.
Реакции на серосодержащие аминокислоты
Принцип
Сульфгидрильные группы в инсулине подвергаются щелочному гидролизу с отщеплением серы в виде Na2S, который далее вступает в реакции: а) с ацетатом свинца дает черный или бурый осадок сульфида свинца; б) с нитропруссидом натрия дает соединение красно-коричневого цвета.
Проведение анализа
В две пробирки с 5 каплями раствора инсулина, добавляют по 5 капель 30 % раствора NaOH и кипятят 1‑2 минуты. Проводят реакции а) и б).
а) Реакция Фоля: к гидролизату добавляют 1 каплю раствора ацетата свинца и нагревают до кипения. Появляется бурый или чёрный осадок.
б) Реакция с нитропруссидом: к гидролизату добавляют 3 капли раствора нитропруссида натрия. Появляется красно-коричневая окраска.
Оформление работы
Приводят принципы методов, регистрируют результаты, делают вывод о наличии инсулина в исследуемом материале, указывают его значение в организме.
Вопросы для самоконтроля
1) Межклеточная коммуникация. Иерархия регуляторных систем организма, место гормонов, взаимосвязи. Понятие о системах эндо-, пара-, аутокринной регуляции.
|
|
|
2) Гормоны как первичные посредники. Разнообразие, классификации (по строению, по биологическим функциям) и характерные признаки гормонов.
3) Синтез белка и протеолиз в механизмах образования белково-пептидных гормонов. Построение, принципы получения гормонов белково-пептидной природы из предшественника проопиомеланокортина (ПОМК).
4) Реакции биосинтеза гормонов – производных аминокислот (катехоламины, тиреоиды) и холестерола (половые и кортикоидные стероиды, кальцитриолы).
5) Понятие о тканевых гормонах. Источники, причины и механизмы образования, функции. Биологически активные липиды.
6) Влияние систем гормонов и отдельных гормонов на различные виды обмена веществ и функции организма. Клетки-мишени и виды клеточной рецепции гормонов, рецепция каждого и механизм действия на клетку, гипо- и гиперфункция.
7) Причины возникновения гормональных заболеваний.
8) Направления использования гормонов в клинике.
ТЕМА 8.2.
Строение и роль биомембран.
Механизмы транспорта и рецепции
(семинар)
Актуальность
Функциональной единицей живого является клетка. Клеточной мембране принадлежит одно из ведущих мест в поддержании жизнедеятельности клетки, формировании адекватного клеточного ответа и адаптации к требованиям молекулярного окружения и организма в целом. Каждый внешний сигнал имеет конкретную направленность и поддерживается комплексом рецепторно-эффекторных механизмов, обеспечивающих совокупную результативность клеток органов и тканей. Наличие множества регуляторных молекул различной природы определяет разнообразие механизмов передачи гормональных и иных сигналов в клетку.
|
|
|
Биомембрана ‑ сложная высокоорганизованная полифункциональная двумерная система, состоящая из липидов, белков и углеводного компонента. Бислойность и пластичность структуры обеспечивают глицеро‑, сфингофосфолипиды и холестерол. Функциональность мембран зависит от поверхностных и трансмембранных белков и ферментов. Белково-углеводные компоненты плазмолеммы лежат в основе контактного и рецепторного аппарата клетки, нарушения которого ведут к изменению или недостаточности эффекта гормона (сахарный диабет II типа). Клеточная мембрана участвует в механизмах эндо‑ и экзоцитоза, трансмембранном переносе веществ – пути пассивного и активного транспорта.
|
|
|
Моделирование биомембран путем создания липосом, нагруженных лекарственными препаратами, находит применение в фармации и медицине.
Цель
Изучение химического строения и основных функций биомембран, механизмов транспорта веществ и рецепции регуляторных молекул различной природы.
Вопросы для самоподготовки
1) Разнообразие компонентов биомембран, межмолекулярные связи и взаимодействия в составе мембран.
2) Строение, свойства и функции мембранных липидов. Значение полиненасыщенных жирных кислот и холестерола. Анулярные липиды. Липидные якоря: происхождение и назначение.
3) Белки мембран, классификации по локализации и функциям.
4) Состав, локализация и назначение углеводного компонента мембран.
5) Липопротеины, гликопротеины и гликолипиды мембран.
6) Свойства и основные функции биомембран клетки. Асимметрия липидов клеточной мембраны, функциональное значение. Флиппазы.
7) Особенности плазматической мембраны клетки и мембран органелл: ядерной, митохондриальной, лизосомальной, микросомальной и шероховатой эндоплазматической сети. Маркёрные ферменты биомембран.
8) Биохимическое обеспечение механизмов трансмембранного переноса веществ: простой и облегченной диффузии, активного транспорта, эндо- и экзоцитоза. Каналы и поры.
|
|
|
9) Липосомы как модельная система биомембран, их применение в фармации и медицине.
10) Характеристика основных типов рецепторов плазмалеммы, обеспечивающих передачу гормонального сигнала в клетки-мишени.
11) Характеристика мембранных механизмов передачи гормонального сигнала в клетки-мишени через рецепторы:
I типа, обладающие ферментной активностью (рецептор инсулина),
II типа, образующие ионный канал (рецептор ацетилхолина),
III типа, использующие G‑белок (компоненты передающей системы, роль активирующей/ингибирующей a‑субъединицы G‑белка):
· аденилатциклазный механизм (и гормоны, использующие его),
· Са‑фосфолипидный механизм (и гормоны, использующие его).
12) Гуанилатциклазный механизм передачи сигнала: мембраносвязанный и растворимый рецепторы. Общая характеристика и виды гуанилатциклаз. Гормоны, использующие этот механизм.
13) Связь гуанилатциклазного механизма с синтезом NO, типы NO-синтаз, реакционноспособность и биологическое значение NO, способы утилизации.
14) Строение, источники, реакции синтеза вторичных посредников передачи гормонального сигнала: цАМФ, цГМФ, ИФ3, ДАГ, ионы Са2+, NO.
15) Характеристика цитозольно-ядерного механизма передачи гормональных сигналов в клетки‑мишени. Гормоны, использующие этот механизм.
16) Биологический смысл существования иерархии регуляторных систем, использующих различные механизмы передачи гормонального сигнала к компартментам клетки‑мишени.
Дата добавления: 2020-04-25; просмотров: 112; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!