Группы крови. Система АВ0. Факторы, определяющие групповую принадлежность крови. Методики определения групп крови.
Гемолиз, его виды. Осмотическая резистентность эритроцитов.
Гемолиз — разрушение оболочки эритроцитов, сопровождающееся выходом Hb в плазму (лаковая кровь).
Виды гемолиза:
1. Механический (in vitro при встряхивании крови в пробирке, in vivo иногда возникает при длительной ходьбе (маршевая гемоглобинурия), а также у больных с протезированием клапанного аппарата сердца и сосудов).
2. Термический (возникает при неправильном хранении крови — ее замораживании и последующем быстром размораживании. Внутриклеточная кристаллизация биологической воды приводит к разрушению оболочки эритроцитов).
3. Химический (in vivo под воздействием веществ, нарушающих фосфолипидную часть мембраны эритроцитов (эфир, хлороформ, бензол, ацетон, соединения анилина), in vitro под влияние кислот, щелочей, тяжелых металлов и др.).
4. Биологический. Под влиянием факторов биологического происхождения (гемолизины, яд змей, грибной яд, простейшие (молярийный плазмодий).
5. Осмотический (в гипотонических растворах).
В лабораторной практике используют определение осмотической резистентности эритроцитов (ОРЭ) по отношению к гипотоническим растворам хлорида натрия различной концентрации.
Различают:
Ø минимальную ОРЭ — концентрация раствора NaCl, при которой начинается гемолиз (0,46–0,48 % р-р NaCl). Гемолизируются менее устойчивые.
Ø максимальную ОРЭ — концентрация раствора NaCl, в котором гемолизируются все эритроциты (0,32–0,34 % р-р NaCl).
|
|
|
Осмотическая резистентность эритроцитов зависит от степени их зрелости и формы. Форма эритроцитов характеризуется соотношением между их толщиной и диаметром, что получило название индекса сферичности. В норме он равен 0,27–0,28.
При его повышении (при некоторых гемолитических анемиях) появляются шаровидные эритроциты (сфероидные). Их резистентность и продолжительность жизни снижается на 12–14 дней. Сфероидную форму приобретают эритроциты, завершающие жизненный цикл.
Молодые формы эритроцитов, поступающие из костного мозга в кровь, наиболее устойчивы к гипотонии. В особенности это относится к менее зрелым клеткам (ретикулоциты, полихроматофилы), для которых характерны уплощенная дисковидная форма и малый индекс сферичности.
Исследование ОРЭ проводят для диагностики гемолитических анемий.
6. Иммунный гемолиз — при переливании несовместимой крови или при наличии иммунных антител к эритроцитам.
7. Физиологический — гемолиз эритроцитов, закончивших свой срок жизни (в печени, селезенке, красном костном мозге).
Причины гемолиза в организме
1. Переливание несовместимой крови.
2. Сепсис, влияние гемолитических микроорганизмов.
|
|
|
3. Попадание в организм гемолитических ядов.
4. Отравление различными органическими и минеральными веществами.
5.Аутоимунные реакции.
Опасность гемолиза заключается в развитии комбинированного шока, а в последующем — острой и хронической почечной недостаточности. При массивном внутрисосудистом разрушении эритроцитов с выходом свободного гемоглобина в плазму гемоглобин начинает выделяться почками, что повреждает нефрон.
Скорость оседания эритроцитов (СОЭ)
Прибор Панченкова для определения СОЭ
Скорость оседания эритроцитов (СОЭ) является мерой оценки суспензионной устойчивости эритроцитов. Измерение величины СОЭ проводят в градуированных капиллярных пипетках, а для предотвращения свёртывания крови к ней добавляют трёхзамещённый цитрат натрия (так называемая цитратная кровь). В течение часа в верхней части капиллярной трубки появляется светлый столбик плазмы, высота которого в миллиметрах и является величиной СОЭ.
СОЭ в норме равна:
у мужчин 1–10мм/ч;
у женщин 2–15мм/ч;
У новорожденных 1–2мм/ч.
В условиях физиологической нормы скорость оседания эритроцитов невысока, что обусловлено преобладанием в плазме крови белков альбуминовой фракции. Альбумины являются лиофильными коллоидами, создают вокруг эритроцитов гидратную оболочку и удерживают их во взвешенном состоянии. Глобулины представляют собой лиофобные коллоиды, способствуют уменьшению гидратной оболочки вокруг эритроцитов и отрицательного поверхностного заряда их мембран, что ведет к усилению агрегации эритроцитов.
|
|
|
Сопротивление таких агрегатов трению меньше, чем отдельных эритроцитов, агрегаты быстрее оседают. В связи с этим важная роль в обеспечении скорости оседания эритроцитов (СОЭ) отводится соотношению альбуминовых и глобулиновых фракций крови, т.е. альбумин-глобулиновому (белковому) коэффициенту (БК). В крови величина БК в норме относительно постоянна и равна 1,5–2,3. Снижение БК, характерное для многих патологических состояний, может быть связано как с увеличением абсолютного количества глобулинов (при острых и хронических воспалительных процессах), так и с уменьшением абсолютного количества альбуминов (при циррозе печени, гепатите и других заболеваниях печени).
Факторы, влияющие на СОЭ.
Ø При травме, инфекциях, многих острых заболеваниях в течение нескольких часов в крови появляются так называемые белки острой фазы (воспаления), синтезируемые преимущественно в печени. К ним относятся C-реактивный, α1-антитрипсин, фибриноген, церулоплазмин и др. Увеличение содержания белков острой фазы в плазме крови (главным образом фибриногена) увеличивает СОЭ.
|
|
|
Ø На СОЭ влияет рН плазмы крови: при ацидозе отмечают снижение, при алкалозе — повышение.
Ø СОЭ уменьшается при увеличении количества эритроцитов (при эритремии, например, оседание эритроцитов может полностью прекратиться вследствие повышения вязкости крови). При анемиях СОЭ ускоряется.
Ø Повышенное насыщение эритроцитов гемоглобином ускоряет СОЭ.
Ø СОЭ повышается при интенсивной физической работе.
Ø Ускоряется СОЭ во 2-й половине беременности, вследствие увеличения количества фибриногена.
СОЭ представляет собой неспецифический показатель, свидетельствующий об изменении физико-химических свойств и состава крови. Зависимость СОЭ от большого количества факторов обусловливает диагностическую ценность данного теста только в комплексе с другими гематологическими показателями.
Группы крови. Система АВ0. Факторы, определяющие групповую принадлежность крови. Методики определения групп крови.
В истории немало случаев, когда человеку пытались перелить кровь от другого человека и даже животных. В большинстве случаев эти попытки заканчивались трагически. Но только в 1901 г. после открытия австрийским ученым К. Ландштейнером групп крови АВО (открыл I, II и III группы, удостоен Нобелевской премии) стало понятно, что кровь донора и реципиента должна быть совместима по антигенному фактору эритроцитов. Позднее (1907)чешский врач Я. Янский предложил выделять I, II, III и IV группы крови. Их открытия позволили широко применить в практической медицине переливание крови.
Было установлено, что мембрана эритроцитов человека является носителем более 300 антигенов, обладающих способностью вызывать против себя образование иммунных антител. Если соответствующие антитела попадают в кровь, развивается реакция взаимодействия между эритроцитарными антигенами и сывороточными антителами и происходит агглютинация (склеивание) эритроцитов.
Система AB0
В системе AB0 в соответствии с наличием на поверхности на поверхности эритроцитов агглютиногенов (антигенов) А и В выделено 4 группы крови, обозначаемых римскими цифрами I, II, III и IV. В плазме крови к агглютиногенам А и В могут содержаться антитела — агглютинины α и β. В норме у каждого человека отсутствуют агглютинины к соответствующим агглютиногенам. Содержание в крови разных групп системы AB0 агглютиногенов и агглютининов представлено таблице 3.
Серологический состав групп крови системы АВ0
| Группы | Эритроциты | Плазма или сыворотка |
| крови | Агглютиногены | Агглютинины |
| I (0) | 0 | a , b |
| II (A) | A | b |
| III (B) | B | a |
| IV (AB) | AB | 0 |
При переливании крови необходимо предотвратить ситуацию, когда в крови реципиента одновременно будут находиться и антигены, и антитела именно к этому антигену, т.е. возникнет ситуация несовместимости. Агглютинины являются g-глобулинами и имеют 2 центра связывания, что обеспечивает возможность образования мостика между двумя эритроцитами и, таким образом, вызывают склеивание (агглютинацию) эритроцитов, содержащих на мембране соответствующие агглютиногены. Агглютинация эритроцитов наблюдается лишь в том случае, если встречаются одноименные агглютиноген и агглютинин: А и α, В и β.
Агглютинация эритроцитов
У новорожденных в крови отсутствуют антитела системы АВ0 и образование их к антигенам, которых у него нет, происходит в течение первого года жизни. Антитела не вырабатываются против «своего», т. е. присутствующего в эритроците данного человека антигена — А и В. Однако антигены А и В широко распространены в животном мире, поэтому, после рождения человека в его организме начинается формирование антител против антигенов А и В, поступающих с пищей, бактериями.
Существуют разновидности агглютиногена А: А1, А2, А3 и др. Из них самым сильным является А1. Поэтому при слабоактивных сыворотках, содержащих агглютинин a, кровь таких лиц может быть ошибочно отнесена к I (0) группе. Агглютиноген В также существует в нескольких разновидностях.
У лиц с I(0) группой крови на поверхности мембран эритроцитов имеется антиген Н, который доступен для взаимодействия с анти-Н-антителами, довольно часто встречающимися в плазме крови II(A) и IV(АВ) групп и несколько реже III(В) группы. В этих случаях переливание крови I(0) группы лицам, имеющим другие группы крови, может привести к гемотрансфузионным осложнениям. Наличие Н-антигена на поверхности мембран эритроцитов послужило основанием обозначать систему АВО как АВН.
Существуют следующие методики определения групп крови по системе АВ0:
— с использованием изогемагглютинирующих (стандартных) сывороток;
— перекрестным методом, т.е. одновременно при помощи стандартных сывороток и стандартных эритроцитов;
— с использованием моноклональных антител.
Определение группы крови с использованием изогемагглютинирующих (стандартных) сывороток. Группы крови определяют путем постановки реакции агглютинации крови реципиента (человека, которому переливают кровь) со стандартными сыворотками I–IV групп крови, полученных от доноров.
Стандартные сыворотки содержат только агглютинины соответствующих групп крови и имеют стандартную окраску: сыворотка 0(I) группы не окрашена, А(II) группы — синяя, B(III) группы — розовая, AB(IV) — желтая.
Определение группы крови проводят в помещении с хорошим освещением при температуре +15–+25°С. При температуре выше 25 °С реакция агглютинации замедляется, а при температуре ниже 15 °С возможна холодовая агглютинация.
На пластинку наносят по одной большой капле (0,1 мл) стандартных сывороток соответствующих групп 2 серий. Рядом с каждой каплей сыворотки наносят маленькую каплю (0,01 мл) исследуемой крови, соблюдая соотношение 10:1. Капля вносимой в сыворотку крови должна быть меньше объема капли сыворотки, чтобы не снизить титра содержащихся в них агглютининов. Смешивают каплю сыворотки с каплей крови индивидуальной чистой стеклянной палочкой, затем, периодически покачивая пластинку, наблюдают за ходом реакции в течение 5 мин.
Агглютинация начинается в течение первых 10–30 с, однако наблюдение следует вести до 5 мин ввиду возможности более поздней агглютинации с эритроцитами, содержащими слабые разновидности антигенов А или В. Через 3 мин в капли смеси сыворотки с эритроцитами, в которых наступила агглютинация, добавляют по одной капле (0,05 мл) изотонического раствора хлорида натрия и продолжают наблюдение при периодическом покачивании пластинки до истечения 5 мин.
Дата добавления: 2019-07-17; просмотров: 781; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!