Свойствами коллоидных растворов, характерными для растворов белка,
являются:
а) высокая вязкость
б) при стоянии выпадают в осадок
в) эффект Тиндаля
г) низкое онкотическое давление
д) способность к диализу
Тест 14.
ВЫБЕРИТЕ ПРАВИЛЬНЫЙ ОТВЕТ:
Методы очистки белковых растворов от низкомолекулярных примесей:
а) диализ
б) фракционное высаливание
в) электрофорез
г) гель-фильтрация
д) ультрацентрифугирование
Тест 15.
ВЫБЕРИТЕ ПРАВИЛЬНЫЙ ОТВЕТ:
Белки, находящиеся в изоэлектрической точке:
а) подвижны в электрическом поле
б) обладают наименьшей растворимостью
в) не перемещаются в электрическом поле
г) имеют наибольший заряд
д) имеют заряд равный нулю
Тест 16.
ВЫБЕРИТЕ ВСЕ ПРАВИЛЬНЫЕ ОТВЕТЫ:
Гель-фильтрация основана на различие белков в:
а) молекулярном весе
б) заряде
в) размере частиц
г) изоэлектрической точке
д) размере гидратной оболочки
Тест 17.
ВЫБЕРИТЕ ВСЕ ПРАВИЛЬНЫЕ ОТВЕТЫ:
Заряд белка зависит от:
а) температуры среды
б) рН среды
в) наличия и величины гидратной оболочки
г) соотношения NH2- и COOH-групп
д) вида третичной структуры
Тест 18.
ВЫБЕРИТЕ ВСЕ ПРАВИЛЬНЫЕ ОТВЕТЫ:
Методами разделения белков, основанными на различии в заряде,
являются:
а) ультрацентрифугирование
б) электрофорез
в) гель-фильтрация
г) аффинная хроматография
д) ионообменная хроматография
Тест 19.
ВЫБЕРИТЕ ВСЕ ПРАВИЛЬНЫЕ ОТВЕТЫ:
|
|
|
Факторы, вызывающие денатурацию белков:
а) ацетон
б) соляная кислота
в) хлорид натрия
г) ацетат свинца
д) хлорид кальция
Тест 20.
ДОПОЛНИТЕ:
При денатурации разрушаются ________ , _________ , _________ структуры
Белка.
Тест 21.
ДОПОЛНИТЕ:
Способность веществ проходить через полупроницаемую мембрану
называется ________ .
Тест 22.
ДОПОЛНИТЕ:
Необратимое выпадение белка в осадок называется ____________ .
Тест 23.
ДОПОЛНИТЕ:
Первыми из альбуминов и глобулинов крови при фракционном высаливании выпадают в осадок _______ .
Тест 24.
ДОПОЛНИТЕ:
Значение рН, при котором суммарный заряд белка равен нулю, называется
_________ ________ .
Тест 25.
ДОПОЛНИТЕ:
Белки по соотношению функциональных групп делятся на _________ ,
_________ , _________ .
Тест 26.
ДОПОЛНИТЕ:
Альбумины по соотношению амино- и карбоксильных групп относятся к
_______________ белкам.
Тест 27.
ДОПОЛНИТЕ:
Метод разделения белков, основанный на избирательном взаимодействии
Их с лигандами, называется __________ __________ .
Тест 28.
ДОПОЛНИТЕ:
Нейтральный белок при электрофорезе при рН ниже изоэлектрической
|
|
|
Точки будет двигаться к ________________ электроду.
Тест 29.
ДОПОЛНИТЕ:
Кислый белок при электрофорезе при рН=8,6 будет двигаться к
_____________ электроду.
Тест 30.
ДОПОЛНИТЕ:
Основной белок при электрофорезе при рН=7,0 будет двигаться к
_____________ электроду.
ОТВЕТЫ по теме: "ФИЗИКО‑ХИМИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА БЕЛКА"
| 1 – г 2 – б 3 – д 4 – в 5 – а 6 – г 7 – а 8 – а 9 – б 10 – в 11. в, г, д 12. а, б 13. а, в 14. а 15. б, в, д | 16. а. в 17. б, г 18. б, д 19. б, г 20. вторичная, третичная, четвертичная 21. диализ 22. денатурация 23. глобулины 24. изоэлектрическая точка 25кислые, основные, нейтральные 26. кислым 27. аффинная хроматография 28. отрицательному 29. положительному 30. отрицательному |
Тема 4: "Изучение свойств и биологической роли витаминов водорастворимой группы. Методы исследования свойств витаминов и количественного определения витамина С.
1. Продолжительность занятия 180 мин. Место проведения - кафедра биохимии
2. Цель занятия:Систематизировать знания студентов о строении, свойствах и биологической роли витаминов. Научить выявлять зависимость биологической активности витаминов от специфичности строения и наличия функциональных групп в их структуре. Познакомить с методами количественного определения витамина С в пищевых продуктах и моче. Научить качественному анализу по изучению окислительно-восстановитель-ных свойств витамина В2.
|
|
|
3. Конкретные задачи:
3.1. Студент должен знать:
-строение, классификацию витаминов и представителей в группах
-название витамина: буквенное, по химической структуре, по биологическому действию
-участие витамина в биохимических реакциях
-название и характеристику авитаминоза
-суточную потребность витамина
-основные пищевые продукты, содержащие данный витамин.
3.2. Студент должен уметь:
-написать подробную характеристику витаминов водорастворимой группы
-использовать метод количественного определения витамина С в практической работе
-анализировать результаты по качественному методу исследования окислительно-восстановительных свойств витамина В2.
4. Мотивация: Знания и навыки, приобретенные на занятии необходимы: для понимания роли витаминов в питании и жизнедеятельности человека, молекулярных механизмов биологической активности витаминов для оценки результатов химических реакций, позволяющих обнаружить присутствие витаминов в биологическом субстрате и возможности контроля за обеспеченностью организма витаминами , сохранностью витаминов в пищевых продуктах и других источниках.
|
|
|
5. Задание для самоподготовки: Студенты должны изучить рекомендуемую литературу, используя вопросы для самоподготовки:
Основная литература
5.1. Выучить лекционный материал по теме « Витамины».
5.2. Использовать учебник Березов Т.Т., Коровкин Б.Ф. «Биологическая химия». М.: Медицина, 1998, с.-204-210,с. 220-248.
5.3. Учебно-методическое пособие для практических занятий по биологической химии. СПб.2005
5.4. Биохимия: Учебник / Под редакцией Е.С. Северина./ М. ГЭОТАР – Мед., 2003, с.-80-83, 269-273
Дополнительная литература
5.5. Марри Р. и др. Биохимия человека. М.: Мир, 1993, т1., с. 163-168.
5.6. Учебное пособие «Биохимические основы микронутриентологии»
Под редакцией проф. Дадали В.А..СПб:ГОУВПО СПбГМА им. И.М.Мечникова. 2002. с. 42.
5.7. Лабораторные методы исследования в клинике. Под ред. Меньшикова В.В.,М.: Медицина, 2002, II том,с. 60-68.
5.8. Подготовиться к тестовому контролю.
Оснащение занятия:
В каждой учебной комнате вывешены таблицы по витаминам В1, В2, В6, С, РР
в аудитории №1 – стенды и таблицы по водо- и жирорастворимым витаминам. - В работе использованы: свежая и квашеная капуста, сырой и вареный картофель, хвоя и моча.
6. Вопросы для самоподготовки:
6.1.Что такое витамины и почему они так называются?
6.2. Классификация витаминов, все их названия.
6.3. Дать понятия о провитаминах и антивитаминах.
6.4. Что такое гипо-, гипер- и авитаминозы, гипо- и акоферментозы, причины их возникновения, меры профилактики.
6.5. Характеристика группы водорастворимых витаминов (химическая формула их и коферментов, активные группы в молекуле.
6.6. Какое участие принимают витамины в молекулярных механизмах жизнедеятельности?
6.7. Название ферментов с участием витаминов, суточная потребность, характеристика авитаминоза, содержание в продуктах, факторы, влияющие на устойчивость витаминов).
6.8. Какие методы используют для определения аскорбиновой кислоты?
6.9. Какие свойства аскорбиновой кислоты и 2,6-дихлорфенолиндофенола положены в основу метода количественного определения витамина С?
6.10. Сколько витамина С выделяется с мочой за сутки и о чем свидетельствует отсутствие витамина С в моче?
6.11. Какие факторы способствуют разрушению витамина С в пищевых продуктах? Какие профилактические меры необходимо соблюдать для предохранения витамина С от разрушения в пищевых продуктах?
6.12. Какова качественная реакция на витамин В2?
7. Этапы занятия и контроль их усвоения.
| № | Этапы проведения занятия | Форма проведения | Время (мин) |
| 7.1 7.2. 7.3. 7.4. 7.5. 7.6. | Постановка задачи. Контроль исходного уровня знаний. Разбор теоретического материала Разбор практических работ. Приобретение практических навыков. Обсуждение работы студентов. Подведение итогов занятия. | Излагает преподаватель Тестовый контроль. Опрос студентов по контрольным вопросам. Излагает преподаватель. Проведение практических работ и оформление протоколов. Ответы на вопросы студентов. | 5 10 55 10 90 10 |
Пример билета проверочного контроля
Витамин В2
1. Строение витамина
2. Название кофермента
3. Биологическая роль ( название фермента и его функция)
4. Суточная потребность и содержание в продуктах
5. Клиника авитаминоза
Лабораторная работа № 4
Количественное определение витамина С (аскорбиновой кислоты) в пищевых продуктах и в моче по методу Тильманса
В настоящее время существуют методы определения витамина С и его производных в крови, тканях, слюне, пищевых продуктах и фармакопейных препаратах.
Может быть использовано спектрофотометрическое определение, использование капиллярного электрофореза, поточно-флюоресцентного метода и определение с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии.
Одним из наиболее широко распространенных методов количественного определения витамина С является оксидометрический метод, основанный на способности аскорбиновой кислоты (АК) восстанавливать 2,6-дихлорфенол, который при этом переходит в бесцветную лейкоформу. Этот метод определяет только восстановленную форму АК. С его помощью можно получить сведения о содержании витамина С в пищевых продуктах, а также в к сыворотке крови и других биологических тканях, и на основе полученных данных судить об обеспеченности им организма .
В гигиенических исследованиях использование данного метода позволяет контролировать сохранность витамина С в пищевых продуктах в зависимости от способов и сроков хранения, характера технологической и, в частности, кулинарной обработки пищи, позволяет выявить изменения в обмене витамина С при воздействии химических веществ на организм в производственных условиях .
Исследуемый материал: 1. Хвоя; 2. Картофель сырой и варёный; 3. Капуста квашеная и свежая; 4. Моча.
Реактивы и оборудование: 1. Натриевая соль 2,6-дихлорфенолиндофенол 0,001 Н раствор; 2. Хлороводород 10% раствор; 3. Весы и разновесы; 4. Мер-ные цилиндры на 50 и 10 мл; 5. Пипетки на 1 мл; 6. Фарфоровые ступки с
пестиками; 7. Микробюретки; 8. Стеклянные палочки; 9. Колбочка или широкие пробирки; 10. Бюретки; 11. Скальпель; 12. Воронки; 13. Вата.
Принцип метода: определение витамина С основано на его сильной редуцирующей способности.
При определении используют окислительно-восстановительную реак-цию между аскорбиновой кислотой и 2,6-дихлорфенолиндофенолом (2,6-ДХФИФ) - краской Тильманса в кислой среде. Раствор 2,6-ДХФИФ в нейт-ральной среде окрашен в синий цвет. Пока в растворе есть аскорбиновая кис-лота, названный реактив восстанавливается ею и при этом обесцвечивается. После окисления им всей аскорбиновой кислоты избыток реактива окраши-вает раствор в кислой среде в слабо розовый цвет. При появлении окраски титрование прекращают и замечают количество раствора 2,6-ДХФИФ, затра-ченного на титрование.
Химизм реакции:
Витамин С (восстанов- 2,6 -ДХФИФ
ленная форма) (окисленная форма)
Витамин С (окисленная форма) 2,6-ДХФИФ (восстановленная форма)
Определение содержания витамина «С» в хвое и свежей капусте.
Хвоя и капуста содержат большое количество витамина С, поэтому для его определения нужно брать лишь небольшую часть исследуемого материала.
Приготовление вытяжки: Хвою или свежую капусту отвешивают на весах в количестве 1,0 г и тщательно измельчают в фарфоровой ступке с 2 мл 10% раствора хлорводорода. Растертую массу осторожно, без потерь (палочкой) переносят в мерный цилиндр (на 40 мл для хвои и на 10 мл для капусты, ступку и пестик обмывают 10% раствором соляной кислоты и промывную жидкость присоединяют к общей порции вытяжки. Объем жидкости в цилиндре доводят дистиллированной водой до метки 40 мл для хвои и до метки 10 мл для свежей капусты. Содержимое цилиндра перемешивают и оставляют стоять 10 мин. Не встряхивая, вытяжки филь-труют через ватный фильтр и 1 мл фильтрата употребляют для титрования.
Титрование: в колбочку отмеривают пипеткой 1 мл фильтрата и прибавляют к нему 19 мл воды. Содержимое титруют из микробюретки
0,001 Н раствором 2,б-ДХФИФ до появления слабо розового окрашивания, не исчезающего в течение 30 с. Вычисляют содержание витамина С в 100 г хвои или свежей капусты.
Расчет: молекулярная масса аскорбиновой кислоты равна 176. Находят грамм-эквивалент аскорбиновой кислоты. В реакции с 2,6-ДХФИФ она двухосновная, следовательно, грамм-эквивалент равен М/2=176/2=88 г, а 1 мл 0,001 Н раствора 2,6-ДХФИФ соответственно равен 0,088 г аскорбиновой кислоты. Количество миллилитров 2,6-ДХФИФ, затраченного на титрование исследуемого раствора, эквивалентно содержанию витамина С в титруемой жидкости. Расчет содержания витамина С (Х) в 100 г хвои или капусты проводится по следующей формуле:
Х==0,088 . а . с . 100/(b . d),
где а - объем раствора 2,6-ДХФИФ, пошедшего на титрование; d – взятая навеска хвои или свежей капусты; с - общий объем вытяжки; b - объем водной вытяжки, взятой для титрования (1 мл).
Определение содержания витамина «С» в сыром и вареном картофеле и в квашеной капусте.
1 г исследуемого продукта растирают в ступке с 1 мл 10% раствора хлорводорода, затем добавляют 9 мл воды и дают постоять 10 мин. Отстоявшийся верхний слой вытяжки фильтруют (по палочке) через ватный фильтр в колбочку. Остаток растертой массы промывают в ступке с небольшими порциями воды 2 - З раза и фильтруют. Содержимое колбочки перемешивают и титруют раствором 2,6-ДХФИФ до слабо розового окрашивания, не исчезающего в течение 30 с. Расчет проводится по формуле:
Х==0,088 . а . 100/d (обозначения те же)
Определение содержания витамина С в моче.
В колбочку отмеряют 5 мл мочи, добавляют 19 мл воды и 1 мл 10% раствора хлорводорода. Перемешивают и титруют раствором 2,6-ДХФИФ до слабо-розовой окраски. Вычисляют содержание витамина С (Х) в суточном количестве мочи, равном 1500 мл:
Х=0,088 . а .1500/5,
где 5 – это количество мл мочи взятой для исследования.
Дата добавления: 2019-02-13; просмотров: 129; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!