Провести просте та складне забарвлення мазків



Просте забарвленняполягає в тому, що при забарвленні застосовують лише один барвник, найчастіше фуксин або метиленовий синій.

Фуксин забарвлює швидше (1-2 хв.) й інтенсивніше; він забарвлює однаково всі види бактерій. Метиленовий синій забарвлює повільніше (3-5хв.), менш яскраво, але препарати, але препарати виходять кращі.

Щоб зробити забарвлення необхідно на фіксований мазок на певний час нанести кілька крапель барвника, а потім мазок промити дистильованою водою і висушити фільтрувальним папером (промокаючи) або на повітрі. Барвник використовують у вигляді розчину.

Складне забарвлення

1. Забарвлення за Грамом. Цей спосіб забарвлення є універсальним тому, що його застосовують для всіх мікробів. Всі бактерії, залежно від реакції їх на цей спосіб забарвлення, поділяють на грампозитивні і грамнегативні.

Техніка забарвлення. На фіксований мазок кладуть смужку фільтрувального паперу за розміром трохи вужчу і коротшу від предметного скла і наносять кілька крапель карболового розчину генціанвіолету на 2 хв. Потім зливають барвник і знімають папір і, не промиваючи водою, наносять на препарат розчин Люголя на 2 хв. Після почервоніння мазка розчин Люголя зливають і знебарвлюють 96° спиртом, занурюючи препарат в склянку з спиртом на 30 с. Далі препарат промивають водою, підсушують і дофарбовують додатково фуксином Грейфера протягом 10-30 с. Після цього фарбу зливають, препарат промивають водою, висушують і досліджують під мікроскопом. Грампозитивні мікроби забарвлюються у темно-фіолетовий, а грамнегативні - в рожевий колір.

2. Забарвлення за Ціль-Нільсеном застосовують для виявлення кислостійких мікробів. До них належать збудники туберкульозу, паратуберкульозу та ін.

Техніка забарвлення. На фіксований мазок кладуть смужку фільтрувального паперу і наливають карболовий фуксин Ціля. Мазок з барвником 2-3 рази підігрівають, тримаючи високо над полум'ям пальника до появи пари і щоразу відставляючи препарат для охолодження. Дають препарату охолонути, знімають папірець, зливають барвник і промивають препарат водою. Знебарвлюють препарат 5%-м розчином сірчаної кислоти (занурюють у склянку з кислотою 2-3 рази, не затримуючи в кислоті).

Препарат старанно промивають водою і додатково забарвлюють метиленовим синім протягом 3-5 хв. Кислотостійкі бактерії забарвлюються в рубіново-червоний, інші складові частини мазка і некислотостійкі мікроби - в синій колір.

 

Описати, чому мікроби забарвлюються в різні кольори при складних забарвленнях (за Грамом і Ціль-Нільсеном)

____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Завдання 4.

Замалювати мікроскопічну картину виготовлених і забарвлених препаратів

  ________________________                       ________________________

_________________________                    _________________________

Завдання 5

Виготовлення живильних середовищ

Для приготування МПА необхідно взяти готові сухі живильні середовища, які випускає промисловість. Розчинити їх в дистильованій воді як зазначено на етикетці, розлити по пробірках, колбах або бактеріальних чашках.

Колби і пробірки з середовищами закрити пробками, упакувати в металеві сітки і стерилізувати в автоклаві 30 хвилин. Ватні пробки перед стерилізацією обгорнути папером. Для отримання скошеного агару м'ясопептонний агар у пробірках після стерилізації охолодити в нахиленому положенні (як на малюнку 1).

 

 

 

Мал.1 Скошений агар

 

Опишіть виготовлення м΄ясної води та МПБ

______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

 

Завдання 6


Дата добавления: 2019-02-12; просмотров: 182; Мы поможем в написании вашей работы!

Поделиться с друзьями:






Мы поможем в написании ваших работ!