Методы исследования кала на личинки гельминтов
Метод Бермана
Применяется как специальный метод для диагностики стронгилоидоза и основан на положительном гидротаксисе личинок.
Необходимое оборудование
Штатив
Стеклянная воронка (диаметром 10 см)
Металлическое сито или сетка "мельничный газ"
Резиновая трубка с зажимом
Предметные стекла
Стеклянные или деревянные палочки
Чашки Петри
Центрифуга
Микроскоп
Подготовка к исследованию
1) Собрать аппарат Бермана, для чего закрепить в штативе стеклянную воронку с металлическим ситом. На нижний конец воронки надеть резиновую трубку с зажимом.
2) Пробу кала объемом 20-50 г поместить на металлическое сито или мелкоячеистую металлическую сетку, или сетку "мельничный газ".
3) Сетку с пробой кала приподнять и в воронку налить воду таким образом, чтобы нижняя часть сетки с калом была погружена в воду.
4) Через 24 ч зажим на резиновой трубке быстро открыть и жидкость спустить в центрифужную пробирку.
5) Полученную жидкость центрифугировать 1-2 мин.
6) Надосадочную жидкость быстро слить.
7) Осадок нанести на предметное стекло или в чашку Петри.
8) Можно спустить жидкость в чашку Петри и исследовать без центрифугирования с использованием МБС. При обнаружении личинок для их обездвиживания внести одну каплю раствора Люголя, личинку перенести на предметное стекло и прикрыть покровным.
|
|
|
9) Микроскопировать при увеличении: объектив 
8 или 10, окуляр 7 или 10, уточнение морфологического строения при увеличении: объектив 40, окуляр 10.
Метод Бермана в модификации Супряги
Необходимые реактивы и оборудование
Дистиллированная вода
Химические стаканчики
Стеклянные палочки
Чашки Петри
Пробирки центрифужные
Микроскоп бинокулярный стереоскопический (МБС)
Подготовка к исследованию
1) В химический стаканчик положить пробу кала объемом 10-15 г.
2) Залить теплой (40 °С) дистиллированной водой, чтобы проба кала была полностью покрыта.
3) Через 20-30 мин слить жидкость в центрифужные пробирки.
4) Отстаивают 10-15 мин или центрифугируют 1 мин при 1500 об./мин.
5) Слить осторожно надосадочную жидкость, осадок поместить в чашку Петри.
6) Исследовать осадок в чашке Петри под МБС (с нижней подсветкой): объектив 2, окуляр 12, 14, обращая внимание на подвижные, слабоподвижные и неподвижные личинки.
7) Неподвижные личинки микроскопируют с увеличением: объектив 8, 10 и х40; окуляр 10.
Эффективность метода. Эффективен при высокой и средней интенсивности инвазии.
Метод Харада-Мори в модификации Маруашвили (метод культивирования личинок на фильтровальной бумаге)
|
|
|
Применяется для диагностики анкилостомидозов.
Необходимые реактивы и оборудование
Фильтровальная бумага (размером 16 3,5 см)
Стеклянная банка (0,7-0,8 л)
Полиэтиленовая пленка
Термостат
Центрифуга
Водяная баня
Подготовка к исследованию
1) На фильтровальную бумагу нанести свежевыделенные фекалии в виде мазка, оставляя края фильтровальной бумаги свободными.
2) Смочить стенки банки водой, опустить в банку фильтровальную бумагу и поверхностью без фекалий зафиксировать ее на стенках банки.
3) Налить в банку воды так, чтобы в нее был погружен нижний конец бумаги без фекалий.
4) Верх банки закрыть полиэтиленовой пленкой или чашкой Петри.
5) Банку поставить в термостат при температуре 28 °С на 5-6 дней (в теплое время года банку можно оставлять при комнатной температуре, увеличив экспозицию до 8-10 дней).
6) Часть личинок может подняться вверх по фильтровальной бумаге, поэтому работа должна проводиться с соблюдением техники безопасности.
7) Для безопасности можно предварительно убить личинки, поместив пробирку в водяную баню при температуре 50 °С на 15 мин.
Эффективность метода. Эффективен для обнаружения и идентификации личинок анкилостомид.
|
|
|
Дата добавления: 2019-02-12; просмотров: 393; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!