ПОДГОТОВКА БОКСА И ИНСТРУМЕНТАРИЯ

⇐ ПредыдущаяСтр 5 из 5

За 1,5-2 часа до извлечения эмбрионов в боксе проводят влажную уборку. Столы, микроскопы, инструменты и другое оборудование обрабатывают 96%-м этанолом. Стерилизацию воздуха проводят бактерицидными лампами в течение 1 часа. Стеклянную посуду моют под проточной водой моющими средствами, после чего тщательно ополаскивают 5-7 раз дистиллированной водой. Стерилизуют в сушильном шкафу при температуре +180-200°С в течение 1 часа предварительно завернув в фольгу.

Шприцы, иглы, металлический инструмент стерилизуют кипячением в дистиллированной воде в течение 30 минут. После просушивания инструмент запаивается в стерильные полиэтиленовые пакеты.

Катетеры для извлечения эмбрионов, силиконовые трубки для оттока среды, пробки тщательно моют моющими средствами, ополаскивают дистиллированной водой, обрабатывают 96%-м этанолом и хранят в стерильных пакетах. Перед работой с эмбрионами руки тщательно обрабатывают 70%-м этанолом. Растворы для извлечения эмбрионов и для работы с ними готовят в боксе над пламенем спиртовки. Для работы в боксе необходим комплект спецодежды. В боксе поддерживается температура +22-25°С.

ВЕТЕРИНАРНО-САНИТАРНЫЕ ТРЕБОВАНИЯ ПРИ ТРАНСПЛАНТАЦИИ ЭМБРИОНОВ

Строгое соблюдение ветеринарно-санитарных требований на всех этапах технологии трансплантации эмбрионов крупного рогатого скота обеспечивает охрану здоровья доноров и реципиентов, профилактику и предупреждение завозных заболеваний, способствует получению высококачественной эмбриопродукции. Используемые животные должны быть средней упитанности, иметь нормальную половую цикличность, хорошо развитую половую систему, а также отрицательно реагировать на бруцеллез, туберкулез, паратуберкулезный энтерит, хламидиозный аборт, лептоспироз, лейкоз, инфекционный ринотрахеит, пустулезный вульвовагинит, вирусную диарею, трихоманоз, кампилобактериоз, паратуберкулез и др. Результаты ветеринарных исследований доноров и реципиентов на инфекционные и гинекологические болезни должны быть указаны в ветеринарном свидетельстве или сертификате, ежемесячно необходимо проводить клинический осмотр доноров и реципиентов. В производственных помещениях ежедекадно проводят очистку и дезинфекцию.

С целью предупреждения заноса и распространения заразных заболеваний специалист по трансплантации должен выполнять следующее: ежедневно проводить влажную уборку в лаборатории, где готовят инструменты и оборудование для получения, пересадки и криоконсервирования эмбрионов; бокс должен быть простерилизован бактерицидной лампой в течение 30 мин; помещение бокса не реже одного раза в неделю подвергать тщательной уборке (моют полы, стены, протирают мебель 3% раствором перекиси водорода и нейтральными моющими средствами), в боксе работать в белом халате, чепчике или косынке и сменной обуви.

До и после выполнения работ по ректальному исследованию доноров и реципиентов, искусственному осеменению, извлечению, оценке, консервированию и пересадке эмбрионов обязательно мыть руки с мылом, а затем протирать их ватным или марлевым тампоном, смоченым 70%-м этанолом. Спецодежду стирать с обязательным кипячением и проглаживанием горячим утюгом. Резиновые сапоги, нарукавники и халаты по окончании работ регулярно моют и дезинфицируют 2% раствором хлорамина. Среды, гормональные и другие препараты, применяемые для вызывания полиовуляции, синхронизации охоты доноров и реципиентов, получения, криоконсервирования и пересадки эмбрионов, должны отвечать требованиям ГОСТа и храниться в соответствии с наставлениями по их применению.

С целью предупреждения переноса инфекции от донора к реципиенту при эмбриопересадках, извлеченные эмбрионы после морфологической оценки обрабатывают 0,25% раствором трипсина при температуре +37°С в течение 30-60 с. Для предотвращения бактериальной контаминации эмбрионов следует использовать антибиотики путем введения их в среды для вымывания, культивирования и замораживания. Необходимо обязательно проводить санацию матки донора после вымывания.

Замороженные эмбрионы хранят при температуре -196°С в пайеттах. Не допускается преждевременное оттаивание эмбрионов и их повторное замораживание. Деконсервированные эмбрионы следует пересаживать не более чем через час после оттаивания.

УЧЕТ И ОТЧЕТНОСТЬ

Для контроля за проведением работ на центрах и пунктах трансплантации эмбрионов в молочном и мясном скотоводстве лабораторией трансплантации эмбрионов БелНИИЖ совместно со специалистами МСХиП РБ разработаны специальные формы учета и отчетности с целью постоянного контроля и анализа результатов применения отдельных схем, режимов и методов работы, что позволяет повышать ее эффективность в практике животноводства.

При поступлении на центр или пункт трансплантации на каждого донора и реципиента заводится соответственно оформленная карточка пламенного учета установленной формы. Характеристика воспроизводительной способности животного и другие показатели, перечисленные в требованиях при отборе коров доноров, а также причина выбраковки при использовании выбракованных из основного стада животных, указываются в прилагаемой к племенной карточке пояснительной записке. На используемых быков-производителей также заполняется карточка племенного учета или племсвидетельство. В правом верхнем углу карточек племенного учета отмечают группы крови животного (для генетического контроля происхождения потомства).

На каждого полученного методом трансплантации эмбрионов теленка в день его рождения составляют все необходимые документы: акт на оприходование приплода (форма №95 сельхозучета); журнал приплода и выращивания молодняка крупного рогатого окота.

Генетический контроль происхождения телят-трансплантантов проводят в возрасте1-1,5 месяца на основании экспертизы систем групп крови родителей и потомства. На каждого бычка или телочку заполняют соответствующие карточки племенного учета.

На центрах и пунктах трансплантации эмбрионов ведутся специальные журналы для регистрации и непосредственного учета работ (приложение 1-8).

По итогам работы за год составляется отчет (см. приложение), представляемый в вышестоящие организации.

Приложения.

Журнал учета поступления доноров №1

№ пп

Дата поступления

Индивид. номер

Кличка

Владелец животного

Возраст в месяцах и отелах

Продуктивность за 305 дней по наивысшей лактации

Дата обследования донора

Результаты обследования

Примечания

лактация

удой, кг

жира %

белка %

Журнал учета гормональной обработки и использования доноров №2

№ пп

Индивид. номер и кличка донора

Обследование донора до обработки

Обработка доноров

Искусственное осеменение

Результат ректального обследования яичников

Извлечение эмбрионов

Использование

эмбрионов

Примечания

Дата

Результаты

Дата

Наименование препарата

Доза

Дата

Кличка и

но-

мер

быка

Дата

Вымыто эмб-рионов, шт.

Оценка качества

эмбрионов

пересажено

заморожено

правый

левый

отл.

хор.

удов.

не- удов.

Журнал учета работы с реципиентами №3

№пп

Сведения о реципиенте

Результаты ректального обследования

Обработка биопрепаратами

Охота (дата, время)

Результаты ректального исследования перед пересадкой

Пересадка эмбрионов

Происхождение эмбриона

ФИО специа-

Результат пересадки

Примечания

индивидуальный номер реципиента

владелец животного (хозяйство)

возраст (мес.), живая масса (кг)

Дата

Наи-менование препаратов, доза

Дата

свежий или замороженный

Качество и стадия развития

№ пайетты

Кличка и номер

листа по пересадке

стельная

Не стельная

донора

отца

Журнал по учету и оценке качества эмбрионов №4

№ пп

Кличка, индвид. номер донора

Дата вымывания

День извлечения

Состав среды

Извлечено эмбрионов

Порядковый номер эмбриона

Стадия развития и оценка качества эмбриона

Назначение и использование

Номер пайетты

Примечание

Всего

Правый рог

Левый рог

нормальные

дегенерированные, яйцеклетки

нормальные

дегенерированные, яйцеклетки

Журнал учета криоконсервирования эмбрионов №5

№

пп

Кличка, индивид. номер донора

Замораживание эмбрионов

Хранение эмбрионов

Оттаивание эмбрионов

Морфологическая оценка эмбрионов

Дата пересадки

Номер реципиента, хозяйство

Результаты пересадки

Примечание

Дата

Криопротектор

Режим

Марка прибора

№ пайетты

№ канистры

Дата

Режим

До замораживания

После замораживания

Журнал культивирования эмбрионов №6

Дата	Индивид. № донора	Эмбрионы		Культивирование			Морфологическая оценка до культивирования	Морфологическая оценка после культивирования	Куда направлен эмбрион; для каких целей	Примечание
		номер	возраст	среда	условия	продолжительность

Журнал учета телят-трансплантантов №7

№

пп

Индивидуальный номер

Кличка

Мать -

донор, индивид. номер

Отец индивид. номер

Дата

Место рождения

По-рода

Линия

Живая масса

Достоверность происхождения

Примечания

При рождении

1 мес.

3 мес.

6 мес.

12 мес.

Подтверждается, не подтверждается

лаборатория ген. экспертизы

Журнал генетического происхождения потомства крупного рогатого скота №8

№

пп

Дата рождения

Дата пересадки

Пол

Трансплантант

Мать

Отец

Реципиент

Запись достоверности происхождения

Примечания

кличка, инв. №

группа крови

кличка, инв.№

группа крови

кличка, инв.№

группа крови

кличка, инв.№

группа крови

Сопроводительная на проведение тестирования телят-трансплантантов

Хозяйство________________Район_____________________Область________________________

Потомок				Отец		Донор			Реципиент
№ пробы	Инв. № трансплант.	Дата рождения	пол	Инв. №, кличка	ГПП	№ пробы	Инв. №, кличка	Дата предварительного тестирования	№ пробы	Инв. №, кличка	Дата предварительного тестирования

Отчет по трансплантации эмбрионов по пункту (хозяйству) за________год (журнал№9)

№№ пп	Выполнение работы	Всего за год	В том числе
№№ пп	Выполнение работы	Всего за год	1	2	3	4	5	6	7	8	9	10	11	12
1	Обработано доноров для вызывания суперовуляции
2	Использовано доноров для извлечения эмбрионов
3	Получено эмбрионов всего, в т.ч.
	нормальных
	дегенерированных
	неоплодотворенных яйцеклеток
4	Заморожено эмбрионов
5	Отобрано и подготовлено реципиентов
6	Проведено эмбриопересадок
7	Исследовано реципиентов на стельность
7	в т.ч. установлена стельность, гол.
8	Получено телят от эмбриоперересадок,
8	в т.ч. мертворожденных
9	Абортировало реципиентов