ДНК зависимые ДНК полимеразы, ДНК лигазы
Полимера́за — фермент, главной биологической функцией которого является синтез полимеров нуклеиновых кислот. ДНК-полимераза и РНК-полимераза синтезируют молекулы ДНК и РНК соответственно, в основном, путём комплементарногокопирования родительских цепей ДНК или РНК.
Ферменты, ответственные за сборку других полимеров, не относят к полимеразам. К примеру, ферментативный комплекс, осуществляющий сборку аминокислот в белки, называется рибосомой, а не «белковой полимеразой».
Многие полимеразы, полученные из термофильных бактерий (например, Taq-полимераза из Thermus aquaticus) или архей
ДНК-лигаза
ДНК-лигаза – это фермент, катализирующий образование фосфодиэфирной связи в двухцепочечной молекуле ДНК, Т.Е. ПРОЦЕСС ЛИГИРОВАНИЯ (СШИВАНИЯ)
ДНК-лигаза фага Т4
– мономерный полипептид (молекулярная масса 68 кДа)
– катализирует образование фосфодиэфирной связи между ‘-фосфатным (5‘-р) и 3 гидроксильным (3‘-ОН) концами ДНК
ДНК-лигаза фагаТ4
обеспечивает объединение любых двуцепочечных фрагментов ДНК, поэтому данный фермент является одним из важнейших ферментов создания рекомбинантных молекул ДНК
Среди ДНК-зависимых ДНК-полимераз наибольшее применение в генной инженерии находят ДНК-полимераза I E. coli и ее большой фрагмент (фрагмент Кленова),
. ДНК-полимераза I E. coli (Pol I)
Обнаружена А. Корнбергом в 1958 г.
Мономерный полипептид с молекулярной массой 103 кДа, имеет трехдоменную структуру.
Каждый домен обладает отдельной ферментативной активностью:
N-концевой домен - 5‘-3 ‘-экзонуклеазной; С-концевой - 5‘-3 ‘- полимеразной; средний домен - 3‘-5‘ - экзонуклеазной
Связывается с одноцепочечными участками двойной спирали ДНК в местах одноцепочечных разрывов, а также с концами двухцепочечных молекул ДНК
Дата добавления: 2016-01-04; просмотров: 82; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!